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整叶holoptelia树皮甲醇提取物抑菌活性测定

Banshidhar Behera、迪玛拉·亚达夫和马赫什·钱德拉·夏尔马

印度拉贾斯坦邦斋浦尔阿米尔路,Madhav Vilas宫,阿育吠陀国家研究所- 302002

*通讯作者:
Banshidhar Behera
印度哈里亚纳邦罗塔克- 124001,高尔·婆罗门阿育迪克学院DravyaGuna系

收到日期:15/02/2013接受日期:06/03/2013

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摘要

目前,人们对植物杀菌剂越来越感兴趣,因为有必要找到更安全的杀菌剂,并需要防止环境退化。龙柏树皮甲醇提取物。对化脓性链球菌MTCC No.1928、金黄色葡萄球菌MTCC No. 3160、大肠杆菌MTCC No. 901、铜绿假单胞菌MTCC No. 424、伤寒沙门氏菌MTCC No. 733进行抑菌活性测定。采用琼脂孔扩散法计算抑菌区。

关键字

整叶天竺葵,抗菌活性,抑制区。

简介

从最早的时候起,草药就因其缓解疼痛和治愈的能力而受到重视,今天我们仍然在75%的药物中依赖植物的疗效。在印度传统医学阿育吠陀中,大约有2000种植物被认为具有药用价值。据估计,从几英寸到参天大树,大约有7万种植物被用于药用。

植物在生产对人类大有益处的新药方面具有巨大潜力。在高等植物中寻找新的生物活性原理的途径有很多。耐多药细菌菌株的日益流行和最近出现的对抗生素敏感性降低的菌株引起了对无法治疗的细菌感染的担忧,并增加了寻找新的抗感染策略的紧迫性。

在阿育吠陀医学系统中,大量的植物被用于治疗细菌起源的疾病,其中一些已经取得了良好的效果,但这些植物的治疗潜力的科学调查和信息有限。因此,对它们进行系统筛选可能会发现新的有效化合物[3]。在此背景下,本研究对整叶holoptela integralfolia树皮甲醇提取物的抑菌活性进行了评价。

基于上述观点,在参考Bhavaprakash Nighantu的Guduchyadi varga文献的基础上,对植物“Holoptelea integrifolia”(CHIRBILWA)进行了抑菌活性研究。它也被认为是Karanja的品种之一。它是一种大型落叶乔木,15-18米高,分布在印度大部分地区,花为黄绿色,有种子的浅棕色带翼的果实属于Ulmaceae家族,有Tikta, Kasaya rasa, Laghu, ruksha guna, Ushna Virya和katu vipak。在Charak Samhita的Lekhaniya Mahakasaya & Bhedaniya Mahakasaya和Sushruta Samhita的Varunadi Gana中描述。它是有用的胆痛,肠虫,丝虫病,痔疮,痘,白癜风[4],也在伤口愈合[5]。

材料与方法

植物材料

1月份从斋浦尔阿育吠陀国家研究所校园收集了Holoptelea integrifolia主干的新鲜树皮。植物材料经M.C. Sharma教授鉴定和鉴定。斋浦尔(拉贾斯坦邦)国家阿育吠陀研究所的Davya Guna。收集植物材料后,把它们切成小块,在阴凉处晾干。

提取物的制备

对于植物材料的水萃取,使用了who(药用植物材料质量控制方法)推荐的“热萃取法”。将30克遮荫干燥的整叶Holoptelea浸渍材料加入300毫升甲醇中,放入有玻璃塞子的圆底烧瓶中。然后将混合物捣碎,静置1小时。然后将回流冷凝器连接到烧瓶上,用文火煮1小时,冷却,捣碎,用干的whatman滤纸过滤。然后将滤液倒入无菌烧杯中,在60°C的水浴中蒸发至干燥。在干燥器中冷却30分钟,立即称重,提取值为22.35%。这残余是棕色的,并转移到一个无水分的试管,并使其气密的手段软木塞。

微生物

用于本研究的微生物来自印度昌迪加尔的微生物技术研究所(IMTECH),并在4°C的条件下保持在以下培养基上,如下表所示:

microbiology-biotechnology-Microorganisms-IMTECH-Chandigarh

表1:根据昌迪加尔的IMTECH,微生物及其代码编号

微生物培养与接种的复兴

像所有其他生命形式一样,微生物的生长需要适当的营养和有利的环境。获得细菌的一个简单方法是在试管或小烧瓶中培养。

从IMTECH采购的培养物处于冷冻干燥状态(即处于休眠状态)。因此,他们的复兴是必要的。为此,制作250 ml营养肉汤培养基,并转移到5个小锥形烧瓶中(数量为100ml),每个50ml。由于我们的实验室研究是处理含有单一微生物物种的纯培养物,因此肉汤培养基的灭菌成为强制性的。烧瓶盖上棉花塞,在121ºC下以每平方英寸15磅压力蒸压20分钟。当烧瓶温度达到室温左右时,无菌地在一个烧瓶中加入无菌人血(5%即2.5 ml)。将含有休眠期细菌的玻璃管打碎,将0.5 ml以上营养液转入破碎管中充分混合。从其中取出50微升,与相关烧瓶混合,并用棉塞盖上。1928年,对于细菌,同样的过程适用于含有血液的肉汤的烧瓶。

再次用铝箔盖住烧瓶口,在37℃、200 rpm的培养箱中静置24小时。24小时后,每个烧瓶中的浑浊度确认培养物的生长,并将其放入冰箱中进一步使用。

抗菌试验

采用琼脂孔扩散法[6]进行抑菌试验

在圆盘中加入100 μl的测试化合物,使其饱和,晾干。琼脂孔扩散法在平板上制备直径为8mm的孔。取100 μl提取液注入孔中。37℃孵育24小时。然后观察是否存在抑制带。

抑制区测量

图像

在天平的帮助下,井周围的细菌生长抑制区以毫米为单位测量。读数分别在4个不同的平面上进行,如图所示:

然后计算四个读数的平均值。

结果与观察

结果基于Arora和Bhardwaj于1997年开发的量表。抑制区及药敏结果描述如下。

microbiology-biotechnology-Inhibition-drug-sensitivity

表2:抑制区与药敏区之间的关系

microbiology-biotechnology-methanolic-extract-bark

表3:树皮甲醇提取物的抑菌区Holoptelea integrifolia

酿脓链球菌(1928):整叶Holoptelea integrifolia树皮的甲醇提取物在50mg、75mg和100mg剂量水平下表现不敏感。

金黄色葡萄球菌(3160):整叶Holoptelea integrifolia树皮甲醇提取物在50mg、75mg剂量水平下表现为中等敏感性,在100mg剂量水平下表现为高敏感性。

大肠杆菌(901):整叶holoptela integral folia树皮甲醇提取物在50mg、75 mg和100mg剂量水平下表现出高度敏感性。

铜绿假单胞菌(424):整叶Holoptelea integrifolia树皮甲醇提取物在50mg、75 mg剂量水平下敏感性较低,在100mg剂量水平下敏感性中等。

伤寒沙门氏菌(733):整叶Holoptelea integrifolia树皮甲醇提取物在50mg、75mg剂量水平下表现为中等敏感性,在100mg剂量水平下表现为高敏感性。

抑制区:

结果最显著的抑制区

图像

讨论

根据阿育吠陀的观点,可能的行动方式

根据阿育吠陀,tikta rasa的属性是Krimighna, Deepana, Pachana, Kapha sosana等[8]。

•由于药物有tikta rasa,所以它直接作用于克里米斯并杀死他们。

•其次,大多数内部克里米斯是由痰(kapha)形成的,作为含有Tikta和Kasaya Rasa, Laghu和Ruksha Guna,在Vipak的Ushna Virya和Katu的药物,它安抚了kapha,抑制了克里米斯的进一步形成。

•第三,当我们食用不适当的食物时,由于消化不当而产生Ama rasa,它损害了rakta、kapha和krimis的产生。由于抖音具有深盘和厚盘的特性,它维持消化的适当,防止阿玛的形成,从而防止克里米斯的形成。

根据现代观点,可能的行动方式

•先前的研究工作告诉我们,植物次生代谢产物,如萜烯、单宁、皂苷、酚类化合物具有抗菌活性[9,10,11,12]。由于这种实验植物含有相同的活性成分[13],所以它可能是抗菌活性的原因。然而,还需要进一步的研究来了解哪个成分是最重要的。

•本实验研究仅表明不同浓度的植物提取物对微生物有效,由于本实验没有采用标准比较剂,因此需要进一步研究其与环丙沙星、罗红霉素等标准抗微生物剂的有效程度。

•所有实验均采用井法进行;因此,用圆盘扩散法探讨其抑菌活性还需进一步分析。

确认

作者感谢斋浦尔Birla科学研究所的V.K.Nigam博士(Scientiest)进行了抗菌试验。

参考文献

全球科技峰会