液相色谱测定盐酸环苯扎林估计和Aceclofenac制药配方

文摘

敏感,选择性和精确的高效液相色谱方法开发和验证的同时测定盐酸环苯扎林和Aceclofenac作为原料药和配方。方法采用Luna C18柱(250 x 4.6毫米id、5μm粒度)作为固定相,而甲醇和0.02 KH2PO4 pH值(75:25 v / v, 3)作为流动相。盐酸环苯扎林的Rt和Aceclofenac观察4.2和9分钟,分别。分析进行了吸光度模式在280海里。的线性回归分析数据校准块呈良好的线性关系环苯扎林盐酸盐和Aceclofenac 0.01 -20μg /毫升的浓度范围和相关系数分别为0.1 -40μg /毫升Aceclofenac盐酸环苯扎林的0.9990和0.9990。定量限是0.01和0.1分别μg /毫升盐酸环苯扎林和Aceclofenac。方法验证按照我的指导方针,它被发现是准确的,精确和鲁棒性。销售成功配方进行了分析。

关键字

环苯扎林盐酸盐(CBP), Aceclofenac (ACF)、液相色谱、验证

介绍

盐酸环苯扎林化学称为3 - (5 h-dibenzo [a, d] cyclohepten-5-ylidene) - N, N-dimethyl-1-propanamine [2,3]。CBP治疗中使用作为一个兼职休息和物理治疗,缓解肌肉痉挛与急性疼痛的肌肉骨骼条件(4]。Aceclofenac;2 - (2 - (2 - [(2,6-dichlorophenyl)氨基]苯基]乙酰]oxyacetic酸(1]。用于缓解疼痛和炎症的用于类风湿性关节炎、骨关节炎(5,6]。文献调查显示没有发表反这种药物的结合的方法。本文描述了一个简单、准确和精确的方法,同时估计CBP和ACF的结合平板剂型。该方法优化和验证按照国际协调会议(我)指南7]。在目前的工作,已经取得了一次成功的尝试,rp -同时估计这些药物的方法。

材料和方法

仪器

珀金埃尔默仪器美国、200系列、Phenomenex Luna C18柱(250 x 4.6毫米id、5μm粒子大小)是用于分析方法开发。Totalchrom导航器高效液相色谱的色谱数据处理6.3.1软件版本。

材料

FLEXABENZE +(15毫克CBP和200毫克ACF)麦克劳德制药有限公司生产的孟买。使用的所有化学品和试剂的基于“增大化现实”技术的等级。

试剂

所有使用的化学品都是基于“增大化现实”技术的等级。

波长选择的分析

用紫外检测的高效液相色谱方法的灵敏度取决于检测波长的选择。理想的波长是给好反应的药物发现。覆盖的紫外光谱吸收药物显示CBP和ACF明显在280海里,所以在这个波长进行检测(图1)。

流动相的制备

2.72通用KH2PO4称重和溶解在1000毫升的高效液相色谱法水准备0.02 KH2PO4缓冲区。流动相是由混合750毫升的甲醇和250毫升0.02 KH2PO4。pH值调整到3使用o-phosphoric酸(1%)。解决方案是通过绘画纸滤纸过滤(41)和用近10分钟,这个解决方案是作为流动相。

制备标准股票的解决方案

海关与边境保护局(10毫克)和ACF(10毫克)准确称重和转移到两个独立10毫升容量瓶和溶解在几毫升的甲醇。卷都是由马克与甲醇产量解决方案包含1000μg /毫升的CBP和1000μg /毫升的ACF,分别。适当的整除从上面的解决方案是与流动相稀释获得100μg / CBP毫升和100μg /毫升的ACF,分别。

色谱条件

一个Phenomenex®C-18 (250 x 4.6毫米id)色谱柱平衡与流动相甲醇:KH2PO4 0.02米(25,% v / v)。pH值3调整使用o-phosphoric酸(1%)。流动相流速保持在1毫升/分钟和废水监测在280海里。使用20μL样本注入固定循环,和总运行时间是12分钟。

校准曲线CBP和ACF

适当的整除的原液CBP和ACF同样摄于10毫升容量的玻璃瓶。体积与流动相是由马克获得最终浓度为0.01,0.1,1、5、10、20μg /毫升的CBP和0.1,0.5,2、10、20、40μg /毫升的ACF,分别。

验证参数

线性和范围

CBP被发现的校准曲线的线性范围0.01 -20μg /毫升,相关系数为0.9990。ACF被发现的校准曲线的线性范围0.1 -40μg /毫升,回归系数为0.9990。校准曲线的回归分析报告表2和3。

精度

盘中精度

盘中的研究是由测量响应浓度为3一天3次。%相对标准偏差值CBP & ACF是0.49 - 1.02和0.51 - 0.93盘中。这些发现%相对标准偏差值小于±2.0表明,该方法精确(表4&5)。

可重复性

重复性研究进行了通过测量响应一个集中一天6次。%相对标准偏差值的重复性CBP和ACF是0.54和0.80 (表6)。这些发现%相对标准偏差值小于±1.0表明,方法是精确的。

精度

方法的准确性取决于计算CBP & ACF的复苏方法的标准。经济复苏发现99.57 - 101.10%和99.78 -101.81% CBP & ACF(分别表7)。

极限检测和量化的极限

LOD是分析物的最低水平,可以发现但不量化。从色谱图的视觉观察,检测限度CBP & ACF 0.003μg /毫升和0.03μg /毫升,分别。定量限是分析物的最低水平,可以检测和量化。定量限制分别为0.01和0.1μg /毫升。上面的数据显示,一个微克量两种药物可以精确地确定。

鲁棒性

鲁棒性研究是由改变流动相组成、pH值和流量(表8)。没有重大改变的结果所以该方法是健壮的。

特异性

特异性研究进行了检查使用的辅料干扰微晶纤维素、乳糖,硬脂酸镁的配方制备合成药物和辅料的混合物。特异性的研究进行了检查辅料的干扰。复苏的药物都在98%以上。特异性的研究结果所示表9。

溶液的稳定性

CBP标准和样品溶液的稳定性和ACF进行评估在室温下24小时。两种药物被发现是稳定的复苏超过98% (表10)。

系统适用性参数

系统适用性试验和结果进行了总结表11。

总结了验证参数表12。

分析销售配方

销售配方进行了分析使用方法使复苏CBP & ACF比例分别为99.49%和110.01%。Rt的4.2分钟和9.0分钟观察色谱CBP和ACF和辅料的干扰存在于市场观察平板配方(表13)。

结论

评估CBP和ACF的高效液相色谱方法。该方法验证按我Q2 (R1)指导精度,精度、线性、特异性和鲁棒性。发达的方法已成功应用于销售配方。

引用

1. 印度药典;加济阿巴德,印度药典委员会2010 Volume1,页770。
2. 英国药典;卷我,伦敦:HMSO出版;2007年,1卷,pp 41、42
3. 美国药典,官方的概略的标准;美国药典公约公司;马里兰州罗克维尔市,2004年USP30-NF25 pp.52
4. 默克索引——一个Encyclopidea化工、药物和生物;14日版;白宫默克有限公司,2001年,页2319。
5. 马丁代尔-额外的药典;31日版;英国皇家医药学会,伦敦,1996年,页1519
6. Tripathi KD。基本的医学药理学;第六版;Jaypee兄弟医学出版商经纪公司,2008年,页- 315。
7. 我指导、分析方法的验证、文本和方法论Q2 (R1);5 - 17 I.C.H.三方指南,2005,pp。
8. Heinitz毫升。确定了采用高效液相色谱法测定环苯扎林的平板电脑。J制药科学。1982;71 (6):656 - 658。
9. 康斯坦丝米,查韦斯C, Maluszeuski b的发展和比较高效液相色谱串联质谱,紫外吸光度检测方法测定人血浆和尿液的环苯扎林。J Chromatogr B生物医学。1995;666 (1):117 - 126。
10. 沃尔夫Poklis杰,狼CE,戈尔茨坦,MC, Poklis SA。检测和量化的三环抗抑郁药和其他的精神药物在尿液HPLC-MS / MS疼痛管理遵从性测试。中国实验室肛门。2012;(4):286 - 294。
11. Coulter C, Taruc M, Tuyay J,摩尔C抗抑郁药物的口服液体液体chromatography-tandem质谱分析。34 J肛门Toxicol。2010; (2): 64 - 72。
12. 彭湘Y, Zhoul求K,李D,陈X,郑江H, H .由液相色谱法测定人血浆中环苯扎林——electospray电离串联质谱及其在药代动力学研究中的应用。生物医学Chromatogr。2012; 26 (9): 1053 - 1058。
13. 保罗•K纳JSK,孩子叫RS。标准化和rp方法估计aceclofenac剂型。Int J Res制药化学。2011;1 (4):853 - 859。
14. Bhinge JR,库马尔房车,Sinha虚拟现实。一个简单的和敏感aceclofenac测定产物稳定性指示分析方法。J Chromatogr Sci . 2008; 46 (5): 440 - 444。
15. 拉贾RK Sankar GG,饶。开发和验证产物的方法估计aceclofenac片剂剂型。印度药物。2005;42 (10):693 - 696。
16. 金E,安B,能剧K, Kang Gwak海关。定量测定aceclofenac及其三个主要代谢产物在大鼠血浆HPLC-MS /女士。J Sci。2012年9月,35 (17):2219 - 2222。
17. 拉詹Gopinath (R, S, Meyyanathan SN。的反相高效液相色谱法同时估计的扑热息痛和aceclofenac平板电脑。Int J制药科学。2007;69 (1):137 - 140。
18. Deodhar MN,肖像副总裁、Bhosale AV Sonawane RA, Sakpal PS,博卡DD,国家队y。反向相perfoemance高液相色谱法测定aceclofenac和扑热息痛片剂剂型。亚洲J Res杂志。2009;2 (1):37-40。
19. Dhaneshwa SR, Raut KO Bhusari VK。验证同步估计的高效液相色谱方法对乙酰氨基酚,aceclofenac和散装thiocolchicoside药物配方。Res J制药BiolChem Sci。2011; 2 (2): 435 - 438。
20. Avanthi K, Tejaswi P, Vivek SP Sudheer Vamshikrishna g .简单产物的同时测定diacerein aceclofenac片剂剂型。挪作他用美国JfPharma杂志2011;3 (5):3606 - 3616。
21. 纳娑B, a Ravikumar开发和验证的反相高效液相色谱法同时估计aceclofenac散装和雷钠和胶囊。Int J制药Sci杂志。2012;2 (3):160 - 169。
22. 古普塔KR, Samrit VE、马哈啊,Wadokar SG。稳定性指示高效液相色谱测定diacerein aceclofenac的平板电脑。是J制药研究》2011;1 (3):202 - 218。
23. http://www.inventi.in/Article/ppaqa/260/11.aspx。
24. 钱德拉P, Rathod Lohidasan年代,Mahadik KR。应用程序的高效液相色谱法同时测定aceclofenac,对乙酰氨基酚和盐酸曲马多在制药剂型。Sci制药。2012;80:337 - 351。
25. Sharma MC, Sharma s应用程序解散研究和测定的高效液相色谱测定方法diacerein aceclofenac片剂剂型。Am -欧亚J Sci杂志2011;6 (3):149 - 154。
26. 甘地年代,Deshpande P V Rajmane Dodal T,某j .方法开发和验证的同时估计drotaverinHCl和aceclofenac平板,rp -剂型。Int J制药科学。2010;4 (3):49-52。
27. Jain JR,沙阿SA Shah博士,Chauhan RS。rp方法同时估计drotaverineHCl和aceclofenac结合平板剂型。PharmaChemia。2011;3 (4):245 - 252。
28. 谢赫KA, Devkhile AB。同时测定aceclofenac,扑热息痛和,rp - chlorzoxazone制药剂型。J Chromatogr Sci . 2008; 46:649 - 652。
29. Ganthi人力资源。,Bapatu HR, Maram RK and Mallu UR. Single RP-HPLC method for quantification of aceclofenac, paracetamol and chlorozoxazone in formulation.Int J Sci Inn Discov. 2012;2(4):471-490.
30. 谢赫KA,帕蒂尔,Ingol AB。敏感的液相色谱测定方法的同时估计diacerin aceclofenac片剂剂型。Int J化学。2012;3(3):2 - 7日。