产物分析方法的开发和验证普加巴林散装胶囊剂型和普瑞巴林的决心

JAMPALA,巴拉BANDI拉马,N.V.S.NAIDU^*
Sri Venkateswara大学化学系Tirupathi,印度

通讯作者:N.V.S.NAIDU,

文摘

这项工作涉及的应用简单、准确、精确和有选择性的反相高效液相色谱(rp)法测定普加巴林散装和决心年前胶囊剂型。色谱分离实现梯度使用水域联盟2695分离模块,C18柱(250 x 4.6毫米,3.5μm)在温度25 C o。流量选择0.8毫升/分钟使用PDA探测器在210海里。流动相是准备使用一个泵10毫米NH4OAC水ph值(- 6.8)和B-pump乙腈和甲醇比例的80:20更好的分辨率和灵敏度。发达的方法验证线性,特异性,旋进的鲁棒性和准确性。

介绍

普瑞巴林[1]化学称为(S) 2(氨基甲基)5-methyl hexanoicacid,是一种白色晶体,溶于水,基本和acidicaqueous solutionsand用作抗惊厥的镇痛药物和神经递质。它与高亲和力和特异性结合电压门控钙通道蛋白质α(2)-它[2,3]。它收到了美国FDA批准用于治疗神经病变疼痛和疱疹的神经痛后2004年,出现在美国。市场在2005年秋季[4]。最近的研究表明,普瑞巴林是有效的治疗慢性疼痛的疾病如纤维肌痛[5]和脊髓损伤[6]。这是考虑滥用潜力较低,依赖有限责任,如果错过了,因此被列为一个时间表V药物在美国[7]。尽管各种生物分析方法估计年前人类血清[8]和分光光度法测定与估算的剂型(9、10)已经在文献中报道。最近一种新的验证的高效液相色谱方法测定[11]是年前散装药品和胶囊剂型。所有这些方法都是非常昂贵的,因为这些方法需要冗长而乏味的预处理thesamples,费劲的清理程序andderivatization对普瑞巴林。它需要简单的新的高效液相色谱法分析散装普瑞巴林在胶囊和普瑞巴林的决心。试图开发一个简单,有效和选择性的分析方法与散装胶囊和普瑞巴林的决心。紫外检测,可用在大多数用于高效液相色谱分析和药物实验室仪器。 The run time of the method was less than 10 minutes (6minutes).

实验

材料

我。普瑞巴林(Lee制药,海德拉巴,美联社、印度)。

二世。75年制药配方等与普瑞巴林(洪流Baddi制药有限公司印度)

三世。醋酸铵从默克公司购买,孟买,印度。

第四。乙腈是高效液相色谱级从Qualigens购买精细化学品,孟买,印度。

诉甲醇液相色谱年级从Qualigens购买精细化学品,孟买,印度。

vi。所有其他化学试剂均为分析纯,使用前未经进一步纯化。

仪表

我。水域联盟2695年使用的高效液相色谱法分离模块,水域2996光电二极管阵列检测器,授权软件。

二世。微观质量,Quattro微TM API, ESCI多模电离作用(使水域),Masslynx软件。

三世。数字酸度计,模型- lp - 1393 (makePOLMAN)。

第四。高效液相色谱柱使用是X-Bridge C18, 3.5μm(150毫米x 4.6毫米),使水域

色谱条件

建议使用液相色谱梯度法进行模型水域联盟,2695年分离模型。色谱分离是实现水域X-Bridge C18, 3.5μm(150毫米X 4.6毫米)列。梯度LC方法采用A和B溶液作为流动相。解决方案包含0.01个醋酸铵在水中(pH值- 6.8)。解决方案包含一个混合的乙腈和甲醇的比例80:20。流量为0.8毫升/分钟和检测波长为210 nm。LCMS上述高效液相色谱条件与质量工具(微观质量,Quattro microTMAPI, ESCI多模式电离,ESI来源,三重四重分析仪)和检测质量。

标准溶液

股票与准备的标准溶液溶解适量的流动相的复合给最终浓度为0.5 mg / 1毫升。(答:5毫米NH4OAC在水中(pH值6.8),B: 20%甲醇+ 80%乙腈,稀释剂——:B:: 80: 20)

方法

系统适用性

系统适用性测试是不可分割的一部分,液相色谱测定方法。它是用来解决色谱系统的验证或足够的分析。测试的概念是基于设备、电子分析操作和样品分析构成一个完整的系统,可以被评估。

程序的确定与药品配方中

Pregalin75mg胶囊重量准确,最后粉。粉的量相当于100毫克的普瑞巴林被摇晃提取25毫升的流动相(答:5毫米NH4OAC在水中(pH值6.8),B: 20%甲醇+ 80%乙腈,稀释剂——:B:: 80: 20)。这是透过一个0.45μm微孔过滤器。解决方案是用流动相稀释获得浓度为0.5毫克/毫升,然后分析了以下建议程序和确定胶囊的普瑞巴林。普瑞巴林的决心胶囊配方中,结果表明,复苏是高和相对标准偏差值很低。这方法适合常规测定普加巴林的药物制剂。结果table4所示。

方法验证

特异性和选择性

该方法的特异性被注射空白溶液和样品溶液检查。没有空白和辅料干扰分析物峰的保留时间。基于光谱数据,峰纯度检查没有干扰相对杂质和辅料。

线性

普瑞巴林显示线性浓度范围的150μg / mlto 850μg /毫升。相关系数为0.999。结果table3所示。

精度

方法的准确性取决于添加已知数量的药物物质对应三个浓度水平的50%,100%,和150%的目标分析物浓度随着辅料一式三份。被分析物的百分比计算精度测定方法中恢复过来。基于我们的研究结果的方法是高度准确的。精度的结果如表1所示。

精度

计算方法的精度范围内与分析的基础上。精度的结果如表二所示。

该方法的鲁棒性

与流量变化,pH值,流动相比例和温度,没有普瑞巴林的保留时间的变化。它表明了该方法的鲁棒性。

结果和讨论

反相高效液相色谱方法开发和验证与普瑞巴林和决心的胶囊剂型。它验证了线性、特异性,精密度和准确度。以我最好的知识大部分methodsare开发的磷酸缓冲。但是磷酸缓冲不适合LCMS分析和乙酸铵缓冲是适合LCMS分析。因此,开发适合LCMS高效液相色谱法(HPLC)分析。

”

结论

发达高效液相色谱方法简单、准确、可重复的方法,与常规分析散装和制药配方。这种方法的主要优点是相同保留时间短,方法是适合LCMS分析。

引用

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