研究与评论:牙科科学杂雷竞技苹果下载志
菜单e-ISSN: 2320-7949和p-ISSN: 2322-0090
e-ISSN: 2320-7949和p-ISSN: 2322-0090
Swetha R1＊，肖巴娜·R2，苏那亚那2，普拉布D2拉吉·莫汉2和纳文·拉杰2
1部门公共卫生牙科，政府牙科学院和医院，Kadapa，美联社，印度
收到的日期: 25/03/2019;接受日期:26/04/2019;发布日期: 03/05/2019
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引言:大自然母亲赐予我们许多草药，这些草药被发现具有杀菌和杀菌的作用，这些草药已经被使用了很长时间。其中之一是玫瑰，像其他草药一样随处可见。人体的许多疾病都是细菌和真菌感染。特别是在口腔内，所有免疫功能低下的患者都容易受到真菌和细菌感染的影响。使用这些合成药物可能会导致副作用和抗生素耐药性。因此，本研究旨在研究玫瑰的抑菌和抗真菌作用。因此，确定其在牙科的应用，这些可以作为合成药物的替代品来治疗疾病。材料和方法:以月季花瓣为原料，制备乙醇提取物。将100克粉状样品浸泡在300毫升乙醇中，置于索氏仪中。从索氏装置中获得的样品然后溶解在(二甲基亚砜)DMSO中。 This is used to detect Antimicrobial activity of Rosa indica. Both zone of inhibition and minimum inhibitory concentration (MIC) were evaluated using Agar well diffusion method and micro-dilution method respectively. The results thus obtained were then compared with the control against Streptococcus mutans and Candida albicans. Results: Zone of inhibition of rose extract was found to be 18 mm, 16 mm, 10 mm at 1000 μg, 500 μg, 250 μg against Streptococcus mutans, which was less than the control kanamycin (24 mm) and zone of inhibition was 26 mm, 24 mm, 22 mm at 1000 μg, 500 μg, 250 μg against Candida albicans which was greater than the control ketaconozole (19 mm). Thus, the rose extract has both antibacterial and antifungal property. Antifungal effect is more than antibacterial effect of rose. Discussion: Zone of inhibition of rose extract is more when compared to ketaconozole, an antifungal drug and less than kanamycin, an antifungal drug. Rose extract has both antibacterial and antifungal property. Antifungal effect of rose is more than antibacterial effect and it is very effective against fungal diseases. Conclusion: We can state that roses have both antibacterial and antifungal activity. In the present study rose extract has more antifungal property than antibacterial property. With this finding, rose can be used as a potent antifungal drug to treat fungal infections.
玫瑰，抗真菌性能，抗菌性能，抑制区
从过去来看，植物一直被认为是比合成药物更重要的药物，因为植物含有多种化合物，可以对抗病毒、细菌、真菌，也可以对抗癌症等不治之症。合成药物常用于治疗传染病。甚至是疾病口腔用合成药物治疗。用于治疗疾病的合成药物会产生副作用。在个体中被排除的最常见的副作用是抗生素耐药性。与合成药物不同，使用草本植物的副作用更少或没有副作用，也没有抗生素耐药性。世卫组织估计，目前80%的非洲和亚洲国家人口在初级疾病的某些方面使用草药卫生保健并将其视为各种药物的最佳来源[1］．
在这些草药中，玫瑰有许多药用价值。蔷薇属多年生木本植物，属蔷薇科。大多数原产于印度，少量原产于非洲、欧洲和北美。它们大多以美丽和芬芳而闻名。“Rose”这个词来自拉丁语“Rosa”。玫瑰花瓣、玫瑰果、玫瑰种子、玫瑰水、玫瑰叶、玫瑰油和玫瑰茶在商业上被用于治疗各种感染[2-5］．
玫瑰可以对抗细菌感染，缓解皮肤刺激，净化皮肤。它能改善血液循环，促进头发生长，还能控制头皮屑。这些对舒缓疲劳的眼睛是有效的。喝玫瑰水或茶可以去除体内热量，退烧。它是一种防腐剂，抗痉挛，收敛，杀菌(对伤寒，腹泻，霍乱，食物中毒)，抗病毒(感冒或流感)，消炎。它有助于去除疤痕和印记。在治疗可怕的癌症时，病人经常服用严重的抗癌药物，结果导致免疫抑制。在这些病人中机会性感染更为常见。玫瑰精华含有80%的必需脂肪酸和抗氧化剂，有助于皮肤细胞再生。如果口服疾病中，真菌感染主要是念珠菌病，经常使用玫瑰提取物治疗疾病是很有效的。根据2007年和2013年的研究发现，玫瑰含有大量的多酚[6，7］．2005年发表在《美国临床营养学杂志》上的一项关于多酚的研究发现，多酚可能有助于预防心血管疾病、骨质疏松症和癌症等致命疾病[2-4］．它有助于增强免疫系统的活性[1-11］．
口腔细菌变形链球菌而且乳酸菌分别是与龋齿发生和发展有关的主要微生物。免疫抑制可形成粘膜生物膜，导致临床出现鹅口疮[12］．
参考2012年发表的研究，证实玫瑰含有维生素C [13］．它还含有维生素B1、B2、B3、K、E、糖、类黄酮和单宁。它可以加强牙齿和牙龈。它对牙痛有好处。将玫瑰粉撒入口腔治疗口腔炎。因此，玫瑰在中国有很大的用处牙科因为它被证明可以治疗背斜。玫瑰用作漱口水可减少异味[2，3.，10，11，14-16］．
本研究旨在深入研究玫瑰的抗菌、抗真菌作用及其对多种口腔感染的防治作用。通过证明这一点，在不久的将来，玫瑰可以成为牙科的重要组成部分，对其成分和特性的广泛研究将使我们能够利用它的好处。
样品
罗莎籼花卉是从园艺师鉴定的市场上采集的。将花晒干，用30毫升乙醇稀释。
病原体
两种不同的病原体变形链球菌而且白色念珠菌可在MRD生命科学(P)有限公司查阅。从昌迪加尔微生物技术研究所(IMTECH)收集的勒克瑙，被传代培养并在整个项目工作中使用。
粗乙醇提取物的制备
乙醇提取物用100 g粉末提取，在索氏仪中浸泡在300 ml乙醇中。上述准备重复三次。乙醇提取物在45°C恒温旋转蒸发器冷凝制成粉末，溶解在二甲基硅氧烷(DMSO)溶剂中，用于抗菌活性。
井扩散法
新鲜细菌培养变形链球菌MTTC 890和新鲜真菌培养白色念珠菌用MTTC 773进行抑菌试验。采用新鲜微生物培养物进行抑菌活性测定。菌落接种Muller Hinton肉汤(细菌)和马铃薯葡萄糖肉汤(真菌)，在37°C的轨道摇床中以200 rpm的速度孵育24小时。拭子前用无菌肉汤调整浊度至0.5麦克法兰标准;微生物标准接种量为1.5 × 106菌落形成单位(CFU mL－1)稀释至1:100，混浊度为麦克法兰标准0.5。混浊度调整为麦克法兰0.5 mL 1.175% w/v (0.048 M) BaCl2。H2O至99.5 mL 1% w/v(0.36)硫酸。
标准抗生素卡那霉素的变形链球菌还有氟康唑白色念珠菌作为参考。用消毒棉签棒在Muller Hinton琼脂(MHA)上擦拭微生物(24 h培养)，以细菌和马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)为真菌板。井(直径9毫米)使用无菌软木钻孔机切割。用二甲基亚砜(DMSO)溶解玫瑰粉乙醇提取物的原液。用10毫克/ 2毫升DMSO配制原液。从原液中提取50 μl、100 μl、200 μl (10 μl稀释样品中含有50 μg待测化合物)，立即用消毒过的微针尖将不同稀释量的样品分配到培养接种板(MHA)的琼脂孔中。培养皿在37°C下孵育过夜。以抑菌带直径(包括孔直径)测定抑菌活性，按下式计算抑菌率:
抗微生物活性:抑制区
图1描述了不同浓度的卡那霉素和玫瑰花瓣提取物在用变形链球菌擦拭的Muller Hinton琼脂上的抑制区。卡那霉素的抑制区大于样品。
图1所示。玫瑰粉对变形链球菌的抗菌活性。
图2描述了不同浓度酮康唑和玫瑰花瓣提取物在马铃薯葡萄糖琼脂上的抑制区白色念珠菌。样品的抑制区大于酮康唑。
图2。玫瑰粉的抗真菌活性白色念珠菌。
最低抑菌浓度(MIC)
根据国家临床实验室标准委员会(NCCLS) 2000，采用微量稀释法连续稀释(2倍)玫瑰提取物测定MIC。选择具有显著抑制作用的乙醇提取物进行测定。Muller Hinton肉汤的制备和灭菌使用高压灭菌器。取制备好的肉汤100 μl，用无菌微管滴入编号为1-12的孔中。制备含mg/ml提取物的原液。取100 μl溶液，分别分到编号为1的试管中。
随后，从1号井开始连续稀释，1号管中的100 μl转移到10号井，10号井中的100 μl弃用。第11和第12个有生物控制的可行性。在无菌营养液中制备每个测试分离菌的过夜培养(接种)。从1孔到12孔，每管中分别注入100 μl接种物。稀释500 μg/ml 250 μg/ml后，各平板中乙醇提取物的终浓度为1-10;125μg / ml;62.5μg / ml;31.25 μg/ml;15.625μg / ml;7.812μg / ml; 3.90 μg/ml; 1.953 μg/ml and 0.976 μg/ml were incubated at 37°C for 24 hrs and examined for growth. Subsequently, each well with 20 μl of Blue tetrazolium (5 mg/mL) freshly prepared in PBS buffer and incubated for 30 min. After incubation, well showed blue color indicate viability of organisms and presence of yellow color or absent of blue color indicate complete inhibition of bacteria and fungi.
等体积的提取物和营养肉汤混合在试管中。为测试批次保留了两个控制管。其中包括抗生素对照(试管中含有提取物和生长培养基，不含接种物)和生物体对照(试管中含有生长培养基、生理盐水和接种物)。与对照管相比，无明显细菌生长(无浑浊)的提取液的最低浓度(最高稀释)被视为MIC。
采用连续稀释法测定了玫瑰粉的最低抑菌浓度。结果表明，玫瑰粉对变形链球菌的最低抑制浓度为6 (15.63 μg)白色念珠菌浓度为6 (15.63 μg)。
抑制区
抑制区是指细菌对药物的敏感程度。抗菌用琼脂孔扩散法测定玫瑰样品的活性(图3及4)。
图3。用微量稀释法测定玫瑰样品提取物和卡那霉素的最低抑菌浓度。A:玫瑰粉(MIC为6);B:卡那霉素(MIC为9);C:四环素(MIC为9)500μg;2.250μg;3.125μg;4. 62.5 μg; 5. 31.25 μg; 6. 15.625 μg; 7. 7.812 μg; 8. 3.90 μg; 9. 1.953 μg; 10. 0.976 μg; 11 and 12. Organism control.
图4。微量稀释法测定玫瑰样品提取物和酮康唑的最低抑菌浓度。A:玫瑰粉(MIC为6);B:氟康唑(MIC为4);C:酮康唑(MIC为9)500μg / mL;2.250μg / mL;3.125μg / mL;4. 62.5 μg/mL; 5. 31.25 μg/mL; 6. 15.625 μg /mL7. 7.812 μg; /mL 8. 3.90 μg/mL; 9. 1.953 μg/mL; 10. 0.976 μg/mL; 11 and 12. Negative control.
表1所示为抗菌提取物和标准抗生素卡那霉素的抑菌区结果。当样品浓度为1000 μg、500 μg、250 μg时，抑制区分别为18、16、10 mm。这说明抑菌活性随样品浓度的增加而增加。但卡那霉素的抑菌区比玫瑰花瓣的抑菌区好，抑菌区为24 mm。
表1。说明变形链球菌对样品浓度的反应。
| 微生物 | 浓度 | |||
|---|---|---|---|---|
| 变异链球菌 | 1000μg | 500μg | 250μg | 卡那霉素 |
| 抑制区(单位:mm) | 18毫米 | 16毫米 | 10毫米 | 24毫米 |
表2显示抑菌提取物和标准抗真菌酮康唑的抑菌区结果。当样品浓度为1000 μg、500 μg、250 μg时，抑制区分别为26、24、22 mm。这表明抗真菌活性随样品浓度的增加而增加。玫瑰花瓣提取物的抑菌活性高于酮康唑，其抑菌活性仅为19 mm。
表2。说明了白色念珠菌到样品的浓度。
| 微生物 | 浓度 | |||
|---|---|---|---|---|
| 白色念珠菌 | 1000μg | 500μg | 250μg | Ketoconozole |
| 抑制区(单位:mm) | 26毫米 | 24毫米 | 22毫米 | 19毫米 |
有许多研究描述了抗菌或抗真菌的作用罗莎籼但很少有人能比较这些影响及其作用程度。在本研究中，两者的影响罗莎籼通过比较，发现其抗真菌性能优于其抗菌性能。
抑制区表明该区域的大小取决于抗生素在阻止细菌生长方面的效果。在本研究中，玫瑰乙醇提取物的抑制区域变形链球菌在1000 μg、500 μg、250 μg浓度下分别为18 mm、16 mm、10 mm，对照组(卡那霉素)为24 mm。这说明玫瑰花瓣的抑菌效果不如卡那霉素(抗菌药)。本研究关于玫瑰花瓣样品抑菌活性的发现与Aslam等人的研究结果相反。[8的乙醇提取物罗莎籼，对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌的抑菌区分别为26、25、27 mm，对照四环素的抑菌区分别为20、26、17 mm [13］．说明抗菌活性高于四环素。这些发现可以说明这一点罗莎籼对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌有较强的抗菌作用，对变形链球菌的抗菌作用较弱。当乙醇提取物罗莎籼与对照卡那霉素相比，对变形链球菌的抗菌效果较差。这与Hirulkar等人进行的一项研究相似。9]，他使用玫瑰花瓣乙醇提取物对肺炎链球菌的抑制区域为27毫米，这表明从石油醚中提取的玫瑰花瓣具有更强的抗菌活性，肺炎链球菌的抑制区域为16毫米，这表明乙醇提取物对玫瑰物种的抑制作用比石油醚提取物更有效[9］．
在本研究区，玫瑰提取物对白色念珠菌在1000 μg、500 μg、250 μg时，孔孔直径分别为26、24、22 mm，酮康唑的孔孔直径仅为19 mm。这表明玫瑰提取物具有较强的抗真菌性能，其抗真菌效果优于酮康唑。Takte等人的研究[17]表明，在20、40、80 mg的浓度下，玫瑰甲醇提取物的抑菌区分别为8.3、14.9、21 mm白色念珠菌与氟康唑对照组比较这说明玫瑰甲醇提取物具有较强的抗真菌活性白色念珠菌。
根据Saeed等人。[18和Manjari等人。[19抗真菌的作用罗莎籼是由于植物化学物质的存在，如生物碱、酚酸、黄酮、单宁和挥发油[18，19］．Godstime等人的一项研究[20.]的研究结果表明，植物化学物质可能通过抑制微生物生长、诱导细胞膜扰动、干扰某些微生物代谢过程、调节信号转导或基因表达途径等作用。罗莎籼对环境中存在的引起严重感染的细菌和真菌菌株表现出抗真菌性能。因此，它可以用来治疗导致真菌感染的机会性感染。
研究表明罗莎籼具有比其抗菌活性更强的抗真菌活性。这表明它在治疗念珠菌病等真菌疾病方面有很好的效果，念珠菌病是HIV和其他免疫功能低下患者口腔中的机会性感染。还需要进一步的研究比起现场了解其在治疗真菌疾病中的药理作用。因此，它可以成为抗真菌药物的替代品。尽管这些药物可以治愈真菌疾病，但在服用过程中也会产生不良影响。罗莎籼已经随处可见，并可能成为机会性感染和其他感染患者的容易来源。大多数情况下，玫瑰以其美丽而闻名，但也有治疗用途。但尚需进一步的药理研究来确定其药用价值。
