低温贮藏

文摘

保护人类或动物卵母细胞的能力,胚泡,卓有成效的器官/性腺/性腺组织和精子是一个重要的工具在动物辅助生殖技术。这个保护允许接受治疗或放射治疗的患者保留生育能力,并有助于实现所有优势从昂贵的性腺超数排卵治疗前艺术(辅助生殖技术)。第一个目标在建立关联在护理适用相变协议是可行的一样很少受伤而暴露标本non-physiologic激进的低温。今天两个广场测量技术利用在低温贮藏:缓慢冷却技术和更现代的快速玻璃化的过程。玻璃化是直接,不需要昂贵的可编程相位改变仪器,由于经济和价值有效改善添加剂每周期妊娠率。卵母细胞、囊胚、性腺组织和精子可能适合于玻璃化冷冻保存。玻璃化冷冻保存的是长期和重要进展广场测量实现了每天在这活动域在审判线低温贮藏的最佳协议的各种品种的配子,胚胎和组织。低温贮藏是另外不会崇拜孢子谷物保护替代天然材料,许多最重要的和营养种子和很多很多。有一些灭绝的天然材料。这些材料通常保存长期使用对低温贮藏。

关键字

卵母细胞;囊胚;超数排卵;玻璃化;羊膜的

介绍

低温贮藏也称为cryoconservation无论细胞器可能是一个方法,细胞、组织,细胞外基质,器官或其他生物构造的风险造成的伤害不受监管的化学动力学区域单位保存通过冷却非常低的温度(通常是-80°C受害坚实的温室排放或-196°C受害液氮)(1]。在足够低的温度下,任何催化剂或化学活动可能造成伤害的生物材料问题是有效地停止了。低温贮藏策略能实现低温而不造成额外伤害由冰的形成在温度下降引起的。古老的低温贮藏依赖涂层织物被冻结了一个类别的分子称为冷冻保护剂。新的战略领域永远被调查单位由于固有的毒性的冷冻保护剂(2]。默认情况下它应该考虑低温贮藏改变或妥协细胞的结构和性能,除非它的建立为一个特定的细胞群。Cryoconservation动物遗传资源的收集方法在动物遗传物质和持有的意图保护品种。

保存羊膜

已经有一个很好的注意能力的羊膜干细胞及其在最近几年。这种膜拥有许多独特的能力让人想起抗癌效果(3,4)另外发展和血管形成能力(5]。是至关重要的,以考虑羊膜作为一个可能的选择是明智的使用在临床的设置,这有必要创建某些组织可能根据需要保存和转移到完全不同的病人需要临机应变对一旦需要,而保持其能力一旦强制修改。目前的研究目的是总结不足已经完成评估的机会,保存羊膜可能保持其可行性和具体执行属性即使冻结和解冻过程的膜。

羊膜是人类胎盘的个人层,秘密许多物质和具有独特的特征让人想起免疫调节,抗血管新生,和pro-apoptotic活动,此外作为抗菌性,antifibroblastic活动,细胞迁移,细胞刺激经济活动。羊膜(AM)作为生物屏障,支持胎儿通过副学位在解剖学上做好准备,生理和免疫特权的房子6,7]。是由一层的基底膜厚动物组织干细胞(ESCs)副学位avascularstroma包含间充质干细胞(msc)。研究表明,羊膜欠它独特的特征特殊的干细胞,它港口。的众多特性之一是有证明自己的开发能力在msc。研究证明pro-angiogesis结果这些干细胞(5,8]而ESCs的是广场测量证明自己的抗血管生成和pro-apoptosis属性(3,4]。Pro-angiogenesis的影响占主导地位将促进在血管疾病(5]而抗血管生成和pro-apoptosis效果的膜及其在癌症干细胞可能适用的医疗援助(9- - - - - -15]。

一些例子的低温贮藏可以做到的

印度大陆可能存储Bos indicus牛、最普遍的一个在每一个品种是“Ongole”,通过继承可能是一个双目标品种接受节俭、鲁棒性和疾病的抵抗力。已经确定,在本地同样射精被丢弃的杂交牛一个巨大的份额由于运动性低,高比例的异常精子和穷人freezability在不同阶段和温度降低。可以有物种的变化总体精子对低温贮藏的敏感性;射精是异构的可变电阻扩散应力在细胞。在热带条件,外来品种显示明显的季节性波动和特点高关闭温度在夏天不利影响性腺大小,性欲和和质量和附睾的精子通过性腺温度升高的力量较弱精子保持能动性和acrosomal完整性一旦温度下降。相比,最近的累积,八次很多牛精子冷冻保存需要达到相当于体内受精率(16]。

清等人调查的影响delipation(脂质除少量)猪卵母细胞的生物过程能力。Delipated(+ /−)和/或玻璃(+ /−)卵母细胞受到单性生殖的激活,第一单性生殖的胚胎被记录的可行性,因此胚胎被转移到接受者更多发展。结果表明,单性生殖的胚胎的卵裂和囊胚率从第一delipated卵母细胞是胚胎的大大低于集群(undelipated卵母细胞)产生影响(P < 0.05),一旦转移到受体猪,这些胚胎准备更多的开发和供应单性生殖的胎儿。虐待的最小体积冷却(MVC)技术,单性生殖的胚胎早期delipated卵母细胞可以通过玻璃化冷冻保存1-cell早期囊胚阶段。一旦解冻,第一个囊胚阶段被发现是玻璃化的最佳对策。结合地胚胎玻璃在2 - 4细胞来源于早期delipated卵母细胞转移到2受体猪,和导致肢芽阶段胎儿。最后,结果无可争辩的,单性生殖的胎儿是由猪胚胎玻璃化的战略组合之前或一次在体外成熟(IVM)配子体delipation与在任何早期胚胎玻璃化生物过程阶段。这种方法可以应用于低温贮藏的克隆和胞质内精子注射(ICSI)胚胎来自delipated卵母细胞(17]。

非洲鲶鱼是一个极好的鱼有足够的市场需求(18]。然而,标准和数量的鱼籽为池袜保持房地产种植的很重要的问题。因此,低温贮藏是激励作为一种提高可行的种子产量。低温贮藏技术的幽默可能在非洲国家发达的鱼的地方运营商之间的鲶鱼培养贸易。育的过程包括选择股票,精子细胞分类、冷藏、冷冻、解冻、规则和处理使用,转让协议和信息开发(19- - - - - -36]。

阻止风险的主要策略

停止低温贮藏的主要技术损失方测量的控制速度和缓慢冷却和最近的速冻方法称为玻璃化。

缓慢的可编程的冻结

可控速度和缓慢冷却,结合地称为慢可编程冻结(SPF),是一套完善的技术开发了在第一个年代,使主要的人类胚胎冷冻佐伊Leyland诞生在1984年。自那时以来,机器冻结生物样品开发可编程序列,或控制利率,全球各地用于人类,动物和细胞生物学——“冻结”样品提高了终极解冻,保护它之前冻结,或者在氮冻存。广场这样的机器测量用于冷却卵母细胞、皮肤、血液商品,胚胎,精子,干细胞和一般组织保存在医院,兽医实践和分析实验室在世界各地

避免致命的胞内冷却如果冷却缓慢,足以让舒适水离开细胞逐渐冷却液体的全身细胞外物质减弱的扩张霜雾增长和再结晶,生物材料的海藻酸盐、聚乙烯醇或壳聚糖不会妨碍霜雾增长与古代小分子冷冻保护剂。这个速度不同细胞之间的不同大小和透水性:一个典型的冷却速度有关1°C /分钟是可以接受的几类细胞一旦冷冻保护剂治疗让人想起甘油ordimethyl亚砜,然而并不是一个通用的最佳速度。1°C /分钟的速度是通过开发设备让人想起rate-controlled电冰箱或者长凳上高级便携式冷却手段(37]。

一些自由研究提供了证明,冷冻胚胎抓住开发慢慢冷冻技术可以在某些方面比当代试管婴儿“更好”。研究表明,利用冷冻胚胎当代胚胎和鸡蛋和鸡蛋,而不是减少流产和早产的几率尽管准确原因广场措施仍在探索。

玻璃化

研究人员格雷格Fahy和威廉·f·拉尔帮助介绍玻璃化丰硕的低温贮藏在1980年代中期。截至2000年,研究人员声称玻璃化提供低温贮藏的优点而不是受伤因为霜雾的形成,真正成为了许多复杂的事件组织工程的每一个细胞和生物材料必须保持解冻保持高细胞生存能力和功能,生物材料的结构和结构的完整性。玻璃化的组织结构设计是1^圣据传是Kuleshova,世界卫生组织结合地是女人的卵子的主要灵魂意识到玻璃化(卵母细胞),导致在1999年发生。为临床低温贮藏,低温贮藏有时需要冷却前的冷冻保护剂。冷冻保护剂likeantifreeze行动:他们减少冷却温度。他们结合地增加身体。而不是结晶,糖浆的答案变得副学位无定形冰——这玻璃化。而不是自然过程从液体到固体结晶,无定形状态是一种“固液”,因此转换结束一生低温变化描绘,因为“玻璃化转变温度。

玻璃化的水是由快速冷却,可能实现而不是冷冻保护剂,特别是温度快速下降(megakelvins每秒)。需要意识到玻璃态的速度在纯粹的水被认为是不可能的,直到2005年。

两个条件有时需要允许玻璃化广场测量身体的上升和下降的冷却温度。几个溶质每,然而更大的分子通常有更大的影响,明显的身体。快速冷却结合地促进玻璃化。

低温贮藏的建立策略,这种物质穿透细胞膜,实现双曲身体和减少细胞内的冷却温度。糖不及时渗透通过膜。那些做的溶质,让人想起二甲亚砜,典型的冷冻保护剂,广场测量通常在激烈的浓度对肾脏有害处的。麻烦中的一个妥协的玻璃化冷冻保存问题限制冷冻保护剂本身造成的伤害因为冷冻保护剂的毒性。混合物的冷冻保护剂,因此冰阻滞剂的使用使序数世纪药物公司玻璃化一只兔子排泄器官与自营玻璃化混合物-135°C。复温后,排泄器官移植与成功成兔子,完整的实用性和可行性,能够无限期地维持兔子因为唯一运行的排泄器官37]。

alloperipheral骨髓瘤细胞的自体移植是利润的大部分病人。调剂低温贮藏的过程可能较低执行价格的额外医院稀缺技术仪器,安全、有效。在副学位年龄中值分析获得更高的认知过程{}中的重要性过程涉及癌症的健康计划,重要的是要承认的生存患者积累,想来他们工作环境可行的可能是一个优先级不久,生活质量,避免工作日缺勤,应该总结抗肿瘤药治疗的全部价值。

在墨西哥一个国家,无论流行和有效的药物对毫米稀缺和限制(bortezomib、lenalidomide carfilzomib, pomalidomide,等等)是高度重视发展的方法来扩大造血的移植项目通过其简化(38]。

低温贮藏是大专文凭积分机动模型的一部分。多年的应用缓慢冻结了受精卵和胚胎冷冻保存的三重冠,给成千上万的病人有机会扩展的有效性在体外受精周期。最近,玻璃化的引入在日常临床应用带来一个更好的成功在胚胎的冷冻保存和卵母细胞的主要。玻璃化是考虑很多经济比慢速冷冻方法。这通常是更快和更少的复杂技术,达到更高的胚胎存活率和卵母细胞,体外受精(玻璃化了一个额外的冲动39- - - - - -43]。

玻璃化的引入与副学位试管婴儿一起脱硫的相关分析。结果,新的玻璃化协议和设备出现参加任何的成功率提高低温循环在礼物的研究中,老鼠卵母细胞与替代玻璃玻璃化的协议,它与另一个完善的商业访问协议。大多数结果生活是存活率实时一旦解冻,四十八小时后(9,44- - - - - -52]。

结论

因为它一直在观察到最大的情况下,隶属度的低温贮藏器官之前和之后,都有相同的特征和有很少或没有损失的性质。作为低温贮藏有能力保护人类或动物卵母细胞,胚泡,卓有成效的器官/性腺性器官组织和精子可能是一个重要的工具在动物机动卓有成效的技术。这个保护允许病人接受医疗援助或辐照保留生育能力,并帮助实现所有祝福亲爱的性腺超数排卵治疗前艺术(辅助副本技术)的主要目的是建立关联在护理操作适用的协议是尽可能少的损伤可实现的而暴露标本non-physiologic激进的低温。有一些灭绝的天然材料。这些材料通常保存长期使用对低温贮藏。

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