磷酸一氢西格列汀纯片剂型分析方法开发及紫外-可见光谱法验证

摘要

简单、快速、准确分光光度法测定建立了西格列汀的含量测定方法片剂剂型。所提出的方法是基于西格列汀表现出波长最大267 nm的吸收光谱的原理。该方法在20 ~ 60 μg/ml范围内成功用于已上市制剂中药物的分析，相关系数为0.991。回收率为99.62 ~ 100.48%。LOD和LOQ分别为6.03和18.28 μg/ml。此方法已被验证线性结果表明，该方法快速、准确、经济，可用于西格列汀含量的常规测定固体剂型．利用ich指南对方法进行了验证。

关键字

西格列汀，验证，紫外-可见光谱，方法开发

简介

磷酸一水合物西格列汀(SPM) (3R)-3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-5,6-二氢[1,2,4]三唑[4,3- a]吡嗪-7(8H)-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁烷-1- 1-磷酸水合物(图1)为口服二肽基降糖药peptidaseÃⅰÂ′Â 4(DPPÃⅰÂ′Â 4)抑制剂类[1］．DPP-4抑制剂代表了治疗2型糖尿病的一种新的治疗方法它的作用是刺激依赖葡萄糖的胰岛素释放，降低胰高血糖素水平。这是通过抑制白痴蛋白，特别是胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)和胃抑制多肽(GIP)的失活来实现的，从而改善血糖控制²．基于UV的几种分析方法2-4]，荧光分光光度法[5),rp -［6，7]， lc-ms / ms [8-10用于人、大鼠和狗血浆和尿液中磷酸西格列汀的测定。

实验

装置

采用日本岛津1800型双束紫外-可见分光光度计，光谱宽度为1 nm，波长精度为±0.1 nm，用一对10mm匹配的石英电池测量所有溶液的吸光度。光谱由UV-Probe系统软件(Ver.2.34)自动获取。

试剂和材料

所有化学试剂均为AR级。SPM的正品作为礼品样品从MSD Pharmaceutical private Ltd.获得。印度马哈拉施特拉邦。

检测波长的选择

在200-400 nm范围内扫描药物溶液。最大吸光度为267nm。

标准原液的制备

将SPM称量(100 mg)，转移到100ml容积瓶中，溶解于50 ml甲醇中，用甲醇补充到标记处的体积，最终溶液浓度为1000 μg/ml。

工作溶液的制备

用甲醇适当稀释SPM原液中的异丙醇，得到工作标准。

方法验证

该方法具有良好的线性度、准确度、精密度和特异性。

线性

通过分析不同浓度的SPM标准溶液，评价了测量的线性度。结果显示在表1．

精度

为确定所提方法的准确性，采用标准添加法进行了回收率研究。结果显示在表2．

精度

通过对不同浓度(20 ~ 60μg/ml)在同一天(日内精密度)和三个不同日期(日内精密度)进行分析，确定了该方法的精密度。

特异性

通过特异性研究确认辅料和粘结剂的干扰和不干扰。特异性是通过在安慰剂中加入标准药物．

LOD和LOQ

LOD和LOQ由公式LOD =3.3 σ/S和LOQ = 10 σ/S计算，其中σ为最低标准浓度的标准差，S为标准曲线的斜率。结果显示在表4．

片中西格列汀含量测定。选择已上市的SPM制剂进行分析。精确称量20片，将相当于100 mg SPM的粉末量转移到100 ml的量瓶中，超声30分钟。然后用甲醇使体积达到标记，并用Whatman号滤纸过滤溶液。42 .获得样品原液。取0.8 ml滤液，用相同溶剂进一步稀释至10 ml，测定样品对空白的吸光度。通过校准曲线计算SPM的量。实验结果见表3．

结果与讨论

如图1，在甲醇溶液中，SPM在267 nm处有最大波长。如图2、3和表1，在20 ~ 60 μg/ ml范围内，校正曲线呈线性关系，回归方程为y = 0.010X -0.072;(右²= 0.991)，表明所建立方法线性。SPM的回收率为99.62 ~ 100.48%表2；清楚地表明所开发的方法是准确的。日内和日间精密度以% RSD表示，分别为0.330和0.280。As， % RSD在≤2%的允许范围内。结果表明，所提出的方法是精确的。检测结果与标签所述相符。该方法具有良好的线性度、准确度和精密度，可成功用于已上市固体制剂的分析和质量控制。

结论

从上述结果可以看出，所建立的紫外分光光度法简单、快速、准确、精密度、专属性和经济。因此，该方法可以应用于定量分析西格列汀的散装和制药配方如片剂剂型。

致谢

作者非常感谢MSD制药私人有限公司。印度马哈拉施特拉邦提供SPM礼品样品。作者非常感谢Alwar药学院的校长和管理人员为开展研究工作提供必要的设施。

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