和评论:生药学和植物化雷竞技苹果下载学》杂志上的研究表明
菜单e-ISSN: 2321 - 6182 p-ISSN: 2347 - 2332
e-ISSN: 2321 - 6182 p-ISSN: 2347 - 2332
收到日期:20/06/2016;接受日期:27/09/2016发表日期:07/10/2016
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荣耀颂superba是一种生物碱植物含有大量的生物碱成分如秋水仙碱和gloriosine。这项研究涉及到对Hep-G2抗癌检查细胞(人类肝癌细胞)使用植物化学的从g . superba块茎中提取得到。g . superba块茎是识别和收集。收集到的样本是阴凉干燥,被磨碎。粉末样品之后为溶剂萃取装置使用索氏23周期48 h在相应的温度使用的溶剂。用于拔牙的溶剂是甲醇,水和石油醚。植物化学的定性分析。定量分析之后到特定的植物化学物质如皂苷、生物碱已经从先前的文献中提到的抗癌特性研究。分析了溶剂由DPPH试验进行抗氧化活性。从每个溶剂methanolic提取抗氧化剂财产的价值更高。抗氧化剂属性最高的溶剂之前对Hep-G2抗癌测试细胞MTT试验(人类肝癌细胞)。 The cell death percentage of Hep-G2 cells were calculated from cell viability obtained by MTT assay. Triplicate values were obtained. From the triplicate value the mean value was determined to obtain the average value for each concentration 5 μg, 10 μg, 25 μg, 50 μg, 100 μg. The higher concentration of 100 μg has the lower viable rate and 50% inhibition of viability (IC50) was determined graphically. Death rate of cells indicated the cancer inhibition rate which is due to Hep-G2 cells failed to retain the viability. Inhibition rate of 100 μg has the higher inhibition range of 54.3%. Death rate of Hep-G2 cells may be due to various reasons like protein binding, DNA replication interaction, receptor binding inhibitors, etc. this current study shows the G. superba tubers has the potential to inhibit the growth of Hep-G2 cell.
抗氧化、生物碱、细胞毒性、癌症、植物化学物质
植物是天然来源的生物活性化合物来治疗威胁生命的疾病,如心脏疾病和癌症(1]。荣耀颂superba属于百合科多年生草本植物的和是一个著名的物种。它也被称为“莉莉荣耀”。这种植物g . superba林有各种植物化学物质,主要是生物碱如秋水仙碱、gloriosine colchine等等,这意味着它可以用于治疗癌症2,3]。七十五百分比的原料可用于这种植物;到目前为止的部分植物如块茎、叶子、种子和花。这些地区的植物被用于阿育吠陀和Yunani著名医学(4]。g . superba植物有许多药用价值和植物的各个部分是用于治疗疾病5]。植物抗氧化分子形式的植物化学物质,保护细胞免受自由基造成的损害(6]。g . superba包含大量的植物化学物质如生物碱、苷类黄酮和皂苷可以作为抗氧化剂,它可以降低患癌症的风险和改善心脏健康7]。癌症是一组疾病涉及异常细胞生长有可能蔓延到身体的其他部位的入侵细胞(8]。Hep-G2是一个不朽的细胞系,是由人类肝细胞癌。他们可以秘密很多纤溶酶原蛋白物;刺激人类生长激素(9]。癌症是一种致命的疾病;超过100种癌症影响人类。涉及到治疗癌症是如此痛苦的过程化疗和广播疗法。植物化学物质做许多工作在我们的身体。基于他们的工作也可以anti-cancerous代理各种类型的癌症。植物来源从化疗治疗癌症可能会减少痛苦的结果不同1]。的植物化学物质g . superba由荷尔蒙作用,可以作为抗氧化和抗癌酶刺激器、物理作用(细胞内接触)和干扰DNA复制。雷竞技网页版
植物材料的收集
g . superba块茎收集从种植场Ariyalur和泰米尔纳德邦Perambalur区。大约5公斤的块茎由部门负责人收集和验证,米纳克希Ramasamy艺术与科学学院,印度泰米尔纳德邦,。然后块茎粉获得1.4公斤的样品粉末,提取在地中海蔬菜使用索氏仪器实验室,钦奈。
植物提取物的制备
空气干燥装置材料切成小块,在树荫下干了两天,直到它完全干燥。然后它被摧毁成细粉。粉500克的材料用索氏仪器连续萃取进行了使用石油醚、甲醇和水溶剂。提取的解决方案是通过Whattman滤纸过滤。1、集中使用旋转闪蒸器和真空下干燥。
植物化学的分析
植物化学的筛查评估执行不同的原油样品的定性化学成分提取使用普遍采用降水和颜色反应来识别等主要次生代谢物生物碱、类黄酮,配糖体、蛋白质、酚类化合物、皂甙、淀粉,类固醇,丹宁酸和萜类化合物。
植物化学的分析进行了使用标准的程序。的提取g . superba筛选存在次生代谢物的使用程序。观察记录的总淀粉、可溶性蛋白质、类固醇使用类固醇测试、类黄酮和单宁使用信田测试,生物碱Dragendroff的测试中,蛋白质和苷Limbermann的测试,皂苷使用测试,总酚氯化铁测试和还原糖使用本笃的测试。
定量分析
量化生物碱、皂甙可以帮助理解测试抗氧化剂和抗癌。定量分析是生物碱类和皂苷的应用标准程序。
Anti-Scavenging活动
的自由基清除活性溶剂的提取物是由1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazil (DPPH)。抗氧化活性测定。新的管加3毫升的甲醇作为空白。第二管加1毫升的甲醇和3毫升0.1 DPPH。这是控制。其他管添加相应体积的样品和编为1毫升甲醇,最后加上3毫升的0.1毫米DPPH然后漩涡。密封管铝箔和孵化的所有管在黑暗在室温下30分钟。读517海里的吸光度。清除DPPH自由基的能力计算使用以下方程:
DPPH清除效果(%)= [(ABS control-ABS样本)/ (ABS控制)]×100
ABS控制是负吸光度和ABS试样的吸光度反应混合物包含样本提取。
在体外测定细胞毒性活动(MTT试验)
样品的细胞毒性Hep-G2 MTT比色细胞试验。细胞(1×105/)在1毫升的介质/镀在24-well板块(合演康宁,罗彻斯特,纽约)。48小时孵化后,细胞达到融合。然后,这些细胞被孵化的不同浓度的甲醇提取物0.1% DMSO 48 h在37°C。样品溶液,洗涤后的磷酸缓冲盐(pH值7.4),200μl /(5毫克/毫升)的3 - 0.5% (4 5-dimethyl-2-thiazolyl) 2, 5-diphenyl -四唑溴化细胞(MTT)磷酸-缓冲盐溶液是补充道。4 h孵化后,0.04 M盐酸/异丙醇被添加。可行的细胞吸光度测定的570海里。测量和执行所需的浓度50%抑制可行性(IC50决心图形。吸光度的测定了570海里UV-Spectrophotometer使用井没有包含细胞空白样品。
样品的效果在Hep-G2被表示为%的增殖细胞生存能力,使用公式:
%对细胞生存能力= A570 / A570控制细胞×100的结果和讨论
本研究的主要目的是分析潜在的块茎中提取的g . superba为了防止Hep-G2癌细胞通过MTT试验(10]。g . superba是一个生物碱植物含有大量的生物碱成分秋水仙碱和gloriosine。各种植物化学物质除了生物碱化合物萜类化合物糖苷,丹宁酸,苯酚等,也存在于低浓度(4]。这些植物化学物质提取溶剂如甲醇、水和石油醚使用索氏提取方法(11]。定性的分析了植物化学物质(表1)和生物碱和量化皂苷。生物碱量(1.1311克/ 100克)和皂苷(1.7285克/ 100克)获得表2。
| 植物化学的 | 化学测试 | 溶剂 | ||
| 甲醇 | 石油醚 | 水 | ||
| 生物碱 | Dragendroff的测试 | + + | + | + + |
| 类黄酮 | 信田测试 | + | + + | + |
| 配糖体 | 利伯曼测试 | + | + + | + + |
| 皂苷 | 泡沫的测试 | + + | - - - - - - | + + |
| 类固醇 | 类固醇测试 | + + | - - - - - - | - - - - - - |
| 酚类 | 氯化铁测试 | + + | + | - - - - - - |
表1:植物化学物质的定性分析。
| 试验植物化学物质 | 量化值(克/ 100克) | 测试方法 |
| 生物碱 | 1.1311克/ 100克 | Whattman滤纸 |
| 皂苷 | 1.7285克/ 100克 | 索格利特仪器 |
表2:定量分析生物碱、皂甙。
植物化学的定性地分析了在三种不同溶剂提取物(甲醇、石油醚、水)。标准程序之后,各种植物化学物质的存在是被染色和降水。即(“+ +”的存在;' + '微弱;”——“负)。
溶剂提取与DPPH实验后获得的anti-scavenging自由基(12]。水的值(100μl: 41.48%) &(200μl: 65.42%),石油醚(100μl: 46.45%) &(200μl: 58.95%)和甲醇(100μl: 91.04%) &(200μl: 91.75%)得到(表3)。Anti-scavenging不同的提取是决定从吸光度计算获得的OD值在517 nm和计算。
| 提取 | 测试(µl) | 吸光度值(517海里) | anti-scavenging的百分比 |
| 甲醇 | 测试1(100µl) | 0.101 | 91.04% |
| 测试2(200µl) | 0.093 | 91.75% | |
| 石油醚 | 测试1(100µl) | 0.604 | 46.45% |
| 测试2(200µl) | 0.463 | 58.95% | |
| 水 | 测试1(100µl) | 0.66 | 41.48% |
| 测试2(200µl) | 0.39 | 65.42% |
表3:通过DPPH实验Anti-scavenging活动。
methanolic提取有价值更高(100μl: 91.04%) &(200μl: 91.75%)。为防止anti-scavenging是重要因素癌症和心脏病(5]。MTT测试之后使用较高的提取抗氧化值(8]。Hep-G2细胞与不同浓度的MTT测定使用methanolic提取5μg 10μg 25μg, 50μg和100μg。一式三份的价值获得了使用紫外分光光度法分析甲瓒形成(13]。细胞生存能力的百分比计算得到吸收剂使用公式(图1)。
图1:条形图通过DPPH实验anti-scavenging活动。
DPPH实验进行分析antiscavenging溶剂从g . superba块茎中提取的属性。每个溶剂测试有两个100μl /毫升浓度作为测试1,200μl /毫升测试2和条形图绘制从价值观中提到表3。
Hep-G2细胞毒性分析
5-dimethylthiazol-2-yl MTT (3 - (4) 2, 5-diphenyltetrazolium溴)分析,这是一个同质细胞可行性分析工作的原则,甲瓒的形成。甲瓒测量使用UV-spectrophotometer [14]。可行的细胞MTT转换成甲瓒由于其活跃的新陈代谢,生产色作为标记细胞的生存能力的指标。甲瓒晶体是可溶性的吸光度(14]。
Hep-G2是人类肝癌细胞系,在使用在体外研究分析化合物的细胞毒性。在这项研究中Hep-G2细胞用于分析癌症抑制的潜力g . superba块茎提取。较高的植物提取物抗氧化性质被用来分析Hep-G2细胞的细胞毒性试验,抗氧化剂是好癌症阻力。Methanolic提取物抗氧化活性的g . superba拥有更高的价值因此Methanolic提取被用来分析MTT测定不同浓度(10]。
浓度的5、10、25、50、100μg /毫升methanolic样本进行细胞毒性检测活动Hep-G2癌症细胞系(图2)。
图2:微观Hep-G2细胞MTT试验。
g . superba块茎的methanolic提取测试Hep-G2细胞与不同浓度的5、10、25、50、100μg /毫升。细胞的颜色是由于甲瓒晶体的形成。微观,显示不同浓度的细胞死亡。的图2:控制、显示Hep-G2细胞系和图2 f:100μg /毫升显示Hep-G2细胞的抑制率较高。
不同浓度显示一式三份使用紫外分光光度法从吸光度值在570海里。每个浓度的吸光度显示了活细胞率与表示颜色的甲瓒晶体和5μg(0.854, 0.856, 0.85), 10μg(0.739, 0.741, 0.735), 25μg(0.642, 0.645, 0.638), 50μg(0.522, 0.524, 0.52), 100年μg (0.436, 0.438, 0.432)。
然后吸水值计算出总Hep-G2细胞形成各种浓度的可行性。使用标准的公式,总细胞生存能力获得%一式三份值(图3)。
图3:条形图的细胞生存能力和抑制Hep-G2细胞MTT测定IC50图,抑制率%。
条形图是绘制的一式三份中提到细胞生存能力的价值表4。和集成电路进行了测量50图和线性回归曲线绘制Hep-G2抑制细胞的50%,IC50= 19岁,5μg(89.51782, 89.72746, 89.09853), 10μg(77.46331, 77.67296, 77.04403), 25μg(67.2956, 67.61006, 66.87631), 50μg(54.71698, 54.92662, 54.50734), 100年μg(45.70231, 45.91195, 45.28302)得到(表4)。
| 测试浓度(µg /毫升) | 细胞的百分比变化(一式三份价值) | ||
| 5 | 89.518 | 89.727 | 89.099 |
| 10 | 77.463 | 77.673 | 77.044 |
| 25 | 67.296 | 67.61 | 66.876 |
| 50 | 54.717 | 54.9266 | 54.5073 |
| One hundred. | 45.7023 | 45.912 | 45.283 |
| 控制 | One hundred. | - - - - - - | - - - - - - |
表4:细胞生存能力一式三份的价值。
不同浓度显示值使用紫外吸光度-一式三份Spectrophotometery在570纳米。一式三份的比例值从计算得到可行性的标准公式。
细胞生存能力获得了高的低浓度应用,5μg可行的细胞和更高浓度的高100μg可行的低利率。死亡率的细胞显示肿瘤抑制率是由于Hep-G2细胞未能保持生存能力(15]。
平均值(M±SD)一式三份的值5μg(89.4479±0.32022), 10μg(77.3934±0.32023), 25μg(67.2606±0.36812), 50μg(54.7169±0.20964), 100年μg(45.6324±0.32024)进行了测量和所需的浓度50%的抑制能力(IC50= 19.5145±388.9)(19.93%)决心图形。减去活细胞的抑制率计算总控制每个浓度100%(就是)。抑制率5μg(10.5520), 10μg(22.6065), 25μg(32.7393), 50μg(45.2830), 100年μg(54.3675)得到(表5),100年μg越高抑制范围的54.3%。从评价的集成电路50值(19.93%)癌症抑制细胞死亡表示。
| 浓度(µg /毫升) | 平均值的可行性% (M±SD) | 抑制率%(意味着掌控) |
| 5 | 89.44972±0.32022 | 10.552 |
| 10 | 77.39343±0.32023 | 22.607 |
| 25 | 67.26066±0.36812 | 32.78 |
| 50 | 54.71698±0.20964 | 45.283 |
| One hundred. | 45.63243±0.32024 | 54.3676 |
表5:平均值的细胞生存能力和抑制率。
意思是可行性%从一式三份值的平均值;n = 3, M±SD。抑制率%决心从(就是)。
本研究总结了g . superba块茎的信息有可能抑制Hep-G2(人类肝癌细胞)细胞系。
植物是天然来源的生物活性的化合物,可以治疗各种疾病和威胁生命的癌症(1]。的g . superbamethanolic提取显示不同类型的植物成分的存在,有能力对Hep-G2细胞抗氧化和细胞毒性的影响。因此g . superba抑制人类的潜力癌细胞系的生长。
这是一个令人愉快的方面,现在我有机会表达我的感激之情为所有陪同和支持在我论文工作。
作者声明没有金融或商业利益冲突。
