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ISSN: E 2347 - 226 x, P 2319 - 9857

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白僵菌:昆虫病原真菌作为生物杀虫剂Cachar、阿萨姆邦南部

Ankita戴伊1*宝贝,啤酒2

1部门动物学们大学,印度阿萨姆邦

2部门动物学Silchar Gurucharan学院,印度阿萨姆邦

*通讯作者:
Ankita戴伊
部门动物学,
们大学,古瓦哈蒂,阿萨姆邦,
印度
电子邮件:babysingha@gmail.com

收到:30 - 11月- 2021年手稿。jaas - 21 - 48750;Edi tor分配:02 - 12月- 2021 QC前没有。jaas - 21 - 48750 (PQ);综述:16 - 12月- 2021,质量控制。jaas - 21 - 48750;修改后:18 - 3月- 2022年Manuscr ipt没有。JAAS - 21 - 48750 (R);发表:25 - 3月- 2022年Stud.10.3.002 DOI: 10.4172/2347 - 226 x

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文摘

几次产生的土壤富含entomopathogens Cachar区即,昆虫病原线虫(杀虫剂),昆虫病原细菌(EPB)和昆虫病原真菌(EPF),因此充足的病原生态学知识——它的空间分布、种群动态和可持续改进的功效是至关重要的,环保的害虫管理实践。所有entomopathogens, EPF最潜在的自然死亡率特工因为它有广泛的宿主范围,主机特定的生存土壤和传染性轻微接触宿主。雷竞技网页版本研究进行隔离并确定当地的EPF从土壤使用大蜡螟,Galleria mellonela引诱昆虫。详细的形态学研究的基础上通过显微镜观察乳酚棉蓝染色后,该物种鉴定为Beauvaria单独使用。在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA) EPF是培养在不同pH值为13天(3.5 - -6.8)。确定EPF,单独使用了白色的霉菌,它产生不同的孢子球由许多干燥、粉分生孢子。每个孢子球是由集团众多conidiogenous细胞。conidiogenous细胞短,卵圆形和细长的脊柱。最佳温度、相对湿度和pH值对丰富的孢子形成EPF的增长,单独使用在PDA培养基25°C,分别为90±5%和6.8。孢子形成增长直接与pH值成正比,与单独使用pH值的增加生物量增加。最大的干生物量增长记录180毫克和径向扩张在pH值6.8 4.57毫米直径。PDA媒体还指出适合大规模生产单独使用。

关键字

昆虫病原真菌;大蜡螟;广场mellonela;生物杀虫剂;有机农业

介绍

生物防治系统的概念起源于早期的19th世纪时,意大利病理学家名叫阿戈斯蒂诺•低音部花了数年时间研究白僵病病蚕,家蚕。Enotomopathogenic真菌中发现该部门真菌门(1]。目前,最广泛研究和使用的两个种类的昆虫病原真菌白僵菌和绿僵菌属anisopliae。白僵菌属单独使用宿主范围广泛感染超过700物种属于鳞翅目、鞘翅目、直翅目,半翅类、双翅目和膜翅目昆虫。这些致病真菌产生的外毒素beauvericin, isarolides, bassianolide isarolides [2]。疾病引起的单独使用被称为白僵病,其感染症状——木乃伊尸体,其次是昆虫表皮上的白色菌丝体生长和分生孢子的形成。

EPF的作用方式

其感染策略包括昆虫表皮-附件的分生孢子,分生孢子的萌发昆虫外表面,渗透到角质层,在血腔真菌生长,生产主机的毒素,最后死亡。

致病性的EPF

几个科学家测试了致病性单独使用对不同昆虫宿主。在幼虫阶段Helicoverpa armigera实验死亡率增加而增加剂量的单独使用。两个隔离的效力单独使用在Spodopteralitura蛹下在体外条件。两株发现同样有效造成100%的死亡率和死亡率成正比的分生孢子的浓度(3]。同样,实验室单独使用的效果h .来和S.litura依赖于分生孢子的浓度。八个孤立的单独使用的效果m . anisopliae对钻石蛾(DBM),小菜蛾幼虫。结果显示单独使用(Bba5653)最有力的,造成94%的死亡率。因此,证明单独使用为有效的生物防除的代理。

材料和方法

样品收集

本研究是在Cachar进行的,在阿萨姆邦南部2020年2月至2020年5月。试验研究在生物技术中心,进行生态学系Silchar Cachar学院。各种土壤样本收集来自不同农场的位置Cachar区。用金属铲坑独木舟15 - 20厘米,5个土壤样本收集每个站点的无菌塑料袋。塑料袋被贴上的日期和地点集合,同时土壤与植被。在实验室土壤被移除碎片像岩石,清理死昆虫,木树皮,叶等,以避免进一步污染腐生的微生物(图1)。

agriculture-cachar

图1:从各种农田土壤收集Cachar区村庄:(A) Borkhola Dwarband (B)。

昆虫饵方法

隔离土著菌株的EPF从土壤样品大蜡螟(GWM),g . mellonella昆虫的幼虫作为诱饵。分组幼虫在实验室条件下人工维护的饮食。土壤处理每250克的土壤样本容器10 - 12中型去年龄分组幼虫被添加。容器满是一个盖子,颠倒4- - - - - -6]。容器保持在黑暗中,在温度22 - 25°C。土壤被检查每日观察死亡诱饵幼虫,还时间幼虫死亡记录。

EPF修养

收集到的尸体从土壤和无菌水清洗使用点1幅画刷两次去除土壤和灰尘坚持身体刚毛或被。表面消毒尸体浸泡在1% Na-hypochlorite 5秒钟,防止外部腐生真菌的生长。尸体被放置在培养皿的绘画纸内衬一层滤纸与3 - 5滴消毒水滴滋润几天直到木乃伊的身体我。e硬化病疾病的观察。

培养基的制备

充分发展真菌最佳营养培养基是必要的。在目前的研究中,马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)中选择。PDA是由沸腾的混合物注入土豆(200克去皮土豆擦洗和1000毫升水里煮至少30分钟到1个小时,然后提取过滤使用好教练获得平滑粘贴)1000毫升,葡萄糖20.0 g和琼脂15.0克随后在高压蒸汽灭菌介质121°C 15分钟。混合物是无菌转移到无菌培养皿(7- - - - - -10]。媒介是光和温度敏感,所以,盘子在2 - 8°C和存储在黑暗中使用一个星期的准备。

pH值的培养基

研究pH值的影响生物量增长和径向扩张殖民地的EPF, 5 pH值从3.5到6.8(我。e 3.5、4.5、5.5、6.5和6.8)进行了测试。pH值为每个三个培养皿准备采取的三个复制。培养基的pH值调整通过添加1 N盐酸和1 N氢氧化钠的帮助下试纸在高压灭菌法。真菌生长的形式评估径向扩张。

培养真菌孢子

真菌孢子的培养总共15个培养皿(3培养皿为每个pH值的意思是三个复制)测量5厘米×1厘米含有马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)中、在BOD孵化器在温度25°C, 90±5%相对湿度和pH值3.5 - -6.8。菌丝的保证金和孢子形成后,真菌被进一步鉴定。

结果与讨论

发病死亡率尸体的身体布满了黑点暗示侵扰单独使用。5 - 7天后后死亡率木乃伊尸体看起来毛茸茸的,被丛卷毛的和出现粉状由于丰富的分生孢子形成指示发生硬化病疾病的白僵菌spp。隔离b . bassian培养在五个不同的pH值(3.5 - -6.8)为PDA培养基上13天。后14天在PDA、殖民地看天鹅绒粉状,很少形成synnemata。在尝试殖民地白色菌丝的生长,这是感染的症状单独使用,变成了淡黄色creamish孢子随时间。下面表面或殖民地的反面是观察无色到淡黄色。分生孢子球形(卵圆形)subglobose形状与光滑球形簇直径2 - 3微米的围墙。分生孢子是光滑和无色,分生孢子的链长和分生孢子的扩散。也种虫害繁殖生产的干孢子的分生孢子合轴的增长,因此,证实本研究的局部真菌隔离白僵菌(图2和图3)。

agriculture-larvae

图2:出现黑点GWM幼虫的死亡率。

agriculture-muscardine

图3:硬化病疾病的发展后5 - 7天之后死亡。

培养基pH值的变化的观察,指出,pH值生物质生产上扮演了重要的角色。与pH值的增加这些生物体的增长大大增加。pH值6.5 - 6.8已经发现有利的水平的有力增长[11]。在pH值3.5没有增长记录而pH值6.5 - -6.8后续增长可见光和pH值6.8最大生物质生产的180毫克单独使用观察到。径向扩张(增长)的变化在不同pH值高达13th一天已经被观察到。结果表明,最大扩张可见pH值在6.8培养皿从第一天开始。最大直径4.57毫米在提到的殖民地13th在pH值6.8 (图4和图5)。

agriculture-beauveria

图4:孢子形成的增长白僵菌在PDA培养基在不同pH值- 4.5 (A) pH值(B)酸碱5.5 (C) 6.5 (D) pH值6.8。

agriculture-bassiana

图5:白僵菌pH值对生物量的影响在vitro意味着三个复制。注意:(方程)干重(毫克);(方程)pH值;(方程)班轮生物质(毫克)

结论

阿萨姆邦南部的土壤富含昆虫病原代理像EPF, EPB杀虫剂,密集的探索性调查,识别和实现昆虫病原代理对广泛的阿萨姆邦有机农业实践至关重要。从上面的调查从昆虫尸体确认为分离出真菌生长白僵菌基于形态学鉴定下显微观察。真菌分离从土壤粘土类型和导致的死亡率在分组在24小时内的土壤治疗建议高致病性害虫。黑点的表象尸体真皮发病死亡率标明侵扰的单独使用。真菌PDA培养基上生长良好丰富的孢子形成的最适温度25°C, RH 90±5%和6.8博士的结果还表明,pH值PDA培养基上产生了显著的影响生物质生产和单独使用径向扩张,作为殖民地直接与pH值成比例增长。pH值在6.8干重增长指出180毫克和径向直径4.57毫米(13th天)在体外条件。

PDA文化是粉状的类型和菌丝出现白色开始,随着时间的推移变成淡黄色。详细的形态学研究通过显微镜的观察表明,孢子和分生孢子是葡萄糖(卵圆形)sub-glucose形状。分生孢子和分生孢子的链长,光滑,无色扩散。单独使用生产干孢子繁殖的分生孢子,合轴的增长。同时,PDA媒体指出理想的分生孢子培养基生产。

未来的研究可以得出结论,这个实验的范围已经强调的某些方面EPF的功效,单独使用在有效的害虫管理策略。与分子的广泛探索表征所需的土著隔离捕食协会更好的适应性不同的阿萨姆邦农业气候区。主机特定的毒性菌株应确定的大规模生产和维护适当的营养补充。同时,配方存储技术,延长保质期应该发达。

引用