研究和评论:农业和盟军雷竞技苹果下载科学杂志》上
菜单ISSN: E 2347 - 226 x, P 2319 - 9857
ISSN: E 2347 - 226 x, P 2319 - 9857
1微生物学、动力学Gujral旁遮普科技大学,Jalandhar,印度
收到日期:08/12/2021;接受日期:22/12/2021;发表日期:29/12/2021
访问更多的相关文章lol滚球 雷竞技
细菌素产生金黄色葡萄球菌菌株被隔绝皮肤拭子的健康和传染性的病人。细胞自由浮层(CFS)文化是收获的进一步调查。当时纯化和分析对病原微生物的情感作用。使用标准产生的细菌素是adsorption-desorption法和高效液相色谱纯化。发现产生细菌素的抗菌活性与不同的菌株。找到产生细菌素的有效预防食源性病原体。使用细菌素的研究结论可能对食品保存以及食物生活的延伸。
细菌素;生物杀虫剂;金黄色葡萄球菌;抑制区;上层清液
细菌素是细菌肽或蛋白质合成核糖体和对其他微生物或密切相关的物种表现出抗菌活性[1]。这些抗菌肽是丰富的,有巨大的多样性,并显示变量的生化特性,不同的分子量,氨基酸序列,和行动机制[2]。可用营养环境中引发细菌素生产的微生物由于竞争空间和营养。两种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,会产生细菌素。
在考虑细菌素的特性,观察到这些抗菌肽是有效的治疗药物限制病原微生物的生长,包括耐药病原体[3]。根据作用机理问题,细菌素显示影响基因表达,蛋白质生产以及微生物的细胞壁。发现其中的一些肽由于其酶的行动是有效的。细菌素的形成导致渠道的目标细菌的细胞膜,进一步导致低分子量离子从细胞释放,导致质子动力的崩溃。
细菌素是观察到为减少阻力发展一个有效的解决方案。然而,这些观察到的高潜力与临床相关病原体[4]。细菌素可以很容易地生物工程相比,抗生素可以操纵这些结合在细胞膜外的任何地方,因为他们不表现出特定的受体。最终,这些生物技术导致开发新方法的研究,帮助生产最新的治疗策略有非常重要的应用。除了它之外,强烈建议的改进食品质量通过合并在食物的比例或通过添加发酵食品中的文化[5]。这些肽已经广泛应用于乳制品、肉制品、水果和蔬菜。在最近的研究中,金黄色葡萄球菌产生的细菌素的抗菌活性与一些食物和临床病原体检查。此外,细菌素的最小抑制浓度也被报道。
材料和方法
分离和鉴定金黄色葡萄球菌
葡萄球菌aureu年代应变隔离来自55个皮肤样品使用选择性的媒体:甘露醇盐琼脂和burgey手册后确定。DNase试验和凝固酶试验进行物种的进一步证实。
文化上层清液的制备
细菌素的生产,24小时在一夜之间文化的金黄色葡萄球菌和离心机在10000转10分钟在4°C。上层清液收集,作为原油细菌素。
细菌素测定
细菌素的抗菌活性检测到spot-on-lawn方法以及琼脂扩散法。为分析,穆勒辛顿琼脂(尼古拉斯)板块准备和接种大肠杆菌的指标压力。之后,文化上层清液(20μl)被添加到井尼古拉斯盘子然后盘子孵化24小时37°C [6]。检查井周围区域的抑制执行完成后的孵化和表达的抗菌活性是毫米(mm)的细菌素的抗菌活性菌株大肠杆菌写明ATCC®8739™采购从美国文化集合类型。
净化,高效液相色谱法(HPLC)
高效液相色谱法分离起着至关重要的作用,量化各种组件的液体样品。纯化的细菌素,乙腈作为流动相使用乙腈和0.1%三氟乙酸(组织)的高效液相色谱级水[7]。C-18列用于样本加载和分离是由一个线性两相的梯度20%到80%的乙腈超过30分钟的流量0.5毫升/分钟。
生产的吸附和解吸
pH值依赖的吸附和解吸方法用于细菌素的生产。重点是细菌素的吸附过程生产者在神经细胞酸碱及其释放低[8]。最初,文化金黄色葡萄球菌接种在脑心浸液肉汤(BHIB) 37°C和培养48小时。当时获得的文化肉汤在沸水浴加热,然后允许冷却。后来,文化肉汤的pH值被设置为6.5,继续搅拌过夜。提取的细胞是由在9000转离心20分钟[9]。和5毫米钠磷酸盐缓冲剂(pH值6.5)被用来洗球两次,小球re-suspended在5% (v / v)磷酸,10毫升100毫米氯化钠溶液的pH值1.5的调整。然后暂停了一夜之间和细胞被离心收获的9000 rpm 30分钟和存储在-20°C。
细菌素的抗菌活性
证实了细菌素的活性扩散试验显示抑制菌株对不同指标。指示菌株用于检查细菌素的活动大肠杆菌写明ATCC®8739™,肺炎链球菌写明ATCC®49619™、明串珠菌属mesenteroidesATCC®8293™,克雷伯氏菌aerogenes写明ATCC®13048™,写明ATCC®19111™,单核细胞增多性李斯特氏菌铜绿假单胞菌写明ATCC®9027™,粪肠球菌写明ATCC®29212™,写明ATCC®10876™蜡样芽胞杆菌、沙门氏菌entericaATCC®14028™。板材的考试是为了检查井周围的抑制区发现后24小时。不同菌株产生的抑制区比较互相检查细菌素的影响。
穆勒辛顿琼脂(尼古拉斯)媒体准备和热压处理过的灭菌。尼古拉斯盘子是由消毒媒体倒进盘子苦行地。指示菌株接种的扩散板技术和盘子被贴上正确的[10]。的帮助下穿刺,井被创建到盘子。原油的细菌素是添加到每个。板块在37°C孵化24小时[11]。孵化完成后,一个明确的抑制区被观察到。
结果与讨论
的培养金黄色葡萄球菌
总55收集样本,29日板观察不同类型的殖民地在营养琼脂,这进一步接种到选择性媒体甘露醇盐琼脂获得纯培养[12]。甘露醇发酵在17盘,把红色的媒体变成黄色和黄金色的殖民地进一步进行识别。
原油生产细菌素和细菌素的检测活动
浮在表面的游离(CFS)从48小时古老文化中提取分离菌株的离心10,000 rpm 45分钟在4°C。琼脂扩散法是用来检查CFS的抗菌活性与应变指标大肠杆菌。17的文化,5分离表现出明显的抑制区从16毫米到28毫米对指标[13]。隔离4显示一个明显高于抑制区(28毫米)其次是隔离5(22毫米)和隔离1(18毫米)。隔离2和隔离3显示最低抑制区(16毫米)(表1和图1)。
表1。细菌素的活动对大肠杆菌。
| 美国没有。 | 样品没有。 | 大肠杆菌。 |
|---|---|---|
| 抑制区(毫米) | ||
| 1 | S-7 | 18±0.2 |
| 2 | s - 21 | 16±0.5 |
| 3 | S-23 | 16±0.3 |
| 4 | S-36 | 28±0.4 |
| 5 | S-42 | 22±0.5 |
图1:细菌素对大肠杆菌活动。
细菌素的纯化
高效液相色谱法(HPLC)被用来净化细菌素,它给了一个高峰在5分钟的时间间隔的强度在280 nm的吸光度(图2)。
图2:显示出纯化细菌素的高效液相色谱曲线。
对不同微生物的抗菌活性
此外,评估了5的上层清液分离游离的抗菌活性菌株对不同指标等大肠杆菌写明ATCC®8739™,肺炎链球菌写明ATCC®49619™、明串珠菌属mesenteroides写明ATCC®8293™,克雷伯氏菌aerogenes写明ATCC®13048™,写明ATCC®19111™,单核细胞增多性李斯特氏菌铜绿假单胞菌写明ATCC®9027™,粪肠球菌写明ATCC®29212™,写明ATCC®10876™蜡样芽胞杆菌、沙门氏菌entericaATCC®14028™。抑制区表示隔离4显示活动对所有指标压力要明显高于其他四个隔离(表2和图3,4)。
表2。细菌素活性菌株对不同指标。
| 指标压力 | 隔离1 | 隔离2 | 隔离3 | 隔离4 | 隔离5 | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 大肠杆菌写明ATCC®8739™ | 27 | 22 | 31日 | 35 | 32 |
| 2 | 肺炎链球菌写明ATCC®49619™ | 22 | 28 | 29日 | 40 | 29日 |
| 3 | Leuconostocmesenteroides写明ATCC®8293™ | - - - - - - | 26 | 25 | 28 | - - - - - - |
| 4 | 克雷伯氏菌aerogenes写明ATCC®13048™ | - - - - - - | 19 | 24 | 34 | - - - - - - |
| 5 | 单核细胞增多性李斯特氏菌 | - - - - - - | - - - - - - | 28 | 31日 | 32 |
| 写明ATCC®19111™ | ||||||
| 6 | 铜绿假单胞菌 | - - - - - - | - - - - - - | 25 | 27 | - - - - - - |
| 写明ATCC®9027™ | ||||||
| 7 | 粪肠球菌 | - - - - - - | 24 | - - - - - - | 28 | 25 |
| 写明ATCC®29212™ | ||||||
| 8 | 蜡样芽胞杆菌写明ATCC®10876™ | 22 | 28 | 25 | 34 | - - - - - - |
| 9 | 沙门氏菌entericaATCC®14028™ | 20. | 24 | 30. | 29日 | 24 |
| 的意思是 | 10.11 | 19 | 24.11 | 31.78 | 15.78 | |
| 圣开发。 | 12.13 | 11.14 | 9.39 | 4.29 | 15.21 |
图3:抗菌活性的细胞自由上层清液对不同指标。
图4:细菌素活性菌株对不同指标。
分析最低抑制浓度的细菌素
纯化细菌素的最小抑制浓度检测使用琼脂扩散法[14]。不同的指标压力和最低有效浓度被发现使用20μl (表3和图5、6所示)。
表3。最低抑制浓度产生细菌素菌株对不同指标。
| 细菌素(μl) | 大肠杆菌写明ATCC®8739™ | 肺炎链球菌写明ATCC®49619™ | 单核细胞增多性李斯特氏菌写明ATCC®19111™ | 铜绿假单胞菌写明ATCC®9027™ | LeuconostocmesenteroidesATCC®8293™ | 粪肠球菌写明ATCC®29212™ | 克雷伯氏菌aerogenes写明ATCC®13048™ | 蜡样芽胞杆菌写明ATCC®10876™ | 沙门氏菌血清®ATCC14028™ | 的意思是 | Std.开发。 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 10 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| 20. | 5 | 2 | 0 | 2 | 0 | 3 | 0 | 5 | 0 | 1.89 | 2.09 |
| 30. | 8 | 2 | 2 | 4 | 5 | 5 | 6 | 7 | 7 | 5.11 | 2.15 |
| 40 | 12 | 4 | 6 | 7 | 7 | 6 | 8 | 10 | 9 | 7.67 | 2.4 |
| 50 | 16 | 10 | 8 | 9 | 9 | 9 | 8 | 12 | 10 | 10.11 | 2.52 |
| 60 | 19 | 15 | 12 | 10 | 15 | 10 | 11 | 15 | 13 | 13.33 | 2.96 |
| 70年 | 21 | 18 | 14 | 13 | 17 | 17 | 11 | 17 | 18 | 16.22 | 3.03 |
| 80年 | 23 | 22 | 18 | 19 | 18 | 18 | 16 | 18 | 19 | 19 | 2.18 |
| 90年 | 30. | 26 | 27 | 26 | 24 | 26 | 25 | 24 | 26 | 26 | 1.8 |
| One hundred. | 32 | 26 | 28 | 26 | 28 | 28 | 30. | 26 | 26 | 27.78 | 2.11 |
图5:最低抑制浓度产生细菌素菌株对不同指标。
图6:最低抑制浓度的细菌素抑制区所示。
从乳杆菌细菌素提取zrx03发现有效预防食源性细菌类似于我们观察发现细菌素是对致病性菌株有效[15]。另一个调查显示,乳酸菌和双歧杆菌细胞自由浮层显示抗菌活性菌株通过琼脂扩散法对不同指标由于细菌素等物质[16]。研究还显示Pediococcuspentosaceus加快18产生抗菌和抗真菌Bacteriocin-Like抑制性物质(bli)抑制腐败细菌的生长和潜在杀死在低浓度有害微生物。的解释是完全在我们的研究揭示了细菌素的有效性最低浓度。
基于给出的结果,得出的结论是,细菌素的提取金黄色葡萄球菌表现出不同的光谱对病原微生物的抗菌活性。它显示了显著的有效性较低浓度。它也是从我们的研究得出结论,金黄色葡萄球菌产生的细菌素对食源性病原体更有效。进一步的研究研究属性、结构和作用方式的细菌素是必需的,尤其是对于评估潜在的用于细菌性疾病的生物防除和作为抗生素的替代品。
作者想表达谢意Onisome医疗分公司。莫哈里(协助分析样品的高效液相色谱法。作者想要感谢反向Gujral旁遮普科技大学,Jalandhar提供我机会做研究工作。