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抗体的母乳在出生的第一个星期

El-Loly毫米1*,Guirguis啊2和Abdel-Ghany2

1乳品科学部门,国家研究中心,Dokki,埃及开罗

2埃及Zagazig大学食品科学系

*通讯作者:
默罕默德·曼苏尔El-Loly博士
乳品科学学系
国家研究中心
Dokki,埃及开罗
电话:(+ 202)33371433 / 362
电子邮件: (电子邮件保护)

收到的日期:17/01/2018;接受日期:27/01/2018;发布日期:02/02/2018

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文摘

IgA, IgM和母乳的免疫球蛋白g值较高的前12小时内显著增加哺乳的时间,然后与其他天的优势显著下降。SD的平均值分别为36.53±6.72,14.05±2.78,0.88±0.42 g / L在经历小时分娩,分别;在第七天,4.23±0.61,0.37±0.03,0.13±0.07 g / L。此外,母乳的总氨基酸含量免疫球蛋白(Igs)同样的趋势在这些时间。

关键字

乳房初乳,牛奶免疫球蛋白(抗体)、氨基酸

介绍

母乳喂养是一个独特的系统给完美的食物在新生儿健康成长和发育,母乳是生物形成含有大量生物活性粒子,确保防止感染和炎症,由于免疫成熟,器官改善和健康的微生物殖民。其中的一些生物活性粒子已经检查了作为一种新的治疗代理。因此,世界范围内的公共卫生建议提倡母乳喂养后前6个月的生命。母乳的成分变量是由于提要,和母亲之间增加哺乳(1,2]。母乳不仅给出了完成地调整新生儿的营养供应。此外,它代表了一种推进健康成长和发展的重要部分。因此,保护,支持和促进母乳喂养是一个公共卫生问题3]。

然而,初乳是“pre-milk“生物流体从乳腺分泌的雌性哺乳动物分娩后不久在头几天(1 - 3)的新生儿的生命。流体有不同的成分不同于后来产生的牛奶。它是淡黄色的,厚,粘性和低但营养水平高度。它包含许多组件,这被认为是重要的婴儿的免疫保护如Igs、乳铁蛋白、生长因子和溶菌酶。免疫球蛋白,也被称为抗体,是血液分子存在于血液、初乳和牛奶的哺乳物种,它由身体的自然免疫系统”由浆细胞(白细胞)”。在人类,一定程度的防守被动免疫转移到胎儿在怀孕的程度高于众多不同的其他哺乳动物,和人类初乳进一步支持持续发展新生儿的免疫力,同时,它没有免疫保护在许多不同的哺乳动物。许多研究为转移细胞因子提供了指示,Igs、生长因子、抗菌化合物和产妇初乳的免疫细胞通过喂养新生儿(4- - - - - -8]。另外,母乳是最适合新生儿的营养,富含蛋白质(包括Igs),其他免疫分子,丰富的营养和维生素和微量元素,满足婴儿的需要在哺乳期的所有阶段由于其显著的优势(9]。

人类的Igs家庭由五类三大,IgA, IgM和免疫球蛋白以及两个小,IgD IgE。牛的主要类和母乳是免疫球蛋白,IgM IgA。各种搞笑的分数水平初乳和牛奶令人印象深刻的是根据不同物种和往往是独特而血。例如,IgA类包含约90和15 - 20%的总Igs人类初乳和牛奶以及血液中分别(10]。牛,Igs分成四个同形像,免疫球蛋白(IgG1和免疫球蛋白2)、IgA IgM IgE,基于他们拥有的重链(10- - - - - -14]。免疫球蛋白、IgA、IgM分子存在的牛奶中含量都很高,尤其是在初乳。血液免疫球蛋白主要在初乳、牛奶和代表约80 - 90,60 - 70和Igs总量的90%,分别),而在母乳IgA代表了主要的搞笑类(15,16]。

本研究的目的是沉淀的免疫球蛋白母乳样本以确定IgA的浓度,IgM和免疫球蛋白以及人类Igs的必需和非必需氨基酸在出生的第一个星期在0 - 0.5,1,2,3,4,5,6,7天产后。

材料和方法

样品收集

这项研究进行了评估抗体的浓度在第一周出生母乳。个人获得的牛奶样品从六个哺乳期的母亲El-Sadeen村,Menia Al-kamh中心,埃及Sharkia省。初乳和牛奶样品收集在0 - 0.5,1,2,3,4,5,6,产后7天。收集样本(约25 - 35毫升)消毒奶瓶的监督手册表达式末尾的喂养和运送到了实验室的一个冰盒。所有样本存储在-20°C立即到达并保持冷冻,直到分析。

母乳的免疫球蛋白

样品制备

母乳样本由离心脱脂牛奶4000 rpm / 3分钟。从脱脂牛奶乳清准备通过调整pH值在4.6使用一个N Hcl溶液和离心机在10000转/ 15米去除酪蛋白沉淀。总Igs配备乳清样品使用饱和硫酸铵溶液兼容(17]。提取硫酸铵透析与蒸馏水的许多变化在此期间24小时在冰箱里。保持在-20°C的透析提取到分析。

免疫球蛋白量化由单一径向免疫扩散(srid)技术

SRID工具包(从结合位点有限,英格兰)用于测定Igs部分(IgA, IgM和免疫球蛋白)在人类初乳和牛奶样品7天内分娩。它的工作主要是从18,19]。一些样品用于稀释;每个样本被放置在一个well-punched凝胶层,盖子紧闭,平板是存储在2 - 8˚C。至关重要的是,这种凝胶孵化期间不应该允许干燥。减少蒸发在孵化过程中,提出的盘子必须重新封闭铝箔袋或存储在湿盒(一个密封的塑料盒包含潮湿的纸)。完全扩散的最小孵化时间是48 h (IgM 72 h),然后测量扩散,可以直接从消除阅读参考表来计算每个样本的免疫球蛋白含量给制造商手册。

氨基酸分析

(定义的氨基酸含量测定20.,21]。分析实现中央服务单位,国家研究中心,埃及,使用LC3000氨基酸分析仪(德国Eppendorf-Biotronik)。氨基酸的分离过程建立在使用强阳离子交换色谱法其次是ninhydrine颜色反应和光度检测在570海里。样本盐酸水解与6 N在聚四氟乙烯封顶110°C瓶后24 h。真空排除盐酸、柠檬酸锂的余数溶解在缓冲,pH值2.2。二十μl解决方案的上传的阳离子交换柱(相同的预平衡缓冲),当时,缓冲区的柠檬酸four-lithium先后被用来列流量0.2 ml / min和pH值为2.2,2.8,3.3和3.7,在相同的顺序。0到150的压力流量的酒吧和ninhydrine 0.2毫升/ m。缓冲压力从0到50个酒吧和反应温度是130ºC。

统计分析

统计分析获得的数据使用SPSS版本20-computer程序(22]。所有数据由意味着±标准差(SD)的三个复制并使用一维方差分析比较和最小显著差(LSD)。值与不同的字母在同一列不同显著-0.05 p < 0.01。

结果与讨论

个人获得的牛奶样品从六个哺乳期母亲产后7天内。获得的样本在0 - 0.5,1,2,3,4,5,6,7天内分娩。的母乳Igs清点SRID法。之间的关系Igs浓度和沉淀抗原抗体反应的直径可以成立。它注意到初乳的Igs水平较高,大大降低了出生的头几天。Igs价值观倾向于下降和增加哺乳的时间甚至更低。这一发现被(对应23]。母乳样本的总Igs水平变化在0 - 0.5之间,产后1、2和其他天。这是最高意义在0 - 0.5天,相比其他天。总Igs的平均水平为51.47±6.64 g / L在0 - 0.5天,然后在产后1天减少36.88% (32.49±4.79 g / L)和61.61%在第二天(19.76±4.47 g / L)。在3、4、5、6和7天内分娩,总Igs的平均水平为14.05±3.47、10.59±1.38、8.24±1.91、6.17±1.10、4.73±0.57 g / L,分别。这些浓度下降了72.70,79.43,83.99,88.01和90.82%,3,4,5,6,7天,分别与总Igs相比在0 - 0.5天,产后(表1)。这些结果是非常同意的(14)表示,在从初乳过渡到成熟的牛奶,Igs水平大幅降低在第一次产后5天。本研究总Igs高于[24),33.66,9.77和1.73 g / L(0,分别为3和6天产后。此外,初乳的Igs水平分别为19.4和1.14毫克/毫升在成熟的牛奶25]。

表1。平均母乳免疫球蛋白的变化内容的第一周内哺乳。

成分(g / L) 哺乳时间(天) LSD * *
0 - 0.5 1 2 3 4 5 6 7
Igs总
平均数±标准差* 51.47±6.64 32.49±4.79 b 19.76±4.47摄氏度 14.05±3.47 d 10.59±1.38德 8.24±1.91英孚 6.17±1.10英孚 4.73±0.57 f 4.455
%的变化 0.0 - 36.88 - 61.61 - 72.70 - 79.43 - 83.99 - 88.01 - 90.82
IgA
平均数±标准差 36.53±6.72 23.9±83.09 b 14.25±1.50摄氏度 10.16±2.06 d 8.57±1.23德 6.71±1.84 def 5.24±1.11英孚 4.23±0.61 f 3.547
Igs总额的% 70.98 73.80 72.12 72.35 80.95 81.37 84.93 89.53
IgM
平均数±标准差 14.05±2.78 7.99±3.04 b 5.14±2.96摄氏度 3.59±1.86 cd 1.77±1.76德 1.32±1.18德 0.76±0.28 e 0.37±0.03 e 2.520
Igs总额的% 28.56 24.58 26.01 25.57 16.73 15.99 12.28 7.77
免疫球蛋白
平均数±标准差 0.88±0.42 0.53±0.21 b 0.37±0.15公元前 0.29±0.13公元前 0.25±0.14特首 0.22±0.12特首 0.17±0.08特首 0.13±0.07 e 0.239
Igs总额的% 1.71 1.62 1.87 。08 2.32 2.64 2.79 2.70

母乳IgA值在第一个星期分娩高明显在0 - 0.5天,比其他天分娩,被分别为36.53±6.72 g / L在0 - 0.5天,产后。它减少到23.98±3.09,14.25±1.50 g / L, 1号和2号天产后在相同的顺序。也逐渐减少可以注意到第二天,10.16±2.06,8.57±1.23,6.71±1.84,5.24±1.11,4.23±0.61 g / L在3、4、5、6和7天产后,分别为(表1图1 a-1c)。这些结果一致与获得的(23- - - - - -28]。然而,IgA是校长在人类初乳和牛奶,它倾向于下跌更低哺乳时间增加,个体变异在Igs是0可观。相反,免疫球蛋白是主要的免疫球蛋白类存在于反刍动物奶(29日]。另一方面,在这项研究中,它是高于[231)即(1735毫克/ 100毫升)和4th(100毫克/ 100毫升)天的哺乳。人类牛奶样品的IgA的浓度范围是1.5 - -83.7,0.63 - -32.8,0.40 - -3.14和0.50 - -1.1 g / L与平均水平的32岁,9日,1.45和0.75 g / L(0) 3、6和14天产后分别[24]。在这项研究中,IgA的平均浓度在1号和2号天低于[30.]33.5±25.8,21.1±18.0 g / L,在相同的顺序。相反,它是高3,4,5,6,7天内分娩(9.5±8.2,4.3±2.5,3.1±2.1,2.9±2.3,2.2±1.2 g / L,分别)。IgA内容的中位数是17.4和1毫克/毫升在初乳和牛奶25]。人类的IgA内容初乳是1234毫克/ 100毫升(31日]。西班牙女性的初乳含有最大的IgA水平,其次是过渡牛奶最后成熟的牛奶是290.4±258.2,63.4±63.5,50.3±67.2 mg / dL,与它们之间的显著差异(32]。IgA水平17.35和1 g / L的人类初乳和牛奶比90和Igs总额的87%29日]。IgA母乳样本的平均水平(83.71±38.03 mg / dl),而平均水平的IgM (29.95±15.73 mg / dl) [33]。

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图1:单一径向IgA免疫扩散分析人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1、2、3、4、5、6和7代表样本的母亲在0 - 0.5 1号,1,2,3,4,5,6天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13、14和8代表的母亲在0 - 0.5,2号样品1,2,3,4,5,6天产后,分别。

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图1 b:单一径向IgA免疫扩散分析人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表的母亲在0 - 0.5,3号样品1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 4号0.5,1,2,3,4,5天产后,分别。

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图1 c:单一径向IgA免疫扩散分析人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表样本的母亲在0 - 5号0.5,1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 0.5,6号1、2、3、4和5天产后,分别。

表1图2 a-2c显示IgM的平均水平,这是明显高于在0 - 0.5天(14.05±2.78 g / L)比其他日子产后和降至7.99±3.04 g / L, 1天分娩。逐渐减少可以注意到第二天,5.14±2.96,3.59±1.86,1.77±1.76,1.32±1.18,0.76±0.28,0.37±0.03 g / L 2, 3, 4, 5, 6, 7天产后,。IgM代表平均28.56,24.58,26.01,25.57,16.73,15.99,12.28和7.77%的总Igs在0 - 0.5,1,2,3,4,5,6,7天内分娩,在秩序。在这项研究中,IgM内容是高于23)即在1日(19毫克/ 100毫升)和4(10毫克/ 100毫升)天的哺乳。此外,它是高于24)发现IgM的平均浓度分别为1.13,0.58,0.25和0.15 g / L(0) 3,分别产后6 - 14天。然而,他们发现IgM逐渐减少的内容在第一次出生后几个小时产后第二天。IgM浓度是1.6和0.10毫克/毫升在初乳和牛奶25]。此外,IgM浓度是1.59和0.10 g / L在人类初乳和牛奶比分别为8.0和Igs总额的10% (29日]。

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图2:单一径向免疫扩散分析IgM人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1、2、3、4、5、6和7代表样本的母亲在0 - 0.5 1号,1,2,3,4,5,6天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13、14和8代表的母亲在0 - 0.5,2号样品1,2,3,4,5,6天产后,分别。

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图2 b:单一径向免疫扩散分析IgM人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表的母亲在0 - 0.5,3号样品1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 4号0.5,1,2,3,4,5天产后,分别。

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图2 c:单一径向免疫扩散分析IgM人类初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表样本的母亲在0 - 5号0.5,1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 0.5,6号1、2、3、4和5天产后,分别。

最后,免疫球蛋白含量在0 - 0.5天显著高于其他天的分娩,是0.88±0.42 g / L,然后跌至0.53±0.21,0.37±0.15 g / L, 1号和2号天产后在相同的顺序。也逐渐减少可以注意到第二天,0.29±0.13,0.25±0.14,0.22±0.12,0.17±0.08,0.13±0.07 g / L在3、4、5、6和7天产后,分别为(表1图3 a-3c)。在我们的研究中,免疫球蛋白含量都高于[23(43)在1日毫克/ 100毫升)和4(4毫克/ 100毫升)天的哺乳。相反它是低于[24谁发现,免疫球蛋白含量分别为0.53,0.19和0.03 g / L(0,分别为3和6天产后。此外,他们建立了免疫球蛋白含量逐渐下降的最初几个小时内分娩后,接下来的几天交货。初乳中免疫球蛋白水平为0.063毫克/毫升的玛雅印度女性(产后1 - 4天)34]。而在人类初乳中的免疫球蛋白含量10毫克/ 100毫升(35]。

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图3:单一径向免疫扩散分析人类免疫球蛋白的初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1、2、3、4、5、6和7代表样本的母亲在0 - 0.5 1号,1,2,3,4,5,6天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13、14和8代表的母亲在0 - 0.5,2号样品1,2,3,4,5,6天产后,分别。

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图3 b:单一径向免疫扩散分析人类免疫球蛋白的初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表的母亲在0 - 0.5,3号样品1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 4号0.5,1,2,3,4,5天产后,分别。

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图3 c:单一径向免疫扩散分析人类免疫球蛋白的初乳和牛奶在产后第一周。井没有:1,2,3,4,5,6,7,8代表样本的母亲在0 - 5号0.5,1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。井没有:9、10、11、12、13和14代表样本的母亲在0 - 0.5,6号1、2、3、4和5天产后,分别。

一般来说,它的结论是IgA是主要的免疫球蛋白的分析样本,IgM,占第二位的Igs和免疫球蛋白检测牛奶的小水平相比IgA, IgM(图4)。这是这一趋势的作品(23- - - - - -26,28,29日,36- - - - - -38]。

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图10:平均浓度的IgA, IgM和免疫球蛋白在产后第一周母乳样本。

氨基酸的决心是非常重要的新生,因为蛋白质的营养价值主要取决于其内容的人体不能合成的必需氨基酸。因此,人类Igs的必需和非必需氨基酸在产后第一周在本研究测定。人类初乳蛋白质的变化说明,提供完全的营养品质,和作为一个重要的特殊氨基酸快速增长所需的婴儿39]。出生后的增长是非常重要的,尤其是,丝氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸大量蛋白质总量的氨基酸。高水平的谷氨酸在牛奶可以使用作为一个氨基酸代谢的关键位置。另一方面,它转换成α-keto谷氨酸可以进入三羧酸循环。通过分析母亲的牛奶蛋白的氨基酸组成,它认识到,大约20%的谷氨酸,而在最小的组氨酸,半胱氨酸和蛋氨酸40](表2)

表2。氨基酸的母乳Igs值在产后第一周。

氨基酸
(毫克/ 100毫升)
哺乳时间(天)
0 - 0.5 1 2 3 4 5 6 7
至关重要的 缬氨酸 1.33 0.63 0.59 0.48 0.42 0.36 0.40 0.19
亮氨酸 1.88 1.17 1.10 1.02 0.99 0.83 0.72 0.50
异亮氨酸 0.56 0.35 0.34 0.35 0.31 0.31 0.23 0.16
苏氨酸 0.78 0.49 0.43 0.43 0.34 0.30 0.21 0.17
蛋氨酸 0.30 0.20 0.15 0.19 0.16 0.11 0.16 0.09
苯丙氨酸 1.47 0.79 0.82 0.61 0.64 0.52 0.52 0.49
组氨酸 0.91 0.43 0.49 0.39 0.57 0.51 0.26 0.20
赖氨酸 1.11 0.68 0.64 0.72 0.83 0.63 0.43 0.36
8.34 4.74 4.56 4.20 4.25 3.58 2.92 2.16
不必要的 天冬氨酸的 1.22 0.81 0.79 0.85 0.72 0.67 0.58 0.35
丝氨酸 1.00 0.68 0.58 0.53 0.44 0.39 0.38 0.21
Glutamicacid 2.42 1.72 1.55 1.58 1.27 1.24 0.81 0.65
甘氨酸 0.37 0.20 0.17 0.15 0.12 0.12 0.12 0.07
丙氨酸 1.12 0.76 0.71 0.57 0.51 0.47 0.46 0.23
胱氨酸 1.66 0.61 0.57 0.44 0.45 ND ND 0.22
酪氨酸 1.16 0.49 0.66 0.38 0.54 0.47 0.27 0.25
精氨酸 1.22 0.83 0.82 0.52 0.48 0.42 0.40 0.20
脯氨酸 1.95 1.48 1.32 0.87 0.86 1.04 1.42 0.43
12.13 7.58 7.17 5.89 5.39 4.82 4.44 2.62
一般总 20.47 12.32 11.74 10.09 9.65 8.40 7.36 4.78

氨基酸、苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和精氨酸浓度逐渐降低泌乳的第一个星期期间,值是0.78 - -0.17,1.33 - -0.19,0.56 - -0.16,1.88 - -0.50,1.00 - -0.21,2.42 - -0.65,0.37 - -0.07,1.12 - -0.23和1.22 - -0.20毫克/ 100毫升0 - 0.5和产后7天,分别。然而,蛋氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸、酪氨酸和脯氨酸浓度是最高的在0 - 0.5天减少产后7天,但这些减少un-gradually。这些值在0 - 0.5和7天产后蛋氨酸(0.30和0.09),苯丙氨酸(1.47和0.49),组氨酸(0.91和0.20),赖氨酸(1.11和0.36),天冬氨酸的(1.22和0.35),半胱氨酸(1.66和0.22),酪氨酸(1.16和0.25)和脯氨酸毫克/ 100毫升(1.95和0.43),。很明显,总氨基酸值在0 - 0.5天,最高显著下降随着时间的进展哺乳,这些值分别为20.47,12.32,11.74,10.09,9.65,8.40,7.36和4.78毫克/ 100毫升在0 - 0.5,1,2,3,4,5,6,7天产后,分别。

结论

此外,很显然,谷氨酸在母乳Igs(非必要)主导,形成13 - 30%的总总氨基酸量为1.41毫克/ 100毫升。这一发现是对应相同的趋势,41)他们发现谷氨酰胺和谷氨酸含量高的母乳,但母亲之间存在着很大的差别。然而,亮氨酸(必需氨基酸)的最大数量(9.72%)平均为1.03毫克/ 100毫升。此外,缬氨酸,丙氨酸,丝氨酸,苏氨酸、甘氨酸、精氨酸和半胱氨酸水平的水牛的奶Igs的头两周内逐渐减少哺乳,而天门冬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和蛋氨酸浓度仍然几乎恒定的同期哺乳。另一方面,谷氨酸的浓度,脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸增加早期哺乳期间(42]。

引用

全球技术峰会