三叶菖蒲不同提取物中总酚、生物碱、类黄酮和单宁含量的测定。

摘要

本工作旨在评价石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物中总酚、生物碱、类黄酮和单宁的含量Calanthe triplicata艾姆斯(Williemet)。以没食子酸为标准品，福林- ciocalteu法测定总酚和单宁。以槲皮素为标准，氯比色法测定总生物碱含量。结果表明，以阿托品为标准品，与溴甲酚绿溶液相比，乙酸乙酯提取物中酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量较高。采用铝对石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇提取物测定总黄酮含量。乙酸乙酯提取物中总酚为29.43 mg，单宁为82.92 mg(没食子酸当量)，生物碱为65.34 mg(没食子酸当量)阿托品槲皮素当量(QE)为90.24 mg。

关键字

苯酚，类黄酮，生物碱，单宁

简介

从远古时代起，植物和动物起源的治疗潜力就被利用为简单的过程，而不需要分离纯化合物。生药的药理作用是由其成分的性质决定的。因此，植物物种可以被认为是生物合成的化合物，例如蛋白质、碳水化合物和脂肪，这些化合物被动物和人类用作食物，但也可以被认为是大量的化合物，包括生物碱、萜类化合物、黄酮类化合物、糖苷等，这些化合物具有一定的生理作用。这些化合物主要负责所期望的有益特性[1］．三瓣兰是兰属兰花的一种，属于兰科。这种植物是一种低矮的常绿陆生兰花，白色的花，黄色或红色的愈伤组织，产于印度南部的丘陵地区。据报道，这些草药用于治疗肠胃疾病;根被一起咀嚼槟榔坚果或其他芳香物质,在腹泻［2］．

材料与方法

化学品和试剂

碳酸钠，氯化铝，亚硝酸钠，氢氧化钠由Sri Ramachandra大学药学院药物化学系提供。Folin-Ciocalteu”S酚试剂，氯化铝，没食子酸和槲皮素均来自Sri Ramachandra大学药学院生药学系。

植物材料

该植物采自泰米尔纳德邦Namakkal地区的Kolli山，并由助理主任Sasikala Ethirajulu博士(生药学)，印度泰米尔纳德邦金奈市阿罗巴卡姆政府医院校园。

提取物的制备

新采集的植物在阴凉处晾干，并撒上细粉。然后分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇冷浸渍法提取植物粉末。溶剂通过蒸馏除去。然后将提取物蒸发浓缩[3.］．

总酚含量测定

采用福林- ciocalteu法测定总酚含量。反应混合物由1毫升提取物和9毫升蒸馏水组成，取于容量瓶中(25毫升)。用1毫升福林- ciocalteu苯酚试剂对混合物进行处理并摇匀。5分钟后，加入10毫升7%碳酸钠(Na₂有限公司_3.)溶液处理成混合物。体积为25毫升。一套标准溶液没食子酸(20、40、40、60、80和100 μg/ml)。在室温下孵育90分钟，用紫外(UV) /可见光测定测试溶液和标准溶液对550 nm试剂空白的吸光度分光光度计．总酚含量以mg GAE/g提取物表示[4-6］．

生物碱的测定

将植物提取物(1mg)溶解在二甲基亚砜(DMSO)中，加入1ml 2n HCl并过滤。将该溶液转移到分离漏斗中，加入溴甲酚绿溶液5ml和磷酸盐缓冲液5ml。用1、2、3和4 ml氯仿剧烈摇晃混合物，收集在10ml容量瓶中，用氯仿稀释至体积。以上述方法制备阿托品参考标准溶液(20、40、60、80和100 μg/ml)。用紫外/可见分光光度计测定测试溶液和标准溶液在470 nm处对试剂空白的吸光度。总生物碱含量以mg AE/g提取物表示[7，8］．

总黄酮含量测定

总计类黄酮采用氯化铝比色法测定含量。反应混合物由1ml提取物和4ml蒸馏水组成，取于10ml容量瓶中。在烧瓶中，处理0.30 ml 5%亚硝酸钠，5分钟后，混合0.3 ml 10%氯化铝。5分钟后，处理2毫升1M氢氧化钠，用蒸馏水稀释至10毫升。以上述方法制备槲皮素参考标准溶液(20、40、60、80和100 μg/ml)。用紫外/可见分光光度计测定测试溶液和标准溶液在510 nm处对试剂空白的吸光度。总黄酮含量以mg QE/g提取物表示[9-12］．

单宁含量测定

采用Folin - Ciocalteu法测定单宁。将约0.1 ml的样品提取物加到装有7.5 ml蒸馏水和0.5 ml福林酚试剂、1 ml 35% Na2CO3溶液的容积瓶(10 ml)中，用蒸馏水稀释至10 ml。将混合物摇匀，室温保存30分钟。按照上述方法制备一组没食子酸参考标准溶液(20、40、60、80和100 μg/ml)。在725 nm处用紫外/可见分光光度计测量测试溶液和标准溶液的吸光度。的丹宁酸含量以mg GAE /g提取物表示[13，14，15，16］．

结果与讨论

总酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量采用校准曲线计算。结果列于表中表1总酚、生物碱、类黄酮和单宁含量的校准曲线如图所示图1、2、3和4分别。

所有校准图均表现出较强的正线性相关(r)，接近于+1。这些图表表明，随着浓度的增加，吸光度值也增加。结果表明，乙酸乙酯提取物中总酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量分别为:GAE为29.43 mg /gm, AE为65.34 mg /gm, QE为90.24 mg /gm, GAE为82.92 mg /gm。石油醚、氯仿和甲醇提取物中酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量较低。

结论

本研究测定了三棱藨草乙酸乙酯和甲醇提取物中总酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量。乙酸乙酯提取物中酚、生物碱、黄酮类化合物和单宁含量均高于甲醇提取物。三棱藤乙酸乙酯提取物的药理作用将由这些化合物的性质决定，这些化合物负责所需的治疗特性和确定的生理作用。

Acknowlegments

作者感谢斯里罗摩昌德拉大学药学院生药学系和药物化学系提供的化学品和试剂，也感谢印度泰米尔纳德邦金奈Porur斯里罗摩昌德拉大学的管理层鼓励并为开展工作提供必要的设施。

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