一种有效分光光度法测定原料药及其剂型中棕榈酸帕利哌酮含量的方法

摘要

本研究采用简便、灵敏、快速、准确、精密度和经济的分光光度法测定棕榈酸帕利哌酮混悬剂中棕榈酸帕利哌酮的含量。棕榈酸帕利哌酮获得的光谱在278 nm处测定。棕榈酸帕利哌酮在15.6 ~ 50 μg/ml浓度范围内线性良好。在278 nm处未观察到安慰剂引起的干扰。恢复和精度很好地在ICH(国际协调会议)定义的标准。该方法简便、灵敏，适用于棕榈酸帕利哌酮注射悬液剂型的测定。分析结果已通过统计和恢复研究得到验证。

关键字

测定，棕榈酸帕利哌酮，分光光度法，测定。

简介

棕榈酸帕利哌酮是一种治疗精神分裂症急性期和维持期的新型长效抗精神病药物。帕利培酮(9-羟利培酮)是利培酮的主要活性代谢物，作用于多巴胺D(2)和血清素5HT(2A)受体。与其他非典型抗精神病药一样，它表现出较高的5HT(2A):D(2)亲和比。它还具有α(1)和α(2)肾上腺素能受体和H(1)组胺能受体拮抗剂的结合活性，但实际上对胆碱能受体没有亲和力[1］．

成年精神分裂症患者肌注棕榈酸帕利哌酮39-234mg一般耐受良好[2］．与其他可用的第二代抗精神病药相比，它有几个优点:它是预先填充的注射器，有许多不同的剂量;它不需要冷藏;它不需要补充口服抗精神病药;可以每月服用一次;它可以用一个非常小的孔针;注射体积小;注射部位可以是三角肌或臀肌;而且注射后不需要额外的预防性观察期。对于口服利培酮或帕利培酮在其他方面有效的患者，棕榈酸帕利培酮提供了一个有保证的给药系统，可增强依从性[3.］．采用高效液相色谱法测定原料药配方中PP的杂质[4］．科学:目前尚无分光光度法测定药物剂型中PP含量的报道，本文尝试用分光光度法测定PP含量。本文描述了一种简便、灵敏、快速、准确、精密度和经济的测定棕榈酸帕利哌酮缓释注射混悬液中棕榈酸帕利哌酮含量的分光光度法。

材料与方法

装置

采用双光束紫外/可见分光光度计(日本岛津1800型)，光谱宽度为2 nm，波长精度为0.5 nm，一对10mm匹配的石英电池测量所有溶液的吸光度。光谱由UV-Probe系统软件自动获取。

试剂和材料

帕利潘立酮棕榈酸盐标准和样品由Reddy博士实验室有限公司IPDO提供，海得拉巴，印度。市售invvega SUSTENA(棕榈酸帕利哌酮缓释注射悬浮液)。hplc级乙腈和四氢呋喃购自德国达姆施塔特的默克公司。使用Millipore - q Plus水净化系统(Millipore^®， Milford, MA, USA)。

稀释剂的制备

乙腈与水的比例为60:40% v/v的混合物。

标准溶液的制备

精确称量棕榈酸帕利哌酮工作标准(78 mg)转移到250 ml容量瓶中。在上述容量瓶中加入60 ml四氢呋喃，超声5分钟，然后用稀释剂稀释至体积，摇匀。将5ml上述溶液倒入50ml容量瓶中，用稀释液稀释至标记处，摇匀(31.2 μg/ mL)。

样品溶液的制备

精确称量棕榈酸帕利哌酮悬浮液(约234 mg样品悬浮液)转移到250 ml容量瓶中。在上述容量瓶中加入60 ml四氢呋喃，超声5分钟，然后用稀释剂稀释至体积，摇匀。将5ml以上溶液倒入50ml容量瓶中，用稀释液稀释至标记处，摇匀。

安慰剂溶液的制备

精确称量棕榈酸帕利哌酮悬浮液(约234毫克安慰剂溶液)转移到250ml容量瓶中。在上述容量瓶中加入60 ml四氢呋喃，超声5分钟，然后用稀释剂稀释至体积，摇匀。将5ml以上溶液倒入50ml容量瓶中，用稀释液稀释至标记处，摇匀。

方法

棕榈酸帕利哌酮标准溶液(31.2 μg/ml)在200 ~ 400 nm范围内单独扫描。对得到的零阶谱进行处理，得到棕榈酸帕利哌酮谱。每隔0.1 nm记录一次数据。帕利哌酮棕榈酸酯在238、278 nm处有过零现象。因此，选择278 nm作为棕榈酸帕利哌酮的分析波长。该波长可用于棕榈酸帕利哌酮的测定，而不会受到可注射悬浮液配方中其他辅料的干扰。

所建议方法的验证

根据国际协调会议(ICH)的指导方针，提出的方法得到了验证。

特异性

特异性是该方法在安慰剂化合物存在时测量被分析物反应的能力。在278 nm处检查稀释剂和制剂安慰剂的干扰。

线性度(校准曲线)

绘制了棕榈酸帕利哌酮在15.6 ~ 50.0 μg/mL(15.6、21.9、31.2、40.7和50.0 μg/mL)浓度范围内的校准曲线。棕榈酸帕利哌酮在278nm处吸光度测定。通过绘制吸光度与浓度的关系，构建了校准曲线，并计算了回归方程。

方法精度(可重复性)

扫描测定棕榈酸帕利哌酮溶液(31.2 μg/ml)的吸光度，验证了方法的精密度。

中级精度(再现性)

本研究的目的是证明试验结果的可靠性与变化。由不同的分析人员在不同的时间、不同的系统对样品进行分析，以检验样品的重现性。采用与精密度相同的方法进行分析，并确定了所有6组样品制剂的% RSD。

准确度(恢复研究)

通过标准添加法测定棕榈酸帕利哌酮(31.2 μg/ml)的回收率，确定了方法的准确性。将已知剂量的棕榈酸帕利哌酮标准溶液按50%、100%和150%的水平添加到安慰剂中。估计棕榈酸帕利哌酮在每个水平的三种制剂中的用量。

LOD和LOQ(检测限和定量限)

根据PP谱响应计算LOD和LOQ值。

结果与讨论

棕榈酸帕利哌酮标准溶液分别在紫外范围内扫描，光谱(图2)这样得到的。每隔0.1 nm记录一次数据。第一个光谱显示棕榈酸帕利哌酮在278 nm处吸光度显著(31.2 μg/mL)。该光谱在278nm处可以很好地定量测定PP，没有任何药物安慰剂的干扰。棕榈酸帕利哌酮在15.6 ~ 50μg/mL范围内吸光度与浓度呈线性相关。所得到的线性结果显示在表1．

给出了精度和中间精度研究所得值表1．相对标准偏差(小于2%)表明该方法具有可重复性。棕榈酸帕利哌酮的LOD和LOQ值分别为3.12 μg/mL和9.36 μg/mL (表1)．结果表明，该方法对棕榈酸帕利哌酮含量的测定具有较高的灵敏度。给出了回收实验结果表2．采收率研究结果表明，该方法是正确的。经验证，开发的方法被应用于测定PP在市售剂型。取得的结果(表3结果表明，所建立的方法适用于制剂中PP的测定。空白，安慰剂，标准和样品溶液的紫外光谱显示在图2至5验证了所提出方法的稳定性指示能力。

结论

根据所述方法的分析结果，该方法对棕榈酸帕利哌酮在15.6 ~ 50 μg/ml范围内呈线性反应。该方法对药品配方的分析结果具有较高的重复性和可靠性，与药品的标签声明符合较好。这也是一种经济有效的方法。该方法可用于棕榈酸帕利哌酮缓释注射悬液制剂的含量均匀性检测。所开发的方法可用于预充注射器在充注过程中快速测定充注均匀性，其中样品负载较高，高通量对快速交付结果至关重要。

确认

作者要感谢M/s Dr. Reddy实验室有限公司对这项工作的支持。

作者的知识产权管理部门(IPM)将该稿件的内部出版号定为PUB00235-13

作者的声明

相互竞争的利益

作者声明没有利益冲突。

参考文献

1. 每月一次帕利哌酮注射治疗精神分裂症。神经精神疾病治疗。2010;6: 561 - 572。
2. 何志刚，李志刚，李志刚。肌注帕利哌酮棕榈酸酯。中枢神经系统Drugs.2010;24:227 - 244。
3. 一种新的第二代抗精神病药物的疗效、安全性和成本综述。国际临床杂志。2010;64:216 - 239。
4. Hima BK, Nitin HD, Suryanarayana MV和Anjaneyulu Y.验证了同时测定棕榈酸帕利哌酮有效药物成分及其注射剂型的含量、相关物质和降解产物的稳定性指示方法。液体色度测定技术，2012;35(4): 533 - 546。
5. 国际协调会议。ICH，分析程序的验证，文本和方法Q2 (R1)。IFPMA，日内瓦，瑞士，2005。