研究和评论:药物分析杂雷竞技苹果下载志》上
菜单e-ISSN: 2320 - 0812
e-ISSN: 2320 - 0812
B穆罕默德Ishaq1K Vanitha普拉卡什2*和克里希纳克汉3
1研究学者,贾瓦哈拉尔·尼赫鲁科技大学卡基纳达,卡基纳达,a P印度。
2药品分析、压药学院,Gandipet,印度海德拉巴,美联社。
收到日期:12/10/2013;接受日期:04/11/2013;发表日期:14/11/2013
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Tapentadol(TPL)是一种新型阿片类止痛药的药物。目前的工作解释的开发和验证一个简单的和可靠的液相色谱测定方法的定量测定Tapentadol (TPL)散装和平板电脑配方。色谱法是由反相技术在8列流动相由0.1米磷酸钾缓冲(pH值6.8)和乙腈在注入50:50的比例v / v 1.2毫升/分钟的流量。检测是在241 nm的列温度45°C。方法评估根据我的指导方针为各种验证参数,如线性、准确性、精密,LOD,定量限,特异性,并强迫降解研究。分析物的峰值出现在2.47分钟。tapentadol的校准曲线是线性的,从200年到600年μg /毫升。盘中interday和精度范围内被发现。该方法有足够的敏感性,重现性和特异性为散装tapentadol及其的决心平板电脑剂型。LOD和定量限被发现是0.001μg分别/毫升和0.003μg /毫升。准确性(意味着复苏:100.00%)和再现性被发现令人满意。总之,这是一个简单而有效的方法高效液相色谱法检测TPL在平板配方,这可能是有用的质量控制分析。
Tapentadol、阿片、磷酸钾缓冲,验证。
Tapentadol, 3 - [(1 R, 2 R) - 3 -(二甲胺基)- 1 -乙基- 2 -甲基丙基)苯酚盐酸盐(TPL),明显不同于以前描述的集中行动止痛剂,因为它有一个奇特的双重机制的行动。为此,提出了一个新的药理类,即μ阿片受体激动剂和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(MOR-NRI) [1,2)(图1)。这两种机制的行动,铁道部和新名词,互补的方式有助于TPL的疼痛的功效和神经性疼痛条件(3]。这种组合效果不仅提供了有效的镇痛在广泛的急性和慢性疼痛,但它提供了一个“opioid-sparing”效应,即降低生产所需的剂量的TPL给定水平的镇痛多亏了个新名词组件的贡献其镇痛效果。也因此,opioid-induced副作用的发生和强度应显著降低。事实上,最近的临床研究表明,TPL的副作用发生率很低(恶心、呕吐、便秘4,5,6),但类似的速度镇痛效果如果equianalgesic剂量相比其他古典阿片类药物(羟考酮(7,8,9,10,11],[吗啡11])。TPL驻留在单一对映体的止痛剂性质,不需要代谢活化,这是有益的在这两种机制的相对贡献,铁道部激活代谢转换期间和新名词不变化。这些特性使得TPL一个有吸引力的替代传统镇痛的广泛的潜在应用在人类和兽医药物。
图1:tapentadol结构
迄今为止,只有两个质方法检测TAL在生物矩阵(尿12)和尿液和口服液体(13)已经在文献中报道,但是没有研究TPL检测的高效液相色谱方法制药配方。为解决这一不足,本文的目的是开发和验证一个新的简单的方法量化TPL平板配方使用高效液相色谱法与光敏二极管阵列检测(HPLC-PDA)。
化学试剂
纯粉(纯度> 99.9%)的TPL被异性药物有限公司提供,海得拉巴。的平板电脑剂型TPL从Anukar药房购买,海得拉巴。高效液相色谱级乙腈(ACN)总经理购自沙劳打电话(Sentmenat、西班牙)。能够允分析级磷酸钾缓冲获得从SD(印度孟买)的罚款。高效液相色谱级水通过蒸馏产生的去离子水Milli-Q微孔水系统(米尔福德,妈,美国)。所有其他试剂和材料均为分析纯,提供商业来源。水和有机成分的流动相混合,真空脱气下的高效液相色谱法。LC移动阶段透过0.2μm醋酸纤维素膜过滤器(缝匠肌Ste-dim生物技术有限公司法国,Aubagne Cedex)溶剂过滤装置。
HPLC-PDA仪器及色谱条件
高效液相色谱系统是一个LC水域(美国水域,米尔福德,MA)组成的四元梯度系统控制器(600),在脱气器(水域,房颤模型),光电二极管阵列检测器(水,2998模型)和自动取样器(水域,模型717 +)。数据处理使用授权Pro软件(美国水域,米尔福德,MA)。色谱分离测定了水的Xterra 8分析柱(150毫米×4.6毫米内径5μm粒子大小、水域,都柏林,爱尔兰)保持在45°C。流动相是泵的流量1.2毫升分钟−1。检测波长为241 nm。
流动相
0.1米的混合磷酸钾缓冲(pH值6.8,调整与邻位的磷酸)和乙腈50:50的比例% v / v作为流动相。混合溶剂过滤0.2μm醋酸纤维素膜过滤器(缝匠肌Ste-dim生物技术有限公司法国,Aubagne Cedex)溶剂过滤装置,脱气作为流动相。也用作制备药物稀释剂的解决方案。
标准和工作方案
原液TPL的流动相浓度1000μg毫升−1是使用容量瓶准备的。这是储存在+ 4°C。获得最终的浓度200μg毫升−1,一个适当的稀释股票的标准溶液与流动相稀释做准备的毫升。解决方案准备工作每天从上述股票的解决方案。
执行示例解决方案(药物制剂的分析),20个平板电脑被单独,体重,获得这些平板电脑的平均体重,最后他们。这个粉的一个适当的部分,相当于100毫克TPL的称重和放置在一个50毫升容量瓶,用25毫升的流动相溶解它。这个解决方案是用15分钟溶解和删除整个活动的平板电脑。时间一旦过去,与额外的流动相稀释50毫升。5毫升的整除被转移至容量瓶25毫升的容量和体积是由马克与稀释剂。这个解决方案是用于估计TPL(400μg /毫升)。
统计分析
在这项研究中收集的数据进行了分析使用人民币由单向方差分析统计软件包(方差分析)。一元线性回归分析使用最小二乘法应用于测试拟合模型。相关系数计算和统计分析的结果被认为是重要的如果相应的假定值小于0.05。
方法开发和优化
甲醇和乙腈用于初始侦察时,观察到乙腈是发现更好的分辨率和峰值形状相比,甲醇。因此,乙腈是用作方法开发有机修饰符。我们避免了强酸性和强碱性缓冲他们非易失性和nonameanable PDA探测器。乙酸铵缓冲(10毫米)被选中,但峰的形状和尾矿的因素对分析物被发现是不可接受的。不同的pH值和流动相组成的影响也试图提高分辨率和峰对称性。峰的形状和对称性被发现与磷酸钾缓冲改善。除了一般使用C18柱、固定相也被选中。为了提高峰值对称和决议C18柱,各种组合的磷酸钾缓冲和ACN用于不同比例。pH值的缓冲区与邻位的磷酸调整到6.8。但仍然TPL峰值更广泛,分析物洗脱10分钟。 The C8 column was found to be more suitable because of less tailing with improved resolution and considerable increase in the retention time (2.4 min) of TPL (polar compound). Therefore, C8 column with 0.1 M dipotassium phosphate buffer (pH 6.8) and ACN at a ratio of 50:50 v/v was selected for further studies表1。
表1:高效液相色谱条件优化TPL的估计
验证研究
特异性(选择性)
特异性是能够评估明确的分析物的存在组件可能会出现。通常这些可能包括杂质、降解、矩阵等分析的选择性是由安慰剂分析。安慰剂平板配方包含所有的正常成分除了TPL是为本研究准备的。他们以同样的方式对待正常样本,他们注射的研究其他因素干扰TPL的选择性分离。从安慰剂(获得的色谱图图2所示),TPL标准溶液图3和图4所示。峰纯度超过99.0%。
图2:典型的高效液相色谱色谱的安慰剂
图3:典型的色谱Tapentadol在标准的解决方案
图4:的典型色谱Tapentadol片剂剂型
分析的线性过程的能力(在一定范围内)获得的测试结果直接与浓度成正比(量)分析物的样品。TPL的校准曲线构造线性浓度范围的200 - 600μg /毫升。峰地区TPL策划反对TPL浓度和线性回归分析进行合成曲线。在一式三份样本分析浓度。建立了校准曲线,发现相关系数R2值观察研究药物的0.999。通常情况下,校准曲线的回归方程被发现y = x + 32996 (21349表2)
表2:线性TPL的数据
定量限和LOD
中被测物能被定量测定的最低金额,可以检测到,但不一定用数量来表示检测极限(LOD)或检出限和定量限的分析过程中被测物能被定量测定的最低金额,可以定量地确定合适的精密度和准确度是定量限制或限制的定量(定量限)基于信噪比和LOD确定定量限,并决定使用一种分析反应十和背景噪音的三倍,分别为(14]。定量限是42.9257合成% R.S.D.μg /毫升0.4% (n = 5)。LOD被发现12.8777μg /毫升
精度
分析过程的精确表达了亲密之间的协议(分散程度)的一系列测量获得的多个采样相同的均匀样品在规定的条件下。精密的分析研究对重复性和再现性。可重复性研究注射6复制的样本400μg % R.S. /毫升标准D值是1.04。Inter-day精度评估通过注入相同的浓度超过连续3天,导致平均% R.S.D. 1.08%。方法的强度评估通过比较内部和inter-day化验结果TPL已由两个分析师。% R.S.D值为内部和inter-day化验TPL的引用配方中执行相同的实验室的两个分析师没有超过2%,因此说明方法的强度。TPL的平均保留时间为2.4分钟R.S.D.百分比为1.2%。所示的数据表3。
表3:旋进TPL的数据
精度
分析过程的准确性表达亲密之间的协议价值被接受作为一个传统的真实价值或一个公认的参考价值和价值发现。方法的精度是由调查药物在三个层次的复苏200μg /毫升,400μg /毫升,600μg /毫升安慰剂混合物(乳糖、玉米淀粉、甘露醇、磷酸氢钙、碳酸镁,明胶,polyvidone微晶纤维素,硬脂酸镁,二氧化硅,二氧化钛)飙升与API的解决方案。每个浓度进行了分析一式三份(表4)。
表4:TPL的准确性(复苏)数据
鲁棒性
分析性程序的健壮性是衡量其能力不受影响小,但故意变化方法参数和提供了一个指示正常使用时的可靠性。开发方法的鲁棒性是由各种条件下样品的分析方法参数,如流量、温度和pH值的缓冲区。流动相的pH值的变化(0.1%邻位的磷酸)、流量和1.5毫升/分钟的温度50°C没有显著影响色谱分辨率高效液相色谱方法。
定量测定在制药配方
20片每个TPL分别称重,碾碎,粉末的体重相当于100毫克和流动相稀释,用了15分钟,进一步稀释是用流动相获得浓度在线性范围内(200 - 600年μg /毫升)。所有的样品都透过whatmann(聚丙烯,0.45毫米)注射器过滤器,将样品注入高效液相色谱仪器。所示的试验结果表2。
一个验证的高效液相色谱分析方法测定了TPL的API和剂型。压力测试的结果进行根据国际协调会议(我)指南显示,该方法选择性和稳定性指示。该方法简单、准确、精确、具体,且有能力单独降解产物的药物和辅料片剂剂型。该方法适用于TPL的常规分析大部分API粉或制药剂型。简单的方法允许应用程序在实验室缺乏先进的分析仪器,如质或气。这些方法是复杂的和昂贵的,而不是一个简单的HPLC-UV方法。此外,高效液相色谱过程可以应用在加速稳定性试验获得的样本的分析来预测药物的有效期。
作者感谢杂药物有限公司,海得拉巴,印度证明Tapentadol样本的礼物。
