抗菌活动和生物活性代谢物从海洋藻类Valoniopsis粗丝和海藻swartzii

文摘

海洋macroalgae作为海洋天然产物的主要来源。存在进行研究调查潜在的生物活性代谢物在海洋藻类Valoniopsis粗丝和海藻swartzii检测它抗菌属性。使用的植物化学成分的生物活性代谢产物筛选分析,紫外,红外光谱和高效液相色谱法分析。抗菌活性测试等五个不同菌株金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,大肠杆菌,克雷伯氏菌pnuemoniae和枯草芽孢杆菌琼脂纸片扩散法。抗真菌活性检测等各种生物的黑曲霉和青霉素青霉素使用琼脂扩散法。生物活性代谢产物的存在如萜类、黄酮类化合物被检测到。这些结果表明,Valoniopsis粗丝和海藻swartzii可以用于海洋衍生药物的发展。

关键字

Valoniopsis粗丝;海藻swartzii;紫外线;红外光谱;高效液相色谱法

介绍

海藻一直基于色素分为三类即棕色,红色和绿色的藻类。当时称为褐藻、红藻科、绿藻类(1]。海藻含有丰富的各种生物活性天然产物的来源,所以它一直作为潜在的杀生的和药品代理(2]。cholorophyceae藻类有最高的抗菌活性对革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物(3]。海藻被认为产生次生代谢物,具有广谱生物活性,如抗菌和抗真菌的活动4]。食用海藻kappaphycus物种(红藻)和扇藻(褐藻)来自Tamilnadu海岸。它们含有大量的蛋白质、维生素和矿物质人体营养所必需的(5]。的抗病毒活动的硫酸摘要研究从海藻中提取的latifolium发现含有高分子量化合物(6]。

宏观藻类褐藻纲(scytosiphongracilis)数量的蛋白质含量高,是蛋白质组学研究中使用7]。众所周知,海藻含有活性抗氧化分子,如抗坏血酸盐和谷胱甘肽(GSH)。然后二次代谢物包括类胡萝卜素α-和β-carotene,墨角藻黄素,虾青素,mycosporine像氨基酸(mycosporine-glycin)和cateehins(如。没食子酸、儿茶素、epigallocateechin酯,phlorotamins(如。、间苯三酚)echol和生育酚(8]。红藻类尤其是许多物种属laurencia(订单ceramiales和家庭松节藻科)被认为是次级代谢物的丰富来源。诱导的细胞毒性活性化合物从海洋藻类多酮类化合物等,获得包含化合物和多糖(萜烯、氮9]。摘要研究褐藻硫酸多糖,显示对大肠癌的生长抑制行动(10]。摘要研究发现在Fucucvesicuclosus化合物主要包括L-fucose和硫酸以及少量的D-galactose D-manose, D-xylose和糖醛酸。它有能力诱导细胞的凋亡进程(11]。低分子量的抗氧化和hepato保护性活动从植物japoneia硫酸多糖。中标识的化合物岩藻黄质和phlorotannins海藻fisellamanianum也发现一个有效的具有抗氧化化合物(12]。二十四有机元素获得6个海洋藻类,如Lystoseriacompressa、Cystoseriacrinitia Cystoseriasedoctes、Gelidiumlatifolium Dictyopterismembranaceae Halurusequisetifolius来自Tunsian Mediterrancan沿海地区,表现出抗菌活性对四种细菌菌株,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和微球菌危害。氯甲酸和乙酸乙酯提取获得Cystoseria critina和Cystoserium sedoides显示高抗真菌活性对念珠菌属菌株(13]。

材料和方法

收集和海藻的识别

两个不同的海藻期间收集的样本低潮汐条件从Rastagod区域1到3米深的海底,Tamilnadu Kanyakumari区。收集到的样本都被转移到实验室和分类学位置被确定。藻样本附生植物和外来杂质,清洗和坏死的部分被删除。植物用海水洗净,然后在淡水。样本与无菌蒸馏水冲洗,阴影干,切成小块和粉机磨床

准备的提取

海藻干燥后称重,然后切碎。海藻提取物是由使用直接提取方法。样本称重和溶解在甲醇。这是在室温下保存24小时定期和混合。24小时后溶解样品过滤使用绘画纸滤纸为进一步使用和存储。

植物化学的筛查的海藻提取物

一)检测的碳水化合物:0.5毫升的滤液0.5毫升的本笃试剂是补充道。混合物在沸水浴加热2分钟后观察,红色的沉淀形成特征(本笃十六世的测试)。

b)蛋白质和氨基酸的检测:提取(100毫克)溶解在10毫升蒸馏水,透过绘画纸。1滤纸和滤液受到测试蛋白质和氨基酸。2毫升的滤液,几滴米隆试剂添加和观察白色沉淀(米隆测试)。

萜类化合物的c)检测:Salkowski测试:5毫升每提取混合2毫升氯仿和浓硫酸添加形成一层然后观察红棕色颜色的接口。

d)检测酚类化合物:提取(50毫克)溶解在5毫升蒸馏水。中性的几滴氯化铁溶液添加和观察到的深绿色颜色。

心苷e)测试:Keller-Killani测试:5毫升每个提取处理2毫升的冰醋酸包含1滴氯化铁溶液。这是添加1毫升的浓硫酸。一个棕色环接口的表示deoxysugar强心甾的特征。紫色戒指可能会出现下面的棕色环而乙酸层绿色戒指可能形式逐渐在薄层。

类黄酮的f)检测:5毫升的稀氨水的一部分每个藻中提取的水滤液加入浓硫酸紧随其后。这是观察一个黄色的颜色。站在黄颜色消失了。

g)皂苷的检测:两克的样本粉煮20毫升蒸馏水的水浴和过滤。10毫升的滤液混合5毫升蒸馏水和动摇一个稳定持续的泡沫。起泡是混合3滴橄榄油和大力动摇了,然后观察乳液的形成。

植物甾醇的h)检测:提取(50毫克)溶解在乙酸酐2毫升。这个1或2滴浓硫酸慢慢添加沿管的两边和观察一个颜色数组

我)检测类固醇:2毫升的乙酸酐加入0.5 g methanolic提取每个样品2毫升的硫酸,这是观察颜色变化从紫色到蓝色或绿色的一些样品。

j)检测生物碱:滤液制备无溶剂提取(50毫克)搅拌2毫升的稀盐酸和过滤。1毫升的滤液一滴Mayer试剂添加管的一侧,然后观察白色奶油沉淀。

抗菌活性

的琼脂纸片扩散法后抗菌感受性测试。6毫米盘与各种浸渍浓度,如20μl 40μl 60μl methanolic提取和光盘放在无菌穆勒辛顿琼脂板上。板块在35°C - 28人力资源和孵化抑制区测量光盘。控制与溶剂单独维护(14]。抗菌活性测试等五个不同菌株金黄色葡萄球菌,Pseudomonas绿脓杆菌,大肠杆菌,克雷伯氏菌pnuemoniae,枯草芽孢杆菌。菌株在无菌琼脂擦洗和光盘被放置。

抗真菌活性

的抗真菌活动是由标准的琼脂扩散法(15]。佩特里板块由浇注20毫升的马铃薯葡萄糖琼脂和允许固化使用敏感性测试Aspergilus尼日尔,青霉素霉。盘子是干和0.1毫升的标准化培养液悬挂打翻了。削减在6毫米直径。添加不同浓度提取车牌后孵化在28°C 48小时。

UV-Analysis

紫外可见光谱分析是通过使用uv - 1700系列岛津制作所完成的。波长的吸光度拍摄范围从170纳米到检测的化合物存在于藻类粗提取物。

红外光谱分析

样品的红外光谱分析进行对海洋藻类提取物(1毫克)是在一个光滑的搅拌砂浆和彻底干溴化钾和2.5毫克(KBr)使用杵。粉中弥漫的micro-cup 2毫米内直径获得复制样品的漫反射红外光谱。所有的红外光谱被记录在室温下(26°C或10°C)中红外范围(40000.400厘米¹)使用傅立叶变换红外光谱的处方,Forier变换红外光谱仪(美国PerkinElmer)。通常,20扫描signal-averaged单个光谱。每个光谱显示的吸光度计算从reflectance-absorbance频谱使用Hyper-IR软件。

高效液相色谱分析

原油提取被高效液相色谱量化岛津制作所,LC-10 VP系列机器从1.5毫升的原油提取保存HPLG CQUANTIFICATION, 200μl转会瓶和溶剂被速度vacccum浓度。获得的残留于500年解散μl乙腈:水1:1 + 0.5% trifluroacetic酸和10μl由汽车采样注入高效液相色谱法。最后的化合物进行分析的基础上,保留时间。

结果

表1即显示了海藻的植物化学的分析Valoniopsis粗线期和海藻swartzii。它代表了不同的植物化学物质的存在如胺基酸、蛋白质、类固醇,植物甾醇,皂甙,caridacglucosides,萜类化合物,黄酮类化合物,碳水化合物,生物碱在藻类(表1)。

板1 - 5显示的抗菌活性海洋藻类如Valoniopsis粗线期提取物对人类病原体大肠杆菌、葡萄球菌、杆菌substilis、Pseudomonos克雷伯氏菌。浓度的提取测定20μl 40μl 60μl。抑制最大的区域被发现Psedomonas和克雷伯氏菌7毫米60μl并在60μl直径8毫米。最小直径区3毫米在60μl葡萄球菌,芽孢杆菌和大肠杆菌(图1)。

板6 - 10显示海洋藻类等的抗菌活性海藻swartzii提取物对人类病原体大肠杆菌、葡萄球菌、克雷伯氏菌、芽孢杆菌substilis, Pseudomonos显示最大的抑制区。最大的抑制芽孢杆菌中发现了60μl 6毫米直径和最低抑制浓度在葡萄球菌60μl视为2毫米直径(图2)。

11 - 12显示板的抗真菌活性海洋藻类如Valoniopsis粗丝提取黑曲霉和点青霉(图3)。

板13 - 14日显示海洋藻类等的抗真菌活性海藻swartzii对黑曲霉和点青霉(图4)。

图5显示了紫外分析methanolic海藻提取物Valoniopsis粗线期它表示波长范围从600年190λλ。

图6代表了紫外分析methanolic提取的海藻Valoniopsis粗线期。它表示波长范围从660年190λλ。因此它表明海洋中甾醇类等有机化合物,生物碱、萜类化合物和各种蛋白存在

图7雷竞技苹果下载综述了海藻的傅立叶变换红外光谱Valoniopsis粗线期。这是测量在400 - 4000海里。不同波长的最大吸光度测定。

海洋藻类的傅立叶变换红外光谱海藻swartzii所示的是图8。这是观察到各种脂肪族和芳香族化合物。

图9分析的高效液相色谱法分析海洋化合物来自海洋藻类Valoniopsis粗丝。最高峰表示活性化合物的存在类固醇和生物碱的保留时间为1.947和2.790Valoniopsis粗丝。

图10海洋藻类的高效液相色谱分析。最高峰表示活性化合物的存在如类黄酮、萜类化合物的保留时间为1.963和2.130海藻swartzii

讨论

藻类提取物比克更有效对抗革兰氏染色(+)(-)细菌,由于更复杂结构在克(-)细菌的细胞壁(16]。在目前的提取工作Valonopsis粗线期和海藻swartzii表现出抗真菌和抗菌活性。海藻如Acrosiphonia胶和Stocheospermum marginatum从印度洋表现出对抗菌活性革兰氏阳性和革兰氏阴性微生物(17]。萜类化合物,类黄酮、植物固醇、类固醇的藻类Valonopsis粗线期和海藻swartzii可以诱导抗菌性对革兰氏阳性和革兰氏阴性的生物。海藻vulgare显示抗菌活性的甲醇提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄aereus [18]。高浓度的酚类化合物被认为褐藻taxiformis和美国vulgare [19]。同样的海洋藻类Valonopsis粗线期和海藻swartzii富含酚类化合物。藻类Laurencia okamurae, Grateloupia elliptica、海藻thunbergii Gloiopeltis furcata,和Hizikia梭杆菌属,作为强有力的抑制剂的生产促炎症介质如一氧化氮(NO)、前列腺素E2 (PGE2)、白细胞介素- 6 (il - 6)、肿瘤坏死factor-α(TNF-α)[20.]。Fucan是一个含有相当比例的L-fucose和多糖硫酸酯组(21]。海藻filipendula Heterofucans显示抗增殖活动对海拉,生物和HepG2细胞。红色的酒精提取海藻Acanthophora spicifera已经发现抑制肿瘤在小鼠模型22]。methanolic提取的Valonopsis粗线期和海藻swartzii显示巨大的抗真菌的活动对黑曲霉和青霉等真菌菌株。各种有机和水提取物Skeletonema costatum积极与不同种类的吗Skeletonema costatum,克雷伯氏菌,和变形杆菌属寻常的(23]。的抗菌活性Arthrospira最大值使用不同浓度的水和methanolic提取物,它是反对变形杆菌属寻常的,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌,大肠杆菌和白色念珠菌(24]。体外和体内甲醇提取物的抗真菌活性g . changii对系统性念珠菌病。的影响Gracilaria changii进行了研究假丝酵母白色的(25]。巴西东北海岸有各种各样的海藻生物活性潜力(26]。一些药理进行调查以确定新药。的抗氧化、抗炎和抗增殖活动的有机分数Cystoseira sedoides分析了从突尼斯海岸(27]。本研究证明了海洋藻类Valonopsis粗线期和海藻swartzii显示抗菌活动由于提取各种生物活性代谢物的可用性。各种化合物如生物碱的存在,类黄酮萜类化合物,表明它可以用作天然产物药理活性。

结论

海藻是海洋生态系统的有价值的来源。海洋藻类作为生物活性代谢产物的来源产生广泛的抗菌潜力。海藻的植物化学的分析评估各种次生代谢产物的存在如酚类、萜类、皂苷、蛋白质、类固醇、碳水化合物等多种生物活性代谢产物的存在被发现通过使用紫外,红外光谱和高效液相色谱分析。从研究证实Valonopsis粗线期和海藻swartzii藻类可用于药物的发展。

确认

作者的记者和校长感谢Ayya Nadar Janaki安马尔学院Sivakasi, Tamilnadu提供设施和感激地承认

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