研究和评论:植物科学杂雷竞技苹果下载志》上
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ISSN: 2320 - 0189
+ 1-845-458-68821Departamento de Bioquimica Centro de Ciencias Biologicas,大学联邦德伯南布哥(UFPE), Av。莫拉教授“政府改造”s / n, CEP 50.670 -420累西腓,PE、巴西
2Laboratorio de Imunopatologia三Asami-LIKA / UFPE CEP 50.670 -901累西腓,PE、巴西
3Laboratorio de Morfometria——Departamento de解剖学/ UFPE Av。莫拉教授“政府改造”s / n, CEP 50.670 -420 Recife-PE,巴西
收到日期:2015年7月19日;接受日期:2015年8月24日;发表日期:2015年8月26日
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Phthirusa pyrifolia(肯)为在巴西声称在医疗实践中,有用的治疗呼吸道疾病和肝脏损伤,春药的效果,并对其抗菌性,在秘鲁,也用于治疗骨折和扭伤。本研究的目的是评估的影响p . pyrifolia叶的水提物在雄性老鼠提交口服。动物在实验协议提交给自然口服摄入p pyrifolia叶水提物到12天。总收集血液能整除的荷尔蒙和biochemical-hematological分析。治疗期后,老鼠皮下注射麻醉,安乐死,然后orchidectomized。生化参数显示在天冬氨酸转氨酶明显降低,alanineaminotransferase和碱性磷酸酶酶水平约40%,分别为27%和52%。然而,提取不会引起肝损伤和肾功能的损伤不影响任何血液参数,但在睾丸组织学分析显示躯体动作。对老鼠的睾酮激素水平显著影响,表现出更高的减少(p < 0.05)约82.31%的比与控制相比,46.0(±8.1)毫微克/分升和260.0(±4.1)毫微克/分升,分别。我们相信水提物可能是负责促进性欲和生殖的减少在雄性老鼠,和诱发hepatic-protective效果。我们对验证结果贡献的传统使用的植物。
水提物,Phthirusa pyrifolia精上皮,睾酮激素。
Ethnopharmacological研究表明,大量的药用植物为小说提供了一个源生物化验可能影响甚至在老鼠和各种哺乳动物繁殖通过次级代谢产物的存在1]。植物提取物中已被证明有生物活性:抗高血压、抗炎,王亚南,抗肿瘤,抗氧化,anti-diarrheic, anti-spermatogenic,刺激精子形成,增加或减少血清睾酮水平(2]。几对老鼠的动物研究表明,植物提取物可能避孕或anti-fertility影响长期治疗后较低或高剂量。一般来说,这些研究人员已经观察到的变化在morphological-morphometric睾丸参数和水平的睾酮激素(3]。
Phthirusa pyrifolia(肯)为hemi-parasitic植物属于桑寄生科家族(槲寄生),在巴西被认为是“Erva de Passarinho”。叶子已经被使用,在巴西和秘鲁,民众对呼吸道疾病的医学,肝损伤和抗菌性。提问描述了使用这种植物来治疗骨折和扭伤。最近,我们研究小组分离和纯化的叶子的凝集素p . pyrifolia水提物显示有效的抗菌活动(4,5]。
关于植物提取物的报道性质在生育和性欲,当前调查提出评估的影响p . pyrifolia水提物对睾酮激素水平的雄性Wistar鼠口服。
水提物(AE)
p . pyrifolia收集树叶在伯南布哥联邦大学的校园,巴西,从顶部的紫荆花monandra寄主植物,和植物标本被发现DARDANO德安德拉德利马的标本西班牙Agronomico德伯南布哥(异丙醇),代金券是沉积(植物识别Nº18/2006;识别代码IPA - 80.066;p . pyrifolia(肯)为]。干树叶粉和提交与蒸馏水提取[10% (w / v)]在轨道搅拌2 h的4ºC。后来,混合物是通过纱布过滤和离心11180克15分钟25°C和上层清液被确认为水提物(AE)。对动物的影响,实现了标准化的AE蛋白质含量根据Lowry et al。6]。
实验处理
所有实验过程涉及的动物在动物实验伦理委员会批准的联邦大学的伯南布哥(23076.012671 / 2006 - 09年)。雄性Wistar鼠(n = 30),年龄在23周,体重378.5±5 g,被安置在控制环境条件(光周期12 h光明/黑暗,温度23±1°C)。动物们被分成两组:控制(n = 8)和测试(n = 22)和美联储组标准食品广告随意。对照组有免费水,而测试组可以免费获得这些AE(67毫克的蛋白质/公斤体重)通过自然摄入超过12天。每三天的间隔,全血整除(500μL)收集进行分析。
Histomorphologic研究
治疗期后,老鼠皮下注射麻醉,通过左心室安乐死灌注固定0.05磷酸盐缓冲剂,4%的戊二醛溶液pH值7.4,后来orchidectomized。睾丸显然是切割出来,称重,在缓冲福尔马林固定。固定组织脱水、清除、渗透,由一个自动组织和石蜡嵌入式处理器,然后切成薄片(4 - 6μm厚度)切片机(徕卡、模型RM - 2245)。histomorphologic研究部分是沾hematoxylin-eosin和光学显微镜下检查。形态分析包括观察精小管的直径(DST),精上皮高度(HSE)和Gonadosomatic指数(GSI)。这些数据都从30获得截面测量每个动物的细精管横截面积(AC)确定细精管的公式:
一个C=πD2/ 4(π相当于3.14和D是细精管的平均直径)。图像捕捉系统图像处理程序检查他们的子孙360×图像的放大。
生化,血液和激素水平
血样来自每个间隔三天尾穿刺和存入促凝剂,抗凝micro-blood管。全血是用来评估血液参数,和凝结的血液离心3000 xg, 15分钟,25°C。血清生化参数被用来评估通过一个自动随机存取的临床化学分析仪(Abbott-Aerosets)。睾酮的激素测定包被化学发光分析方法(immulite - 2000)使用访问imunoassay系统动物血睾酮校准器校准。
统计分析
参数进行了分析与SIGMASTAT项目重复使用Mann-Whitney测试措施参数学生的学习任务。统计显著性水平是在p < 0.05。
实验
在整个实验期间,AE剂量每日摄取的蛋白质的测试组为67.0毫克/公斤体重通过自然摄入(30 mL /鼠/天),约占603.0毫克的蛋白质/鼠/天。给这门课的十二天后,美联储测试组的平均体重与AE (369.0±4 g),显著低于对照组(409.0±6克)。
组织病理学研究
AE的影响体重,睾丸重量和gonadosomatic指数(GSI)的老鼠所示(图1一个)。精上皮的高度(HSE)厚,通常由五到六层密集细胞测试组(HSE = 66.0±1μm),会出现明显的精子发生与对照组相比(HSE = 71.0±1μm) (图1 b)。直径(DST)和横截面积(AC细精管的)显著降低(p < 0.05)在测试组(DST = 254.0±2μm;50.0±0.6 x 103μm2),图1 c比对照组(DST = 265.0±2μm;56.0±0.7 x 103μm2),(图1 d)。
图1:Histomorphological分析。(一)水提物对身体的影响和老鼠的睾丸重量,和gonadosomatic指数(GSI)。(B)直方图说明细精管的直径,高度的上皮细胞和细精管的横截面积。(DST)精小管直径;(HSE)精上皮高度和(AC)细精管的横截面积。*统计学意义(学生学习任务)p < 0.05。组织化学分析测试组的大鼠睾丸隔间(C)和对照组(D)。我——间隙;EL -淋巴囊;VS -血管;TP -膜; SE- seminiferous epithelium and LT- lumen. The LT contains sperm tails. Large arrows, primary spermatocytes; double small arrows, spermatids. The seminiferous epithelium (SE) comprises many layers of sex cells. The lumen is distinct. Numerous spermatogonia with small dark nuclei (squares) are clearly visible at the periphery of each tubule H and E. Bar ___45 μm. Control group (■) and Test group (□). *Statistical significance analyzed by Mann-Whitney test, p< 0.05.
生化,血液和激素血清分析
生化,血液和睾酮激素水平表1。我们观察到AST、ALT和高山酶水平降低约40%,分别为27%和52%。分析测试组的血清睾酮水平明显下降(p < 0.05)约82.31%与对照组相比,46.0±4.0毫微克/分升和254.0±8.0毫微克/分升,分别。所有血液参数的结果没有任何显著的差异。
| 生化参数 | 控制一个 | AEa、b |
|---|---|---|
| 天冬氨酸转氨酶(IU L1) | 122.6±7.70 | 77.3±10.10b |
| 丙氨酸转氨酶(IU L1) | 38.8±6.10 | 28.3±2.10b |
| 碱性磷酸酶(IU L1) | 228.0±4.28 | 108.0±9.20b |
| 总胆红素(mg dL1) | 0.2±0.01 | 0.2±0.01 |
| 直接胆红素(毫克dL1) | 0.1±0.01 | 0.1±0.01 |
| 尿素(mg毫升1) | 36.9±2.00 | 34.3±1.80 |
| 肌酐(mg毫升1) | 0.6±0.08 | 0.6±0.03 |
| 钠(毫克当量L1) | 144.1±2.60 | 145.1±1.90 |
| 钾(毫克当量L1) | 6.75±0.22 | 5.86±0.90 |
| 氯化(毫克当量L1) | 103.7±1.10 | 104.5±1.10 |
| 血液参数 | 控制一个 | AEa、b |
| 血红细胞(RBC) 106uL1 | 7.37±0.1 | 7.64±0.3 |
| 血红蛋白(血红蛋白)g dL1 | 14.20±0.2 | 14.40±0.5 |
| 血细胞比容(HCT) % | 42.60±0.5 | 43.36±2.8 |
| 意思是(MCV) fL细胞体积 | 57.17±0.8 | 56.63±1.6 |
| 意思是微粒血红蛋白(MCH) pg | 19.04±0.1 | 18.86±0.3 |
| 平均血红蛋白浓度(MCHC) g dL1 | 33.33±0.3 | 33.25±1.1 |
| 红细胞分布宽度(RDW) % | 13.92±0.1 | 14.20±0.1 |
| 103µL血小板(PLT)计数1 | 906.50±1.2 | 910.00±0.1 |
| 平均血小板体积(MPV) fL | 5.50±0.1 | 5.50±0.1 |
| 白血球细胞(白细胞)103µL1 | 5.22±0.5 | 4.44±0.6 |
| 中性粒细胞(NE) % | 17±2.0 | 19±3.0 |
| 淋巴细胞(LY) % | 71±2.0 | 70±2.0 |
| 单核细胞(MO) % | 7±1.0 | 5±1.0 |
| 嗜酸性粒细胞(EO) % | 1±0.1 | 1±0.1 |
| 嗜碱粒细胞(BA) % | 8±2.0 | 6±1.0 |
| 期口服 | 激素睾酮水平参数毫微克/分升 | |
| 控制一个 | AEa、b | |
| 最初的实验 | 256.0±3.10 | 257.0±2.10 |
| 第三天 | 256.0±1.10 | 254.0±2.10 |
| 第六天 | 254.0±1.10 | 128.0±6.10b |
| 第九天 | 256.0±2.10 | 59.0±5.10b |
| 主显节 | 260.0±4.10 | 46.0±8.10b |
表1:p . pyrifolia叶的水提物对生化,血液和激素成分。
p . pyrifolia叶AE没有造成任何动物的死亡在目前工作的实验处理,表明提取没有致命的影响。此外,行为变化,拒绝提取摄入,减少口渴和饥饿机制(数据未显示),也没有发现。
血清生化成分从肝代谢的研究提供了有价值的参数评价肝脏功能与疾病有关,直接或间接地与肝脏有关。AE减少所有血清酶的水平测试。当高血浆的尿素和肌酐水平发现,它们提供的证据肾过载,急性肾功能衰竭,或增加的蛋白质分解代谢7]。
关于睾丸激素,我们观察到测试组的血清睾酮水平稳步下降相比,控制后的第四天。血清睾酮水平的下降可能导致从提取的直接影响睾丸间质细胞或间接由于LH水平下降从而影响类固醇生成。睾丸激素是通过几个重要的酶,在睾丸间质细胞合成蛋白质或受体载体从胆固醇合成新创8]。根据Mishra和辛格治疗姜黄巴隆抑制小鼠睾丸精子发生的原因,虽然这种抑制的机制仍然知之甚少。此外,在不成熟的雄性老鼠,姜黄comosa,另一种姜黄,建议直接作用于睾丸或间接抑制促性腺激素的分泌,从而降低睾丸激素的生产,或采取行动的方式(9]。与我们的结果相反,雅库布和Afolayan透露,AE Bulbine natalensis增加睾丸激素水平和这可能举出激素合成的诱导睾丸间质细胞,这些细胞是睾酮的主要来源(10]。关于荷尔蒙睾丸激素的数据在我们的研究发现可能与治疗相关疾病,最有影响的人之一,如今,前列腺癌。激素,尤其是雄性激素,被认为扮演一个关键的角色在前列腺癌的病因11]。
组织病理学结果睾丸研究显示控制和测试组之间的显著差异。助教在对照组明显高于在测试组。然而,我们的研究结果不同意另一项研究由Yakabu et al .,这显示增加GSI老鼠Fadogia agrestis)处理,植物用于治疗性功能障碍。这些参数也可以用来评估睾丸的正常运作能力(12]。根据Wankeu-Nya et al .,影响在性腺体指数可能发生由于炎症或细胞收缩过程(13]。植物的次生代谢产物研究雄性哺乳动物的影响。随后,研究由雅库布和Jimoh显示水平下降在雄性小鼠生殖器官的重量报治疗提取牡荆牡的种子,并暗示提取物中的黄酮类化合物在高浓度可能与结果(14]。
总之,目前的研究结果显示,AE的口服的p . pyrifolia不是致命的,但严重的睾酮激素水平下降,因此,雄性老鼠的生育能力可能受到影响,提出提取尽可能使用的辅助治疗前列腺癌。
作者非常感谢医院das丹尼·德·伯南布哥,斯科特诉综语言修订和Fundacao德帕罗Ciencia e Tecnologia Estado de伯南布哥金融支持。
