研究与评论:微生物学与雷竞技苹果下载生物技术杂志
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莫娜王妃1＊谢卡尔·库马尔说2Sumita Shukla报道3.， Mradula Sachan4以及比雷什·沙卡5
5Sri Balaji药学院，Benad路，Machedagaon，斋浦尔，拉贾斯坦邦，印度
收到日期:16/09/2012接受日期:11/11/2012
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组织培养本文对马铃薯进行了研究。采用MS基础培养基中添加30和40 g/l蔗糖、8 g/l琼脂和不同植物生长调节剂。以不同配比的IBA: BAP(10:10、10:5、5:10、5:5 μM)组合培养马铃薯。在所有的处理中，细胞的发育并不完全相同，培养后一周左右观察到培养的组织。结果表明，10 μM IBA与10 μM BAP复合处理有利于愈伤组织的诱导;而在5:5 μM IBA: BAP溶液中形成的组织细小、短小。与5:5 μM IBA: BAP处理相比，5:10 IBA: BAP处理形成的组织较细、较短，但密度较高。
马铃薯，组织培养，愈伤组织诱导，BAP, IBA。
常规的组织培养体系包括愈伤组织的诱导和再生是组织培养成功的基本要求遗传转换[1,2]。据了解，愈伤组织的诱导和再生能力高度依赖基因型，外植体类型，碳水化合物来源，植物生长调节剂，基盐培养基培养条件[3]。
马铃薯是世界上第四大重要粮食作物，在大约140个国家种植，其中100多个国家位于热带和亚热带地区。已有研究人员利用低浓度培养基进行马铃薯组织培养[5,6]，但利用高浓度培养基进行马铃薯组织培养尚未见报道，因此，我们决定确定马铃薯组织培养的最佳培养基组合和激素处理。
植物材料和培养基的制备和灭菌
植物材料从它们的自然栖息地收集并培养以制备所需的外植体。为了杀菌，植物材料用多滴洗洁精在自来水下洗涤约30分钟，然后浸泡在乙醇中。这一阶段结束后，植物材料在无菌条件下转移到密封瓶中1%次氯酸钠溶液中，轻轻搅拌20分钟，然后用无菌蒸馏水冲洗三次。植物材料转移到无菌滤纸上，切割培养。制备添加30、40 g/l蔗糖、8 g/l琼脂和不同植物生长调节剂的MS基础培养基，调整pH后进行蒸压。
植物材料的组织培养
在培养皿中培养的植物材料，培养皿中含有25 ml MS基础培养基，并添加30和40 g/l蔗糖，8 g/l琼脂和植物生长调节剂。以不同浓度的吲哚-3丁酸(IBA)和6-苄基氨基嘌呤(BAP)为生长素来源，以5 μM和10 μM组合为细胞分裂素来源。所有这些水平的可能组合都被用作治疗，因此进行了04次激素治疗。培养皿在25±1ºC黑暗中孵育。培养后第三周，对形成的愈伤组织鲜重进行估计和比较。
在所有的处理中，细胞的发育并不完全相同，培养后一周左右观察到培养的组织。采用不同IBA: BAP配比(10:10、10:5、5:10、5:5 μM)的组合处理(表1)．结果表明，10 μM IBA与10 μM BAP复合处理最适合生长。这些处理的增殖率也高于其他处理(图1)．在较低浓度的BAP或IBA处理中，生长最小。大约培养三周后，外植体几乎没有生长。叶柄的再生能力一般较低(约为20%)。将再生芽转移到MS基础培养基上激素在光周期为16 h的光照/8 h的黑暗条件下生长更佳。10 d后，将绿长枝转移到诱导培养基中。在5:5 μM IBA: BAP溶液中形成的组织较细，较短。5∶10 IBA: BAP形成的组织纤细、短小，但密度较高。与其他处理相比，5:5 μM不适合诱导。IBA和BAP在不同浓度和组合条件下反应不同。高浓度的IBA和BAP可直接促进组织形成后的诱导;因为这些植株又长又密。
表1。IBA和BAP的不同处理比例
图1%不同培养基处理下的培养
各种激素处理和外植体来源已用于诱导不同植物的培养组织生长。一些研究人员只使用生长素[7,8]，而有些则使用生长素和的组合细胞分裂素一起[9,10]。为此，我们使用了BAP和IBA的不同组合。结果表明，BAP的存在不仅是诱导外植体的必要条件，而且还能促进外植体的增殖。IBA和BAP的适当组合也能促进组织的形成。当BAP和IBA用量较高时，适宜进行诱导培养。一般来说，可以推测，在这些激素的组合中，当IBA在同等水平的BAP中使用时，组织诱导是合适的(表1)。本实验的结果表明，在组织培养方法的响应中，不同的外植体或激素处理适用于每种类型的不同目的。
