印度东北部米佐拉姆邦番木瓜叶提取物抗氧化性能的研究

摘要

印度东北部药用植物资源丰富，在药用植物的多样性和传统利用方面具有独特性。该地区可能含有独特的植物化学物质，这在印缅热点地区可能具有地理意义。番木瓜是一种著名的药用植物，在印度东北部的米佐拉姆邦被用作民间药物，具有多种用途，但没有适当的科学研究可以发现这种民族药用植物的药理活性。考察了水提物、甲醇提物和石油醚提物的总酚含量、总黄酮含量、自由基清除能力和还原力。水提物中酚和类黄酮含量最高。经铁氰化钾还原法测定，三种提取物均表现出潜在的还原活性。通过对DPPH自由基的清除来测定其自由基清除能力，发现木瓜甲醇提取物的自由基清除能力最高。这些发现表明，番木瓜叶可以作为天然抗氧化剂使用，并且可以作为药物开发的主要来源。

关键字

番木瓜，总酚含量，总黄酮含量，还原活性，自由基清除活性

介绍

米佐拉姆邦是一个生物多样性热点地区，位于喜马拉雅山脉的最末端，拥有丰富的动植物资源[1，2］．这个地区的部落人民依靠森林来治疗不同的疾病，因此随着时间的推移，他们的知识很丰富。到目前为止，还没有或很少有科学调查发现民族药用植物对土著人民的好处。

药用植物可产生一些具有药理活性的次生代谢物，是药物发现的重要来源。这些次生代谢物并不直接参与植物的生长和繁殖，但在植物的防御机制中起着重要作用。早期的研究已经证明了它们在抗氧化剂、抗癌、消炎和缓解疼痛方面的作用[3.］．番木瓜(C. papaya)属于番木瓜科，通常被称为Thingfanghma(在Mizo)，被用作利尿剂-任何促进尿液产生的物质(根和叶)，驱虫药(叶和种子)和治疗胆汁疾病(果实)。木瓜叶被制成茶来治疗疟疾。其汁液也用于治疗疣、癌症、肿瘤、玉米和皮肤缺陷，而其根则用于治疗子宫肿瘤。成熟的果实用于尿路伤口、癣、皮肤病、牛皮癣和结肠癌——木瓜的纤维能够结合结肠中的致癌毒素，使它们远离健康的结肠细胞[4］．

因此，本文对印度东北部米佐拉姆邦的民族药用植物木瓜的抗氧化活性进行了研究。

材料与方法

根据乙醇植物学知识，在米佐拉姆邦Aizawl区的Tanhril村收集了新鲜和无病的木瓜叶片(表1）.将植物材料装入无菌聚乙烯袋中带到实验室，并保存在冰箱中等待进一步处理。

表1:本研究取样的植物叶片细节。

植物提取物的制备

木瓜的叶子被风干，用搅拌器磨碎，然后用甲醇、石油醚和水用索氏装置提取。所有提取物最后用旋转蒸发器浓缩。

叶提取物的酚含量

采用Folin-Ciocalteu法测定叶提取物总酚含量[5］．取0.5 ml提取物加入Folin-Ciocalteu酚试剂，保存3 min，加入2.5 ml 7.5% (w/v)碳酸钠(Na2CO3)溶液，45℃孵育45 min，在765 nm处计算吸光度，用没食子酸标准曲线测定总酚含量。

总黄酮含量

总黄酮(TF)含量的测定采用先前描述的改进方法[6］．将植物提取物与1.5 ml甲醇、0.1 ml 10% AlCl3、0.1 ml 1m醋酸钾和2.8 ml蒸馏水混合。室温孵育反应混合物30 min，在415 nm处测定吸光度，用槲皮素标准曲线测定总黄酮含量。

还原能力

植物提取物的铁还原活性参照前人的研究[7］．将不同浓度的植物提取物与2.5 ml磷酸盐缓冲液(0.2 M, pH 6.6)和2.5 ml铁氰化钾(1%)混合。在50℃下孵育20 min，加入2.5 ml三氯乙酸(10%)终止反应，5000 rpm离心。取上层2.5 mL移液于新试管中，加入0.5 mL FeCl3(1%)静置30 min，在700 nm处测量吸光度。反应混合物的吸光度增加表明还原能力增加。

清除1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)

将不同浓度的植物提取物加入到甲醇DPPH (0.1 mM) 3 mL中，室温无光培养30 min，在517 nm处测吸光度。DPPH抑制率(I %)计算公式为:I%=(A0−A/A0) × 100

A0为空白溶液的吸光度，A为萃取物的吸光度[8］．

统计分析

使用美国Northampton, MA, USA的Origin Pro 8 SRO v8.0724 (B724)统计软件，得到的数据用mean±SEM表示。

结果与讨论

本研究描述了米佐拉姆邦传统医药中使用的木瓜的抗氧化和抗菌活性。表1）.植物含有大量的酚和酚类化合物，它们是次生代谢产物，在抗氧化和抗菌活性中起着至关重要的作用。表2表示提取物中酚类化合物的总浓度。水提物和甲醇提物中苯酚含量高于石油醚提物。水提取物的总酚浓度最高(57.6±4.69 mg没食子酸当量(GAE)/g提取物)，远高于Ang等报道的马来西亚C木瓜皮(15.18 μg GAE/mL)和种子(6.75 μg GAE/mL)。9］．甲醇提取物黄酮含量最高，为0.34±1.34 μg槲皮素当量(QE)/g提取物。

表2:叶提取物总酚含量(TPC)。

酚类化合物具有清除自由基和活性氧的能力，是植物提取物抗氧化的主要成分。酚类化合物在芳香环中含有(-OH)，具有清除自由基的作用[10，11］．先前的研究表明，多酚和类黄酮的存在对清除活性氧具有积极的作用。大多数酚类化合物是类黄酮，具有抗菌、抗炎、抗癌和抗过敏活性[12，13］．黄酮类化合物和其他酚类物质被认为在癌症和心脏病的发展中起预防作用[14］．

还原性与还原性的存在有关，还原性实际上发挥了抗氧化性能[15］．采用不同浓度的水、甲醇和石油醚溶剂体系对木瓜的还原力进行了测定。图1用铁氰化钾还原法测定了不同植物提取物的还原活性。结果表明，FRAP值随浓度的增加而增加。在500 μg/mL浓度下，甲醇(图1）.这一结果与Marina和Noriham之前的研究结果一致[16表明提取物的还原潜力随着样品数量的增加而增加。

通过测定2,20-二苯基-1-苦味酰肼自由基(DPPH)紫色溶液漂白后的电子给能量来监测其抗氧化活性。颜色的变化与抗氧化剂的浓度成正比[17，18］．采用不同浓度(25 ~ 325 μg/ml)的水、甲醇和石油醚溶剂体系对番木瓜提取物的DPPH清除能力进行了筛选，发现3种提取物均具有潜在的清除活性。水、甲醇和石油醚对番木瓜的IC50值分别为247、262.18和171.52 μg/mL。图2结果表明，样品对DPPH的抑制率随样品浓度的增加而增加，说明提取物均为DPPH的有效电子或氢原子供体。结果表明，番木瓜的抗氧化活性高于紫肉甘薯(Ipomoea batatas L.)和18种药用植物部位制备的紫甘薯(PSP)酒[19］．

本研究采用标准参数对米佐拉姆邦民族药植物木瓜的药理活性进行了研究。研究表明，它具有潜在的抗氧化能力，这可能是因为存在高酚含量。这些发现有利于将其作为主要抗氧化剂使用。虽然需要进一步的研究来充分阐明其药用价值。

确认

作者感谢印度新德里生物技术部的国家生物技术中心(BT/04/ NE/2009)提供了基础设施和财政支持。作者报告没有利益冲突。

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