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ISSN: 2322 - 0066

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简要回顾:生产和抗生素从链霉菌科家族的特征

Uzwal普拉卡什*

Odissa Biju Patnayak科技大学

*通讯作者:
Uzwal普拉卡什
Odissa Biju Patnayak科技大学。

收到:14/04/2015修改后:22/04/2015接受:29/04/2015

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文摘

本研究基于生产次生代谢物的名字作为抗生素和我们研究抗生素在常见的病毒和细菌物种知道它们的作用和类型。这个实验我们遵循正常的上游和下游加工提取抗生素从知道物种。在我们的研究中观察到这些抗生素对致病性弧菌等形式是非常有效的,沙门氏菌和肠杆菌属。在未来我们要描述这个化合物使用核磁共振,LCMS。研究表明,上述生物生产生物活性化合物。

介绍

放线菌经常展示自己优秀的抗菌活性。放线菌是不能被遗忘的地方;然而系统筛查程序结束生产streptomycis [1- - - - - -4]。抗生素也发现主要的抗菌和抗真菌、链霉素、制霉菌素、环己酰亚胺。新抗生素仍被发现,大多数是他们从文化放线菌分离(5- - - - - -7]。抗生素的使用一直延伸至很远的原点化疗省份甚至到动物饲养和食品领域的保护。链霉素抗生素中占有特殊地位。在所有的微生物,链霉素最富有的抗生素的来源证明(8- - - - - -10]。针对抗生素生产微生物是生物系统可能期望,不仅考虑并损害定量也定性在所有的物种和应变生产相同类型的抗生素。物种的能力除了生产链霉素Orksman第一次证明了链霉菌属。它已经建立了抗生素的链霉素和链霉菌属集团是由各种各样的微生物。

抗生素的生产已经宽了自1938年弗洛里和连锁的开拓性的努力。抗生素对医学的重要性导致了许多研究发现和制作。尽管各种已知的抗生素,不到1%的抗菌剂具有医学或商业价值。例如,而青霉素治疗指数高,一般不会影响人类细胞,这不是所以对许多抗生素11- - - - - -16]。其他抗生素只是缺乏他们的优势,已经在使用,或没有其他实际应用。

大多数抗生素通常可以发现使用筛选过程。进行这样的一个屏幕的过程,不同微生物的分离培养,然后检测生产扩散产品抑制测试微生物的生长。大多数抗生素发现在这样的屏幕已经在种族和必须忽视。其余必须检测的选择性毒性和治疗活动,和最好的检查和修改。抗生素工业生产和经济上的发酵过程中,微生物的来源在哪里生长在大容器称为发酵罐(100000 - 150000升以上)包含液体生长培养基(17- - - - - -40]。在生产过程中我们必须照顾不同的参数如氧气浓度、温度、pH值和营养水平密切监测和调整,如果必要的。我们知道抗生素次生代谢物;必须严格控制人口规模,确保获得最高产量前细胞开始死亡(第四十一条、第四十二条)。过程完成后,抗生素必须提取和纯化结晶产品。这是简单的实现,如果抗生素溶解在有机溶剂。否则必须首先被上游处理离子交换、吸附和化学降雨雪(43- - - - - -48]。

使用

链霉菌属将和其他链霉菌属属生产世界上一半的抗生素。正因为如此,他们在医学领域是无价的。链霉素产生广泛的抗生素和抗真菌。他们还生产其他生物活性的化合物,如immunospperesents,防止免疫系统活动。

材料和方法

一直尝试分离抗生素化合物从链霉菌属spp.during为此目的研究2015年2月我们有标准化的媒体生产抗生素的化合物
链霉菌属的物种从MTCC昌迪加尔和子培养获得。

子培养链霉菌属的菌株MTCC 4734

1。昆明理工琼脂培养基

2。麦芽酵母提取物

3所示。燕麦琼脂

4所示。往后站媒体

使用媒体的组合

1。昆明理工琼脂培养基

2。麦芽酵母提取物

3所示。燕麦琼脂

4所示。往后站媒体

使用媒体的组合

维护整个组合后,锥形瓶的口被关闭,用棉花塞,牛皮纸和收紧橡皮筋。15岁之后,这是热压处理过的psi。培养皿和微观技巧也包裹和热压处理过的。高压釜结束的时候,我进入了和层流气流。层流罩保持它之前,由使用无水酒精清洗,离开10分钟的紫外线辐射。纸包裹被打开了,整个被冷却,然后热压处理过的媒体转移到磁盘中,巩固。

当媒体已经固化,应变的安瓿是打破了。微生物存在于冻干状态为了这个目的,我们使用盐水和混合它借助微量吸液管和转移到介质,然后我们的孵化器孵化成400 c为8天。殖民地出来然后进一步使用[49,50]。

制备抗生素生产中

介质:1

介质:2

介质:3

介质的组成

发酵过程

增加微生物的种群后,发酵完成,我们知道有两种类型的发酵,第一个是固态,第二个是深层发酵。

对于抗生素的生产,我们已经为深层发酵。底物用于发酵过程中:1、媒介:2和介质:3。

流程解释如下:接种发酵培养基上的链霉菌属.Before,我们所做的高压釜使介质污染免费当媒介准备接种。

接种,0.5毫升双重蒸馏水被和亚文化(链霉菌属)转移到水和混合正确并转移到抗生素生产中。这过程是重复所有的媒介和孵化介质在晃动孵化器在300 c。

24小时后,10毫升样品从每个媒介被分析.Color的媒介也将略有变化。的我们的样品分析离心机在10000 rpm在40摄氏度为15分钟。离心结束后;上层清液是没有打扰它并将其存储在40度进行进一步处理。

此步骤重复了48小时,72小时和96小时。发酵的过程做了两次使用相同的步骤。

下游加工

获得原油抗生素我们为下游加工,技术已经在这个工作是我们必须使用:

1。柱层析法

2。薄层色谱法

柱层析法是一种分离技术,固定床内管。固体固定相的粒子或者支持涂上液体固定相填充整个内部的体积管(填充柱)或集中或沿管壁内留下一个开放的、不受限制的路径流动相在中间管(开放的管状柱)的一部分。利率的差异运动通过介质计算不同样品的保留时间

硅胶是用来包列,作为固定相,结算后硅胶收集样本与甲醇混合介质:1,乙醇介质:2,氯仿为媒介:3在同等比例的样品通过了固定相。在此色谱技术样本或溶液作为流动相。样品出来的柱层析法。

然后为薄层色谱法对那些我们已经收集的样本。薄层色谱法(TLC)是一种广泛使用的实验室技术和类似于纸色谱法。然而,而不是使用一个固定相的纸张,它包括固定相的薄薄的一层吸附剂(如硅胶、氧化铝、或纤维素在平坦的,惰性基质。与报纸相比,它的优势快速跑,更好的分离,选择不同的吸附剂。

硅板上的样本加载和保存在一个1:1的丁醇和丙酮毛细管提高提高板的样品后,样品的长度是指出,盘子里是干。干燥板后,乐队获得了盘子里,阅读。板与茚三酮溶液喷洒。这个解决方案的特性是,它形成了一个粉红色组胺被发现的地方。然后把个人阅读和检查每个收集样本的TLC价值。

同样的步骤是重复整个收集样本。

抗菌活性

1。的制备中

2。加载示例

3所示。阅读后24小时

的制备中,7.5通用mullar辛顿琼脂是溶解在200毫升蒸馏水和热压处理过的。这中同样被分成16个培养皿和巩固。凝固后,洞中为样品在装货。周围的洞,裸奔含有微生物物种的不同的疾病如霍乱弧菌,沙门氏菌肠道菌等。

裸奔后微生物种虫害不同收集样本加载到这些漏洞,继续孵化在正常室温。

24小时后,抑菌圈被阅读,它们存在于表。再次重复的所有步骤和数据收集。

协议(后):

数据分析

结果

工作所表现出的结果如下所示

1。O。D的样本

2。薄层色谱法的价值观

3所示。抑菌圈值

4所示。由于发酵介质的照片的颜色变化

5。抑菌圈的照片

6。薄层色谱和柱色谱的照片

O。D值

Biology-filling-column-by-silica-gel

图2:答:由硅胶填充的列。通过柱色谱法分离抗生素。


Biology-Raised-the-sample-TLC

图3:提出的样品薄层色谱。


Biology-Result-of-TLC

图4:结果薄层色谱

薄层色谱法计算

溶剂的的比例是TLC-value长度提高样本的长度增加。

L =溶剂引起的长度

S =提高样本的长度

抑菌圈值

图阿。D值

薄层色谱图的价值

第一次:-

讨论

尝试调查生产抗生素从链霉菌属spp研究期间2014年5月在我们的研究中我们发现2.097在48小时光密度介质:1,我们得到了最低的光密度值0.291在48小时介质:3,然后再重复实验时,又一次我们在介质密度最高价值:2在24小时(1.428外径),我们观察到媒介的最小值:3在24小时2.592 O。D和我们进行抗菌活性的抗生素从链霉菌属。

抗生素抑制带如下最高价值10毫米sollumonela介质:1×48小时,从不观察任何抗生素抑菌圈中:1、2、3为96小时。弧菌cholra给5毫米由媒介价值:2在24小时。介质:1和介质:3在24和48小时他们并不抑制弧菌cholra spp。实验重复了我们观察抑菌圈最高弧菌cholra介质:2 24小时。肠杆菌属5毫米介质:2在24小时和我们观察弧菌的抑菌圈最高4毫米介质:1 76人力资源和媒介:3在48小时4.5毫米有趣的是我们在观察最高4.5毫米沙门氏菌的抑菌圈中2 48小时,我们发现沙门氏菌抑菌圈表现出最高的7毫米介质:3 76人力资源。

Rolens和et al 1961年调查了微量元素在链霉素生产有趣的是在我们的研究中我们用硫酸锌。托钵僧appa et al 2010调查抗生素生产从印度南部的放线菌在我们的研究中我们也从放线菌产生的抗生素。

结论

一直尝试分离抗生素使用链霉菌属化合物griseous种虫害从4734年MTCC使用三种不同的基质通过深层发酵。我们的研究这些抗生素观察对致病性弧菌等形式是非常有效的,沙门氏菌、肠杆菌属等。在未来我们必须描述这个化合物使用核磁共振,LCMS。研究表明,上述生物生产生物活性化合物。

引用

全球技术峰会