关键字 |
| 抗菌,1,3,则对麦克风。 |
介绍 |
| 印度是一个基于农业的农业国家,继续发挥主导作用,它占了国内生产总值(GDP) 26%。任何作物产量取决于种子的质量。种子是最重要的输入增加作物生产需要的时间。病原体免费健康的种子是急需想要的植物种群和好的收获,因为有几个植物病原体等可能导致巨大的农作物损失[1]。在这一点上种子健康,作物的生产力,管理实践和补充输入产生深远的影响。污染的大米(栽培稻l .)、高粱(高粱vulgare per)和玉米(玉米l .)谷物储存期间由真菌是一个主要关注[2]。这些真菌不仅参与生物腐蚀的谷物但是一些也被认为是产生真菌毒素导致明显减少农作物,动物家畜生产和人类的疾病。然而,储存种子的严重的问题是,它非常容易受到许多真菌与粮食相关模具等疾病种镰刀菌素,曲霉属真菌,Drechslera,根霉,Pencillium,链格孢属,Curvularia,枝孢属[3]。 |
| 镰刀菌素verticillioides (Sacc) Nirenberg是一种真菌病原体等多种植物宿主的玉米、高粱、大米等,以及植物病害。f . verticillioides感染也会导致食品安全问题对人类和动物的真菌产生真菌毒素无法轻易被移除或解毒颗粒。目前,fumonisins视为最农业重大环境毒素由f . verticillioides和其它镰刀菌素物种生长在谷物存储[4]。 |
| Fumonisin生产f . verticillioides被确定基于微形特征并使用两套引物PCR。特定一组引物是f . verticillioides物种,而有选择地放大rDNA的基因间的空间区域。另一组引物是特定于fumonisin生产f . verticillioides [4]。四十三个玉米样本收集来自不同地区的卡纳塔克邦,安得拉邦,受到f . verticillioides的检测。识别f . verticillioides完成基于形态特征,进一步证实了PCR。 |
| 人体需要脂肪的正常运转;脂肪酸作为更复杂的组件膜脂质和储存的脂肪在体内的主要组件。化学、脂肪酸及其酯用于恶二唑的合成,这些加合物的效用结构调查的自然和人工脂肪酸现在。五元氮杂环化合物已经成功测试了对几种疾病,因此受到了特殊的关注在药物化学由于各自不同的药用潜力。 |
| 在杂环化合物;恶二唑不断吸引兴趣开发新药物的一部分。他们表现出广泛的生物属性在医药和农药领域。取代1,3,4 - oxadiazole衍生品已经知道表现出巨大的生物活动,如中枢神经系统抑制剂,抗炎活动,肌肉松弛剂,抗惊厥的抗肿瘤、herbicidal和艾滋病毒属性。他们也表现出显著的镇痛、anti-convulsant利尿剂、催眠、镇静属性[5]。他们还具有前途的抗菌活性[6]。引发的不同的应用1,3,则对,目前的研究已经证明它的效力对种子进行承担产毒素的真菌和人类致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。葡萄球菌。 |
材料和方法 |
1,3,则对 |
| 硬脂酸酰肼(2)制备油酸乙酯的反应和水合肼在回流条件下无水酒精。然后酰肼的混合物(2),适当的脂肪族或芳香族酸油酸乙酯(3)和磷酰氯在水浴回流4 - 5小时。完成后的反应;混合物被倒进冰冷的水,与碳酸氢钠溶液中和。结果1,3,则对(4)从80%乙醇结晶(方案- 1)[7]。 |
收集和筛选种子样本的镰刀菌素verticillioides发病率 |
| 水稻种子样本通过15样品(Sonam,长米利,Mandya vijaya,交叉jaya, B1R, 64年,1001年,Tanu,孟加拉稻米,B2R,所有dode, ir - 64,拉贾muddi, TN、BR1), 6个样品的玉米(Kaveri多面手)和五个高粱(CHS-5混合动力车)收集的样本在迈索尔。种子样本进行表面消毒2%次氯酸钠和分析了镰刀菌素verticillioides发病率由标准压滤法(座)。十25玉米和水稻和高粱的种子的种子每座板受到培养7天24±2ºC下12小时光明与黑暗的交替循环。真菌生长在孵化音响和双目显微镜下检查。习惯和分生孢子的形态特征观察显微镜下。f .分离和纯培养verticillioides在Czapex阿霉素琼脂(CDA)偏和维持在4ºC为进一步使用。 |
f . Verticillioides分子检测 |
DNA提取 |
| 两周旧文化的菌丝团f . verticillioides(100毫克)在液态氮。总基因组DNA分离使用DNeasy植物Minikit(试剂盒、德国)按生产指令。DNA原液稀释了核酸酶游离水(试剂盒、德国)和浓度约为260/280 nm(日立、日本)。真菌DNA是储存在- 80ºC,直到进一步的使用。 |
PCR扩增 |
| 物种特定引物VERT1 (5-GTCAGAATCCATGCCAGAACG-3)和VERT2 (5-CACCCGCAGCAATCCTCAG-3)是用于检测f . verticillioides目前的研究。作为参考的IGS序列使用隔离A0999 (EMBL的加入。AJ575185)。底漆VERT-1 28 s rDNA中的报道,256年英国石油公司上游的IGS地区和VERT-2位于位置+ 501。VERTF1 (5-GCGGGAATTCAAAAGTGGCC-3)和VERTF2 (5-GAGGGCGCGAAACGGATCGG-3)位于位置+ 642,+ 1014帮助区分产毒素的和non-toxigenic verticillioides。 |
测试真菌 |
| 种子样品受到标准压滤法[8],在黑暗与光明的替代周期孵化。第七天的孵化,样本筛查种子真菌区系和相关的真菌被确定基于增长特点,相关镰verticillioides菌丝的形态,这是经常在玉米的比例更高。文化被频繁接种上维护CDA介质。人类致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌从政府获得了医学院,迈索尔,卡纳塔克邦担任测试病原体。 |
抗真菌活性 |
| 不同浓度(10 ppm到100 ppm)的恶二唑4,4 b, 4 c、4 d, 4 e, f 4, 4 g和h与CDA准备媒介。15毫升的介质被倒到每个培养皿和巩固。5毫米盘7-day-old文化测试的真菌被放置在中心中盘子和孵化的七天25±2ºC。孵化后菌落直径以毫米。保持每治疗一式三份。CDA介质没有水提物作为控制。的fungitoxicity比例提取物的抑制菌丝的生长是通过使用公式计算; |
| % = dc - dt /抑制直流x 100, |
| dc =平均增加菌丝体生长控制,dt =平均增加菌丝体生长在治疗(辛格特里帕西,1999)。 |
抗菌活性 |
| 所有的衍生品的浓度100 ppm受到杯扩散法对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。杯子在营养琼脂板使用软木钻孔机(5毫米)和培养液包含106 CFU /毫升细菌传播在固体上无菌拭子细菌悬液的滋润。然后50μl所有衍生品被分别接种盘子,杯子的治疗还包括50μl灭菌蒸馏水,担任控制。所有的盘子都孵化24 h在37°C和抑制区井周围如果有以毫米(毫米)。 |
结果 |
F.verticillioides DNA提取、PCR扩增 |
| f . verticillioides孤立的从不同的水稻和玉米的DNA样本使用引物进行PCR对VERT-1 VERT-2。800个基点(图1)单一片段被放大的情况下。从其它镰刀菌素物种即DNA,病圃,f . chlamydosporum f . thapsin, f . proliferatum没有记录在PCR扩增鉴定。 |
产毒素的f . verticillioides的PCR扩增 |
| VERTF-1和VERTF-2引物区分非产毒素的产毒素的镰刀菌素verticillioides并帮助其它镰刀菌素物种区分开来。 |
抗真菌活性 |
| 的抑制百分比取代1,3,则对衍生品(4 a-4h)在25到100 ppm记录完全抑制菌丝的生长的菌株f . verticillioides(表1)。所有记录显著增加抗真菌活性的化合物浓度的增加从25到100 ppm。4完整记录所有菌株的菌丝生长的抑制浓度100 ppm麦克风指示值。尽管抑制活动不同的菌株中25到75 ppm浓度,所有的菌株被发现完全敏感浓度100 ppm。 |
| 在25岁和50 ppm浓度见fvsl 3非常容易发现化合物4 d,而在75 ppm,容易发现化合物4 f。有趣的是,在100 ppm集中所有的压力都被完成所有的衍生品进行本研究。它还指出,浓度100 ppm的最小抑制浓度是所有的衍生品。 |
| 衍生品的比较评价与杀菌剂通常用于种子处理如azoxystrobilurin pyraclostrobin和kreoxim甲基显示完整的观察菌丝体生长的抑制浓度2000 ppm(表2)。衍生品都是非常重要的抑制性活动相比,所有的杀真菌剂测试500和1000 ppm浓度指示衍生品高效杀菌剂相比,即使在低浓度。 |
抗菌活性 |
| 抑制活性的衍生物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌被展示在表3。大肠杆菌被发现稍微抵抗4 d但被发现非常容易的4 b,抑制活动不同的其他衍生品。金黄色葡萄球菌是高度敏感的化合物4 f和至少4 e。抑制活性的比较评估的所有衍生品庆大霉素、链霉素透露,对大肠杆菌所有衍生品记录比庆大霉素高度显著的抑制活性化合物除外4 d和4 e。而对金黄色葡萄球菌的抗生素都是高效而衍生品进行本研究。 |
结论 |
| 本研究采用适当的产毒素的f . verticillioides的检测。在这个连接株f . verticillioides稻田隔绝,高粱和玉米最初确定使用立体声和双目显微镜。合成oxadiazole衍生品进行本研究发现高效甚至比一般使用杀菌剂欠缺镰刀菌素污染的种子。有趣的是要注意,麦克风100 ppm 1, 3,则对衍生品的注意种子处理的进一步研究与发展战略管理尤其是产毒素的真菌和真菌与种子biodeteriation有关。Furher所有衍生品相比,甚至明显抑制大肠杆菌高效抗生素庆大霉素。进一步研究它的使用是毒理学研究。这些衍生品已经证明生物活动,有必要进一步的研究这些衍生品作为种子农药毒性的保护剂能解决问题,因为这些是高度有效的浓度远远低于已经使用杀真菌剂。 |
表乍一看 |
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数据乍一看 |
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| 图1 |
图2 |
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引用 |
- 伊斯兰教多发性骨髓瘤,Masum MM,骗子公司。患病率等真菌高粱不同位置的孟加拉国。科学研究和论文。2009;4:175 - 179。
- Reddy KRN, Reddy CS,阿巴斯港,亚伯,来自k Mycotoxigenic真菌,真菌毒素,米粒的管理。毒素的评论。雷竞技苹果下载2008;27:287 - 317。
- 多发性骨髓瘤Masum MMI、伊斯兰教,骗子公司。种子处理实践的影响控制在高粱等真菌。科学研究和论文。2009;4 (1):27。
- 西北部城市白沙瓦Maheshwar PK,艾哈迈德,Janardhana GR。检测fumonisin产生镰刀菌素verticilloides在稻田使用聚合酶链反应。布拉兹J活。2009;40:1517 - 1520。
- Ajay Kumar K, Jayaroopa P, Vasanth Kumar 1 g .全面审查,3,则对和他们的应用程序。Int J ChemTech杂志2012;4 (4):1782 - 1791。
- Ajay Kumar K, Lokanatha Rai公里。合成和评价抗菌活性的4,5-dihydro-12,则对。但化学Commun。2004; 36:249 - 252。
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- 德雷伯,S。R, Eds。国际种子检验规则。国际种子检验协会。瑞士,ISTA, 2003;pp1 - 521。
- Satish年代,是因为Mohana特区Raghavendra MP, Raveesha KA。抗真菌活性的植物提取物对曲霉菌sp的重要种子传播病原体。J农业技术。2007;3:109 - 119。
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