一个简短的注意对液相色谱及其类型

文摘

液相色谱是一种物理分离技术,将液体混合物的组件分布在两个非混相阶段,固定和移动。吸附色谱、分配色谱法、离子置换色谱法、凝胶排阻层析法和亲和色谱法LC实践的五类。反相(RP)的分区模式色谱技术,它使用非极性固定相(疏水性)和极性流动相,是最广泛使用的。固定矩阵是由附加长链烷基组(例如,n-octadecyl或使用C18)内部和外部表面不规则或球形状的直径5米多孔二氧化硅粒子在常见的应用程序。

关键字

液相色谱;反相;技术;疏水;静止的

介绍

在高效液相色谱中,20毫升的样品感兴趣的通常是注入流动相流,这是由高压泵。analytes-containing流动相渗透到固定相床在一定方向。混合物分离的组件到移动和静止阶段基于他们的化学亲和力。当液体与固定床上,经过一系列的吸附和解吸阶段。液体溶剂(流动相)注入一个包含固定相的填充柱在高压(400条或300.000托)。对于可再生的色谱法测试,高压需要保持一个稳定的流量。样品的组件将流出的列在不同的时间取决于移动和静止阶段是如何划分的。列是最重要的LC系统的一部分,因为它是设计承受液体的高压。传统LC列有一个外部直径6.4毫米(1/4英寸)和内部直径3.0 - -4.6毫米,100 - 300毫米长。色谱柱填料粒子直径与3 - 5米可能使用质短(30 - 50毫米)的应用程序。 Other LC columns include the narrow bore, microbore, microcapillary, and nano-LC versions, in addition to the regular variant. These columns feature smaller internal diameters, which allows for better separation and can handle liquid flows of less than 1 ml/min (the conventional flow rate). Ultra-High-Performance Liquid Chromatography (UHPLC) can be used instead of HPLC to improve separation efficiency and peak resolution. This LC type requires higher working pressures in the range of 310000 to 775000 torr and uses columns packed with smaller silica particles (1.7 m diameter) (6000 to 15000 psi, 400 to 1034 bar).

类型

正相色谱法:这个方法使用一个连续的极性固定相和非极性液体溶剂来衡量非极性材料。由于极性的不同,至少极性分子分离第一,紧随其后的是大多数极性化合物。利用重力分离的化合物把他们分开。

反相色谱法:极性反向阶段正常相的极性相反的极性,和它使用极性液体流动相极性固定相分离最极化学物质极性分子越少。高效液相色谱也用反相色谱法。

分配色谱法:分配色谱法是一种液-液方法,需要非混相,固定和移动阶段或分成组件混合在一起时像汽油和水。

手性色谱法:此方法分离手性分子,重叠镜像。虽然手性分子是对称的,他们不是可互换,可以选择性地分离外消旋的解决方案,或一个包含相反的手性分子,基于手性债券之一出现在静止或流动相。这主要是用于生物化学。