慢性牙周炎的微生物诊断方法:概述。

文摘

牙周疾病是传统的影像学诊断和临床检查。由该方法诊断的一个重要缺点是,很难区分稳定病人和活动性疾病患者。临床参数不足以预测积极牙周疾病。改进的知识理解牙周疾病的发病机理导致的发展各种新诊断测试。这些可以精确测量sub-gingival微生物挑战和宿主应对这些挑战。诊断疾病的概念与牙科实验室测试是相对较新的科学。这些测试是有用的预测活动网站和预测哪些患者牙齿或站点将经历临床附着丧失在不久的将来。除了诊断测试有助于分类成不同疾病的患者分类;即积极或慢性牙周炎,他们也将有助于在分化的回应或不响应治疗的病人。他们也可以用来确定的预测整个病人或特定的牙齿。 This review article will help the dental practitioners to rethink about the role of the laboratory in the assessment of chronic periodontitis.

关键字

慢性牙周炎、实验室诊断、微生物测试

介绍

慢性牙周炎的诊断是很困难的,因为它是一种multi-etiological疾病。没有一个病原体引起的疾病负责。慢性牙周炎是传统诊断放射学和临床检查的基础上。临床检查包括评估斑块、牙龈炎症,探测深度,附件丢失。这些方法很难区分稳定病人和活动性疾病患者。有各种新诊断测试诊断的牙周疾病可以精确测量sub-gingival微生物挑战和宿主应对这些挑战。与实验室检测诊断疾病的概念是很少使用的牙科专业。

在实验室测试的帮助下,很容易分类患者积极或慢性牙周炎。他们还帮助分化治疗病人的反应或不响应。他们也可以用来确定的预测整个病人或特定的牙齿。

微生物测试

各种诊断方法用于识别特定的存在牙周病原体包括厌氧培养、免疫荧光聚合酶链反应(PCR)和DNA探针技术。细菌培养方法有一个额外的优势,提供病原体的抗生素敏感性,有助于指导治疗策略。

样本采集

标本收集任何微生物诊断的最重要的方面。一些技术已经用于样本收集在牙周疾病的诊断。技术的选择取决于治疗牙科医生的目的。在牙周疾病的诊断最常见的标本观察牙龈沟液内细胞激素是收集。

GCF收集方法

洗涤方法

灌注在这种技术牙龈缝隙的等渗溶液(例如汉克的平衡盐溶液)与修复帮助收获细胞体积。缺点是复杂和技术困难(1]。

毛细管或微量吸液管

网站的隔离和干燥后,已知直径的毛细管插入牙龈缝隙的入口和毛细管作用GCF自动转移到管(2]。这种方法的优点是它提供了一个未稀释的样品的体积可以评估。缺点是体积是不够的,很难从管中删除完成样品。

吸收剂筛选论文

intra-crevicular技术滤纸条插入到牙龈缝隙而在extra-crevicular技术地带是牙龈缝隙覆盖地区创伤降到最低。Intra-crevicular方法带插入只是入口处的裂隙或牙周袋直到达到口袋的底部或直到最小阻力的感受。优势包括快速和容易使用,可以应用于个人网站,减少创伤。这种方法的缺点是GCF由于蒸发损失3,4]。

一些其他方法如pre-weighted扭曲的线程,intra-crevicular洗液,微注射器、塑料条,铂金循环或micro-spatulas用于样本集合5,6,7,8,9,10,11,12,13]

诊断方法

显微镜检查

革兰氏染色法进行直接涂片标本准备(例如GCF)有助于periodontopathic细菌的初步识别基于典型的形态特征。

有氧培养技术

有氧培养技术将有助于在有氧病因的诊断还负责牙周疾病(14]。这是最简单的方法培养的有氧病因的帮助下常见的媒体如羊血琼脂和MacConkey琼脂和耗氧孵化370 c 24至48小时。根据菌落形态鉴定测试,生物可以轻易的识别出并可以执行抗生素敏感性。

厌氧培养技术

厌氧细菌培养的疏散,替换jar,厌氧罐使用天然气发电机等(15,16]。

厌氧环境生成的帮助下被疏散和除氧取代与氢气或也与气包的帮助。厌氧袋文化集包括一盘厌氧血琼脂内O₂不透水的袋子。这种系统的优点是,它包含自己的天然气发电设备和冷催化剂(17]。

孵化的文化

裸奔之后,板块在jar和疏散,更换完成,至少48小时孵化和re-incubated 2 - 4天厌氧细菌生长缓慢,允许。主隔离35到37°c的温度对厌氧细菌的培养至关重要的临床标本。不同的文化媒体用于厌氧菌的培养和卡那霉素血琼脂一样,等(18]。一个合适的指标体系,如假单胞菌这样文化严格好氧生物种虫害或染料亚甲蓝应该用于确认代厌氧环境。

检查增长和识别

潜伏期后殖民地的仔细检查和测试的aero宽容。严格的厌氧菌都被标准的生化反应。气液色谱法还可用于检测各种厌氧细菌产生的代谢产物(19]。

Benzoyl-DL-arginine-naphthylamide(巴)测试

牙周疾病是最常见的细菌即P。gingivalis, t . denticola forsythus。这些细菌可以水解合成胰蛋白酶衬底Benzoyl-DL-arginine-naphthylamide(巴)。这个测试是有用的在这些细菌的检测样本子影响患者的牙龈网站(20.,21]。

分子技术

分子聚合酶链反应(PCR)技术,多重PCR、16 s rRNA检测是用来确定厌氧细菌和疱疹病毒(22,23]。最常用的牙周病原菌的分子技术是聚合酶链反应基于DNA探针技术。这种技术在培养技术有几个优点,包括增加灵敏度和消除细菌生存的必要性。这些化验的抽样技术相对非侵入性,使用纸牙髓学的点或无菌刮匙获得病原体从龈下的环境。

许多细菌研究的“积极”牙周疾病的关系。Haffajee Socransky显示,“红色复杂”的最有力的证据与牙周疾病进展。“红色情结”等includesbacteria Porphyromonas gingivalis,拟杆菌forsythus,和梅毒denticola。除了这些细菌,Aggregatibacter actinomycetemcomitans被发现与激进的牙周炎(24,25]。

检测特定的白细胞介素

测试知道主机响应开发改善炎症和免疫反应的理解在牙周疾病进展(26]。主机响应的分析诊断涉及到具体的量化host-derived观察牙龈沟液内细胞激素分子内,血清、唾液(27]。

牙龈Crevicular流体分析

牙龈crevicular流体(GCF)是一种血清渗出液中发现牙龈沟。GCF中大量的polymorpho-nuclear白细胞、上皮细胞和细菌细胞。GCF的组件也筛选了加沙地带,然后分析了一个基于免疫测定(酶联immunoabsorbence试验和ELISA)或由es试验(28]。这些高度敏感的化验是能够量化GCF中特定分子的存在。

各种分子识别,但并不是所有的与疾病相关的活动。这些分子已经证实下面讨论重大协会与牙周疾病。

标记的细胞死亡

天冬氨酸转氨酶(AST)是一种酶细胞的细胞质中用作一定程度的细胞死亡(29日]。检测这些酶可以用作诊断工具从GCF牙周破坏的阶段。钱伯斯et al (30.)报道,高浓度的AST与9有关16次经历积极的牙周组织破坏的风险更大。

标记的急性炎症反应

多形核白细胞(中性粒细胞)溶酶体颗粒,ß-glucuronidase和弹性蛋白酶。这些酶水平与急性炎症的程度在牙周膜和牙龈沟。主题与高浓度的GCFß-glucuronidase 6到14倍经验重要临床附着丧失在接下来的3个月ß-glucuronidase的患者比其他没有水平升高。弹性蛋白酶被发现高活跃的牙周病患者(31日,32,33]。基质金属蛋白酶(MMPs)发布的炎症细胞也被证明有助于牙周疾病的诊断(34]。

促炎细胞因子

细胞因子释放控制多种功能的细胞,参与调节免疫和炎症反应。大量的细胞因子被发现但最有前途的细胞因子可作为诊断标记interleukin-1ß(IL-1ß)[35,36]。这些细胞因子产生不同的生物效应,包括初始感染急性期反应。然而,在牙周组织,它介导的破坏结缔组织和骨吸收37]。GCF IL-1ß水平被发现是始终与牙周疾病的严重程度相关38]。

免疫球蛋白

在牙周疾病产生免疫球蛋白39]。免疫球蛋白G(免疫球蛋白)不能始终与牙周疾病相关,尽管亚型的免疫球蛋白G可能发现受试者患牙周疾病进展(40]。值得注意的是,免疫球蛋白(IgA)已被证明是高在健康受试者和受试者有牙周疾病进展的速度下降,这表明它可能是一个标志的保护(41,42]。血清可用于测量特定的牙周病原体抗体的水平。几位研究人员43,44)发现,血清抗体牙周病原体通常升高患者的牙周疾病但很少患者未能回应一个适当的抗体反应。

唾液酶

的能力ß-glucuronidase唾液中用于区分患者牙周探测深度的水平和牙龈炎症。虽然初步研究已经承诺,没有长期研究评估使用唾液的牙周疾病进展的标志一直执行(45]。

目前的端点的牙周治疗是基于减少探测深度和牙龈炎症。然而,牙周感染的存在更敏感的措施,包括分析牙周病原体的治疗水平以及减少主机响应这些病原体如继续高水平的患者牙周病原体或高水平的炎症介质的唾液可以另外用抗生素治疗。使用牙周的诊断测试,以确定“活跃”阶段的结论可以帮助减少难治性疾病。

目前正在写概述提高意识在牙医为监测诊断测试的可用性牙周疾病,他们必须有一个明确的体贴牙周诊断检测和治疗之间的关系,以及人民币升值的金融和健康诊断测试的好处。除了用于诊断疾病,诊断测试可以确定当一个长期持久的疾病已经充分的治疗。

结论实验室检测和临床诊断将有助于了解慢性牙周炎单一性这是一种传染病。

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