木贼干种子乙醇和甲醇提取物的抑菌和抑菌活性

摘要

采用琼脂孔扩散法测定了芫荽籽干乙醇提取物和甲醇提取物对临床重要分离菌的抑菌活性。结果表明，提取物对金黄色葡萄球菌最敏感，蜡样芽孢杆菌最不敏感，甲醇提取物对临床分离的细菌效果更好。提取物以浓度依赖性方式抑制细菌分离物的生长。对实验真菌径向菌丝生长的抑制作用表明，黑曲霉对其最敏感，根霉对其最不敏感。

关键字

抗菌，抗真菌，提取物，种子，鹿茸

介绍

药用植物是指含有可用于治疗目的的物质或作为合成有用药物的前体的植物。近年来，发展中国家对药用植物的使用逐渐重新产生兴趣，因为据报道，草药是安全的，没有任何不良副作用，特别是与合成药物相比，而且大多数民众收入较低[10]。因此，寻找更好、更便宜的植物源替代品是一种自然的选择。高等植物对人类生存的重要性怎么强调都不为过，它的重要性贯穿了人类生活和经济的各个方面，包括医疗保健的提供和药物的供应。由于许多传染性病原体对合成药物产生耐药性，寻找新的抗生素来源是研究机构、制药公司和学术界关注的全球性挑战。植物的主要优点是仍然是最有效和最便宜的替代药物来源。在亚洲、拉丁美洲和非洲，由于天然植物的药理特性，在当地使用它们作为主要的保健药物是相当普遍的。药物化学的发展，作为发现新的和更有效的治疗药物的重要标志，需要对植物的化学和生物活性进行进一步的研究。植物是对人类有益的活性次生代谢产物的最佳来源。许多植物源性药物已被报道具有镇痛、抗炎、抗氧化、降血糖、抗菌和抗真菌等生物学特性。植物通常产生许多次生代谢物，这些代谢物是杀微生物剂、杀虫剂和许多药物的重要来源。植物产品仍然是传统医学中使用的药剂的主要来源。植物提取物对细菌的影响已经被世界各地的大量研究人员进行了研究。从高等植物中开发抗菌剂的潜力似乎是有益的，因为它将导致对抗微生物的植物药物的发展。 Plant based antimicrobials have enormous therapeutic potentials as they can serve the purpose with lesser side effects that are often associate with synthetic antimicrobials [3] .

Buchholzia coracea以R.W. Buchholzia的名字命名，他于19世纪末在喀麦隆收集植物。它属于辣椒科。马鞭草种子具有药用价值。这些种子给了这种植物一个共同的名字“奇妙的考拉”，因为它在传统医学中的用途。种子被紫色假种皮覆盖，在象牙海岸人们咀嚼假种皮，这种假种皮有一种辛辣的味道。由于其广谱亲和力，有必要对其在食品中的潜在利用进行研究。本研究旨在评价马鞭草乙醇提取物和甲醇提取物的抑菌活性。

马鞭草种子的收集

马囊草种子来自埃基蒂州Ado-Ekiti的Oba市场，并在尼日利亚埃基蒂州埃基蒂州立大学植物科学系植物标本室进行鉴定。

种子加工

将种子洗净，切碎，风干21天。干燥后，用研钵和杵将种子磨成粉末，并储存在标记良好的气密容器中，以检测种子中乙醇和甲醇提取物的抗菌和抗真菌活性。

植物物质的提取

采用乙醇和甲醇两种萃取法提取植物种子有效成分，采用[9]法提取植物种子有效成分。分别用60%的甲醇和95%的乙醇在低温下提取150g的粉末种子，并在室温下以150rpm摇匀4天。然后将混合物过滤。使用真空旋转蒸发器(BUCHL Rolavapour R200/205型号R205V800)蒸发滤液，并在使用前将其保存在4℃的深色样品瓶中。

测试微生物

临床分离的金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、芽孢杆菌、枯草杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌用于这项工作，从翁多州奥沃联邦医疗中心医学实验室部收集，从埃基蒂州阿多埃基蒂埃基蒂埃基蒂州立大学微生物系收集黑曲霉、木霉和根霉的实验室真菌培养物。细菌维持在营养琼脂上，真菌分离株维持在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)上。

抗菌活性

采用[9]琼脂孔扩散法测定马齿苋提取物的抑菌活性，用无菌涂布器将含106个/ml (MacFarland标准)的试验菌(0.1ml)进行肉汤培养，均匀涂布于营养物琼脂平板表面。用无菌软木钻孔机在平板上打5个孔(直径6.0 mm)，分别加入0.5ml不同浓度(50,100,150和200mg/ml)的粗提物，并使其扩散约2小时。370C孵育18-24小时。通过测定抑菌带直径(mm)测定其抑菌活性。

抗真菌活性

采用[10]径向菌丝生长测定法测定提取物的抗真菌活性。将不同浓度(50,100,150和200mg/ml)的提取物约5ml无菌加入无菌马铃薯葡萄糖琼脂培养基(15ml)培养皿中。轻轻地旋转盘子，让它凝固。在培养皿中提取的培养基中，分别在中心单独接种试验真菌菌丝盘(6mm)， 28℃孵育5天。每24 h测定一次菌丝根生长，连续测定5d。

结果与讨论

表1结果表明，风干马鞭草种子甲醇和乙醇提取物对临床分离菌株的抑菌活性较好。给出了50,100,150和200mg/ml 4种不同浓度的抑菌带直径(mm)。浓度越高，提取物的抑菌活性越好，从整体结果看，甲醇提取物的抑菌效果优于乙醇提取物。其中枯草芽孢杆菌耐药性最强，大肠杆菌次之，金黄色葡萄球菌最敏感。研究了不同浓度(50、100、150、200mg/ml)下马齿苋种子风干提取物的抑菌活性表2对实验室分离真菌黑曲霉、绿色木霉和根霉最敏感，根霉次之，绿霉最不敏感。植物是对人类有益的活性次生代谢产物的最佳来源。据报道，许多植物源性药物具有抗菌、抗真菌、抗氧化、抗炎和降血糖等生物学特性。根据世卫组织的报告，80%的世界人口正在对土著草药感兴趣，通常是种子、水果、蔬菜、药物或其提取物，用于治疗疾病和维持健康。结果表明，在不同浓度(50、100、150和200 mg/ml)条件下，马鞭草种子提取物均能抑制所有分离株的生长。药用物质提取物的抗菌活性主要归功于其所含的植物化学成分，麻叶提取物也不例外。物质的抗菌特性是控制不需要的微生物的理想工具，特别是在治疗传染病和食品腐败方面。活性成分通常以消极的方式干扰微生物的生长和代谢。研究了不同浓度(50,100,150,200mg /ml)的马齿苋种子乙醇和甲醇提取物的抑菌活性表1。结果表明，浓度越高，抑菌带直径越大，提取物的抑菌活性越好，甲醇提取物的抑菌活性优于乙醇提取物。经观察，溶剂极性越强，萃取力越好。甲醇虽然因其毒性而不是推荐的食品溶剂，但其植物化学含量较高。结果表明，甲醇提取物比乙醇提取物的抗微生物活性更高，表明甲醇提取能产生更好的活性抗微生物植物化学物质。种子提取物中植物化学物质的存在表明提取物具有抗菌特性，这可以从提取物的抗菌活性结果中看到。不同浓度种子粗提物的抑菌活性范围为1.00+0.01 ~ 27.00+ 0.02。提取物的抑菌活性随浓度的增加而增强。对50mg/ml乙醇提取物和200mg/ml甲醇提取物的抑菌范围分别为9.00 + 0.03 ~ 27.00 + 0.02，对金黄色葡萄球菌最敏感。

鼠伤寒沙门氏菌次之，抑制范围在2.0+ 0.04 ~ 22.0+ 0.06之间，寻常假单胞菌的抑制范围在3.00+ 0.01 ~ 14.0+ 0.01之间。乙醇提取物浓度为50 mg/ml，甲醇提取物浓度为200mg/ml，对枯草芽孢杆菌的抑制区在1.00 + 0.01 ~ 7.00+ 0.06之间;其次是大肠杆菌，抑菌范围在1.00+ 0.32 ~ 9.00+ 0.21之间。

考虑到植物的丰富多样性，期望对植物提取物的抑菌活性进行筛选和科学评价，提供新的抑菌物质;因此，目前的研究清楚地揭示了这些种子的抗菌性质，并表明这些种子可以用于管理由这些细菌引起的人类系统疾病。抑菌活性研究结果表明，植物种子具有丰富的抑菌活性[15,16]，其活性成分通常对微生物的生长和代谢产生负面干扰[10]。细菌分离物的不同程度的敏感性可能是由于微生物的内在耐受性以及提取物中存在的植物化学物质的性质和组合。从临床角度来看，本研究中使用的试验生物与各种形式的人类感染有关，肺炎克雷伯菌是克雷伯菌属中最重要的成员，它正在成为新生儿医院感染的重要原因。大肠杆菌可引起败血症，并可感染胆囊、手术伤口、皮肤损伤和肺部，特别是在身体虚弱和免疫缺陷的患者中。寻常变形杆菌能引起膀胱炎症。铜绿假单胞菌是一种广泛存在于环境中的条件致病菌，是医院感染的主要原因，也是社区获得性感染的偶发原因。金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门菌分别与食物中毒和伤寒有关，枯草芽孢杆菌可引起眼睛感染、食物变质和食源性中毒。马鞭草种子提取物的抗真菌活性见表2表明对所用真菌有显著的抗真菌活性。许多科学家[20,21,22,23,24,25,26]对来自世界不同地区的药用植物的抗真菌活性进行了研究。黑曲霉最敏感，抑菌区在7.00+ 0.11 ~ 34.00+ 0.02 (mm)之间，木霉次之，抑菌区在4.00+ 0.01 ~ 26.00+ 0.05之间，根霉最低，抑菌区在3.00 + 0.15 ~ 22.00+ 0.06 (mm)之间。为了发现能够抑制曲霉、毛霉、根霉等真菌的植物产品，人们进行了许多研究。这些真菌引起的人类感染难以有效控制，目前已有的药物库[10]。因此，抑制其生长而不伤害宿主的植物产品代表了潜在的治疗剂。分别用甲醇和乙醇测定了其提取物的抑菌活性。

活性的变化趋势与前面提到的抑菌活性一致，即甲醇提取物比乙醇提取物对所用真菌菌丝的径向生长具有更高的抑制区。[16]还发现，山麻种子的己烷和甲醇提取物对绿色木霉和黑曲霉的生长有抑制作用。

结论

所述植物提取物作为抗被试微生物的抗菌化合物具有很大的潜力，因此可用于治疗被试分离物引起的传染病。当考虑作为天然食品和饲料添加剂来改善人类和动物的健康时，这种种子可能会更好。

参考文献

1. 非洲的药用植物和传统医学。约翰威利父子有限公司;Pp, 2008, 1-10
2. 杨建军，刘建军，刘建军，刘建军，刘建军，刘建军。1-1 (b -d-核呋喃苷Erothmannsa loengithora植物化学，1999;2(3):12-21。
3. 李建军，李建军，李建军，等茄属植物trinobatumlinn.Afri。生物工程学报。2006;5(3): 2402 - 2012。
4. Bibitha B, Jisha V.K, Salitha c.v.， Mohan S和Valsa a.k.不同植物提取物的抑菌活性。中华微生物学杂志。2002;42(2):361-363。
5. 王志强，王志强。植物组织培养中抗肿瘤化合物的研究进展[j] .植物营养学报。2002;1:71-79。
6. 辛德胡青麻indicum叶提取物。杂志2009;2:567 - 571。
7. 张建军，张建军，张建军，等。大茴香叶提取物的抑菌活性研究[J] .中国生物医学工程学报，2008;21(1):771 - 771。
8. Alani SAD, Glazada F, Gerrantes JA, Tarres J, Ceballas GM.墨西哥传统药物中用于治疗胃肠道疾病的一些植物的抗菌特性。[J] .中国生物医学工程学报，2009;31(2):563 - 567。
9. Osadebe PO, Ukwueze SE。尼日利亚东部种非洲槲寄生植物化学和抗菌特性的比较研究(桑micranthus)，取自不同的寄主树。中国生物医学工程学报，2004;2(1):18-23。
10. [j]。几种药用植物抗真菌活性的初步研究Bsidiobulus还有一些致病真菌。真菌病。1995;38:191 - 195。
11. Sahito SR, MA Memon, TG Kazi, GH Kazi。药用植物中矿物质含量的评价Azadirachta indica(尼姆)。化学学报，2003;25(2):139-143。
12. Aboaba OO, Smith SI, Olide FO。食用植物提取物的抗菌作用大肠杆菌[15]李建军，刘建军。中国生物医学工程学报。2006;5(4):357 - 357。
13. Mohanta TK, Patra JK, Ralf SK, Pal DK, Thata HN。菜油和坚果的抑菌活性评价及植物化学筛选半腕骨心梗李立军。科学研究。2007;2(2):486-490。
14. 张世生，许志强，谢亚华，许志强。来自迷迭香和鼠尾草的天然抗氧化剂。[J] .食品科学与技术，1997;42:1102-1106。
15. Mbata TI, Dura CM, Onwumelu HA。植物种子粗提取物的抑菌活性研究Bucholzia coriacea对一些致病菌。生物工程学报，2009;01- 01。
16. Ezekiel o, OnyeozirI NF。抗菌性能的初步研究赤藓属的(美妙的可乐)。生物技术学报，2009;8(3):472-474。
17. Gupta M, Mazunder UK, Pal DK, Bhatta, Charya s五角reflexaRoxb。阀杆和Corchorus olitorius老鼠体内的亚麻籽。[J] .中国药理学杂志，2003;39(1):1 - 4。
18. 黑詹。《微生物学:原理与应用》，Prentice Hall，纽约。P. 260, 1996。
19. Nester EW, Anderson OG, Robert C, Pearlsadl N, Nester MT.微生物学:人类视角，第4版，macgrauw - hill公司，N.Y u.s. pp.635- 637,2004
20. 杨建军，张建军。黄芪粗提物的抑菌活性研究五角reflexaRoxb。中国生物医学工程学报，2003;35(5):397 - 397。
21. Adedokum AA, Okoli SO。植物粗提物的抗真菌活性Alfia barteri夹竹桃科Chasmanthera dependensHochst (Menisperaceae)。哈米德·美第库斯。2002;45:52-56。
22. 李建军，李建军，李建军，等Cicerarie tinum中国生物医学工程学报。2006;38:175 - 184。
23. Thebo NK, H Abro。抗真菌活性Azadirachta indica(印楝)抗人类致病真菌。信德大学科学与工程学院;Ser)。2000年,32(2):35-42。
24. Pirzada AJ, Shaikh W, Ghani KV, Laghari KA。药用植物抗真菌活性及其基本成分的研究水芹cretica防止真菌引起的皮肤病。信德大学科学与工程学院;Ser)。2009年,41(2):15 - 20。
25. Sanjay Gulena, Ashok Kumar。利用直接生物自传法研究喜马拉雅药用植物的抗真菌活性。中国生物医学工程学报，2006;5(5):998 - 998。
26. 沙特阿拉伯吉达一些药用植物的抗真菌活性。Mycopath。2009;7(1): 51-57。
27. Murali MV, Faridi MMA, Kaul PB, Ramachandran VC, Talwar V.克雷伯氏菌spticaemia在neonaties。中华儿科杂志。1993;60:565-572。