生物分析技术简介

摘要

的发展生物分析技术带来了一个进步的纪律，从长远来看，任何改进都有几个令人兴奋的机会。生物分析在制药行业的最大影响是获得药物及其代谢物的定量生活。目的是执行药理药、毒性动力学、生物等效性和暴露反应，如药代动力学/药效学研究。在生物分析研究中，大量的生物分析技术如组合技术、活性技术和物质结合分析。这篇综述广泛强调了生物分析技术和联合仪器在评估药物生物分析中的作用。

关键字

异种生物学，生物分析，生物等效性，质谱

简介

领域生物分析法已经比早期的研究成熟了很多药物代谢欺骗几个简单和先进的技术，在今天的生物分析是装备精良，以应付潮流的挑战。一种生物分析技术可以是一套与一种物质的生物基质的分类、处理、储存和分析有关的程序。生物分析技术验证(BMV)是指不确定定量分析技术是否适用于有机化学应用的方法。生物分析包括定量活性外源性物质药物，如其代谢产物，在非自然位置或浓度的生物分子，生物制剂，如大分子，蛋白质，DNA，巨分子药物，生物系统中的代谢产物。生物分析法(1-6]可能是一门进步的学科，从长远来看，它为提高灵敏度、特异性、准确性、效率、检测结果、信息质量、信息处理和过程、分析价值和环境影响提供了几个令人兴奋的机会。生物分析在制药行业的最大影响是获得药物或其代谢物的定量活性，用于药物药理、毒物动力学、生物等效性和暴露反应的研究，如药代动力学/药效学研究。制药行业生物分析的主要目标是产生活性药物和/或其代谢物的定量活性，用于药理医学、毒物动力学、生物等效性和暴露反应(药代动力学/药效学研究)。分析结果的可靠性在修辞和临床本草中可能是一个非常重要的问题，因为它实际上是正确解释药理学发现的必要条件。不可靠的结果不仅会在法庭上遭到反对，还可能共同给当事人造成不必要的法律后果或对患者的错误治疗。在过去的十年中，类似的讨论发生在处方药注册的药代动力学(PK)研究紧密相关的领域。

根据生物分析技术验证(BMV) [7-11贸易指针，这些指针面积单位应用于生物分析策略，面积单位用于定量测定药物及其代谢产物的生物基质，如血浆，身体废物和诊断研究。生物分析技术验证包括所有的程序，以证明开发和使用的特定技术在一个非常给定的生物基质中分析物的定量活性是可靠的和可重复的。生物分析技术的验证是指确定该策略的性能特征满足所需的生物分析应用的方法。该性能特征面积单位表示为生物分析技术验证参数。元素生物分析技术验证[11-15参数体现了精确性、准确性和敏感性。

生物分析技术

一些通常用于生物分析研究的技术

用连字符连接技术

- LC-MS(液相色谱质谱)

-气相色谱-质谱联用

- CE-MS(毛细管电泳-质谱)

色谱的策略

-高效液相色谱法(高效液相色谱法）

-气体活动

液相色谱-质谱法(质)

生物分析液体活性-质谱分析可能是一种技术液相色谱法用质谱分析。质(16-25]常被实验室用于原料药、药品和生物样品的定量和化学分析。LC-MS在生物利用度、生物等效性和药代动力学信息的分析和解释中发挥着重要作用。通过LC-MS生物样品区域单元确定药物技术开发的所有阶段的分析和内部控制。

方法开发

研究区域单元的方法被习惯性地开发、改进、验证、协作研究和应用。活性分离面积单位主要依赖于待分析样品。活动过程对于LC-MS/MS技术开发的一般方法至关重要。在大多数情况下，仅仅通过一些实验就可以达到所需的分离。在其他情况下，也可能需要大量的实验。

技术开发程序

•从文献中收集药物分子的化学性质。

•确定溶解性剖面

•MS扫描和优化

•移动部分选择

•萃取技术的选择和优化

活性技术的选择(基于溶解度研究，化合物保留)

反切片色谱法

反断面包装如C18、C8等面积单位，是反断面包装中应用最广泛、最普遍的。26-30.］．此外，市场上还有C4、C2和苯基。反向部分吸附剂通常包括学习护理有机溶剂(如甲醇)中的辅助溶剂，然后学习护理二元复合溶剂(如水)中的辅助溶剂。

正截面色谱

传统的分段包装主要包括氧化物、氨基和氧化铝。传统的分段包装通常需要学习非极性溶剂，萃取是用极性溶剂进行的。以基本氢离子浓度为面积单位的化合物实际上是由氧化物维持的面积单位。然而，极性化合物的面积单位不可逆地维持在氧化物表面，在这种情况下，氨基也可以使用。

LC-MS/MS技术开发步骤

关于样品的正确信息对于有效的技术开发是至关重要的。一些与被分析物相关的数据是至关重要的，比如

•多种化合物礼物

•化合物的分子量

•样品溶解性

•药物的稳定性

•感兴趣的样品中化合物的浓度变化

方法优化

在优化阶段，在整个战略开发区域单元中演化的初始条件集在分辨率和峰值形式、板计数不平衡、容量、提取时间、检测限、量化极限以及对特定分析物进行量化的总体能力方面得到了改进和最大化[31-35的兴趣。一种方法的优化将遵循两种常见的方法，如手动或笔记本驱动。手动方法每次只包括一个自变量，而保持所有其他变量不变，并记录响应的变化。这些变量可以包括流量、流动或静止截面组成、温度等。

分离技术模式

由于大多数药物化合物的区域单位是极性的，因此反向切片活性通常在初始时尝试，其中一个非极性平稳段[35-38]被雇用了。流动段由水或缓冲液和有机段(乙腈或甲醇)组成。因此极性化合物被洗脱，初始和非极性化合物面积单位保持较长时间。固定段用于反相活性区单位正十八烷基(RP-18)、正辛基(RP-8)、乙基(RP-2)、苯基、氰基、醇和疏水聚合物。它是许多样品的主要替代品;特别是溶于水-有机混合物的中性或非电离化合物。如果反向切片失败，则尝试传统切片，但仍可用100%乙腈作为流动切片强力维持样品。

的选择固定相/列

在选择色谱柱之前，有必要掌握色谱柱填料的特性。氧化物倾向于溶解高于氢离子浓度的8和交联化合物粒子，例如，苯乙烯或聚甲基丙烯酸酯用于分离碱的面积单位，它可能面对强大的碱移动段。氧化物颗粒表面有硅醇基团，-SiOH是与氯硅烷发生硅烷化反应使固定相化学键合的面积单位。关于1/2的硅醇小组的区域单元与化学品的安全，以及休息区域单元与三甲基基硅基小组覆盖，以使其惰性。最常用的非极性安全切片(用于反相色谱)面积单位C18和C8, C18是最广泛使用的(称为十八烷基硅烷ODS);C8是中性的，而C18是非极性的。

移动部分的选择

移动段的选择和优化的主要标准是实现所有单独的杂质和降解物之间以及与分析物峰之间的最佳分离。在选择和优化单元缓冲液流动段面积、缓冲液氢离子浓度和流动段组成时需要考虑的参数。

质量化学分析检测与信息系统

液相活性/质谱分析[39-41正迅速转变为广受欢迎的液相色谱法工具。它是一种强大的分析技术，将液体活性的分辨率与质谱分析的检测特异性混合在一起。液体活性分离样品部分，因此将它们引入质谱分析。质谱分析产生并检测带电离子。LC-MS信息还可以用于提供有关分子质量、结构、鉴定和特定样品部分的数量的数据。结构数据甚至可以通过质谱仪生成，通常是那些与多个分析仪一起使用的区域，被称为串联自行车质谱仪。这可以通过在仪器中分解样品并分析生成的产品来实现。

质谱分析

质谱仪面积单元分为电离源、仪器和检测器3个基本要素。

进样

样品直接插入电离电源或甚至可以忍受电离电源的某种活动。该技术通常涉及LC-MS技术，其中棱镜分光镜耦合到(HPLC)或(GC)。

样品电离方法

市场上的各种电离策略各有优缺点。所使用的电离技术取决于所研究的样品种类和棱镜分光镜[42-45在市场上。电离策略的面积单位多种多样，具体体现如下:

a)气压化学电离(APCI)

b)电喷雾电离(ESI)

c)快速原子轰击(FAB)和，

d)矩阵辅助光脉泽活度电离(MALDI)

质谱分析步骤

1.Q1(第一个四极子作为质量过滤器)

2.Q2(作为碰撞单元，无论选择离子面积单位破碎成碎片)

3.Q3-由第三个四极子分析的后续碎片面积单位。

样品离子的检测和记录

探测器检测粒子电流，放大它，这样信号就被传输到信息系统，无论它在各种质谱中被记录在哪里。离子面积单位的m/z值相对于它们的强度来表示样品中各部分的数量，每种元素的分子质量，以及样品中不同部分的相对丰度。不同种类的探测器面积单元提供，以适应仪器的种类，也是最常用的体现光电倍增管[46-50]和微通道板探测器。

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