产物的开发和验证方法,同时估计阿托伐他汀钙和雷米普利片剂剂型

文摘

摘要目的:一种新方法建立了同时估计阿托伐他汀钙和雷米普利,rp方法。

方法:使用phenomenex luna C18色谱分离进行(250×4.6毫米,5μm)柱的流动相组成甲醇除了磷酸摇篮(0.1% v / v三乙胺pH值4.5平衡0.1% v / v orthophosphoric苛刻)已交付1毫升/分钟的流量和使用水高效液相色谱检测进行了自动取样器,分离模块2695高效液相色谱系统PDA检测器波长254 nm。运行时间12分钟。

结果:阿托伐他汀的保留时间和雷米普利分别为3.02和6.10分钟。在线性相关系数值是0.999和浓度范围20 - 70μg /毫升阿托伐他汀和雷米普利20 - 70μg /毫升。的准确性,恢复被发现阿托伐他汀和雷米普利的99.8%和99.8%。LOD和阿托伐他汀2.95和9.96的定量限。LOD和雷米普利定量限3.34和10.05

结论:研究的结果表明,该战€高效液相色谱法是一种简单、准确、精确、崎岖、健壮、快速、重现性好,这可能是有用的常规估计的阿托伐他汀钙和雷米普利片剂剂型。

关键字

大肠杆菌,生物传感器,甘油,适应实验室进化,L-serine

介绍

阿托伐他汀(立普妥®)是一种他汀类的降脂药物包括药物。通过抑制内源性胆固醇在肝脏的生产,他汀类药物降低胆固醇和血脂水平异常,并最终降低心血管疾病的风险。更具体地说,他汀类药物竞争性抑制酶羟基甲基Glutaryl-Coenzyme(β)还原酶,它催化转化β-甲羟戊酸(1]。这种转换是一个重要的代谢反应参与生产的几个化合物参与脂质代谢和运输,包括胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)(有时称为“坏胆固醇”),和极低密度脂蛋白(VLDL)。IUPAC钙bis ((3 r、5 r) 7 - [2 - (4-fluorophenyl) 3-phenyl-4 (phenylcarbamoyl) 5 - (propan-2-yl) 1 h-pyrrol-1-yl] 3 5-dihydroxyheptanoate)。化学分子式C_66年H_68年CaF₂N₄O₁₀。分子量1155.34。阿托伐他汀钙盐水合物是溶于乙醇等有机溶剂DMSO,和二甲基甲酰胺(DMF),应该用一种惰性气体净化。阿托伐他汀的溶解度(钙盐水合物)在这些溶剂大约是0.5,15日分别为25毫克/毫升。

雷米普利是一种前体药物属于血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂类药物。这是ramiprilat在肝脏代谢,在较小程度上,肾脏。Ramiprilat是一个强大的、有竞争力的ACE抑制剂,我负责血管紧张素转换酶(ATI)血管紧张素ⅱ(ATII)。ATII调节血压和血管紧张素-醛固酮系统是一个关键组成部分(老城)。雷米普利可用于治疗高血压、充血性心力衰竭,肾病,并减少死亡,心肌梗塞和中风的高危个体心血管事件(2]。国际命名(2 s, 3, 6) 1 - [(2 s) 2 - {((2 s) 1-ethoxy-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl)氨基}propanoyl] -octahydrocyclopenta [b] pyrrole-2-carboxylicacid。化学分子式C₂₃H₃₂N₂O₅。分子量416.58。雷米普利溶于有机溶剂,如乙醇,DMSO,和二甲基甲酰胺(DMF),应该用一种惰性气体净化。雷米普利的溶解度约25毫克/毫升乙醇是大约30毫克/毫升在DMSO和DMF (图1和2)。

文献调查显示,很少有方法在文献中报道的分析阿托伐他汀钙和雷米普利单独或与其他药物在纯形式和药物配方,rp (2- - - - - -7],RP-LC [8]。针对需要一个合适的、具有成本效益的rp的常规分析方法同时估计阿托伐他汀钙和雷米普利片剂剂型的,试图开发简单、精确、准确和成本效益分析方法估算的阿托伐他汀钙和雷米普利。该方法将根据我的指导方针进行验证。提出工作的目标是开发一种新的、简单、灵敏、准确、经济的分析方法和验证的同时估计阿托伐他汀钙利用rp和雷米普利片剂剂型。验证了方法按照我预期的分析应用程序即指南。,应用该方法分析药物的剂型。同时应用开发方法估计阿托伐他汀钙和雷米普利片剂剂型。

材料和方法

化学药品和试剂

阿托伐他汀钙和雷米普利买来腺印度制药有限公司。NaH2PO4分析年级由finerchem有限,磷酸(默克公司)、高效液相色谱法和水和甲醇(Lichrosolv(默克公司)。

设备和色谱条件

色谱法是进行水域2695高效液相色谱系统,配备一个自动取样器,紫外检测器和授权2软件。分析是在274纳米柱对称C 18(4.6×150毫米,5μm),尺寸25°C的温度。2.5优化流动相由钠磷酸盐缓冲剂pH值和乙腈(20:80)。流率维持在1毫升/分钟和运行时间12分钟。

准备的解决方案

缓冲区的准备:准确称量和1.3克的邻位的磷酸二氢钾溶解在500毫升的水和调整ph值- 2.6正磷酸和脱气超声波水浴10分钟,然后透过0.45μ过滤器在真空过滤。

流动相的制备:准确地测量了200毫升的甲醇和800毫升的水和超声波脱气水混合洗澡十分钟,然后透过0.45μ过滤器在真空过滤。

稀释剂:流动相是用作稀释剂。

标准储备溶液的制备:准确称量和转让10毫克的阿托伐他汀和10毫克的雷米普利工作标准为100毫升清洁干燥的容量瓶添加少量的稀释剂和用溶解完全,使体积达到标准的相同的溶剂(原液)。进一步吸管1.5毫升的上述股票的解决方案为10毫升容量瓶和稀释剂稀释到马克。

准备样本股票的解决方案:准确称量和转移相当于25毫克的阿托伐他汀和25毫克的雷米普利样本为100毫升清洁干燥的容量瓶添加少量的稀释剂和用溶解完全,使体积达到标准的相同的溶剂(原液)。进一步吸管0.1毫升的上述股票的解决方案为10毫升容量瓶和稀释剂稀释到马克。

过程:20μL标准和样品的解决方案被注入的分类法和阿托伐他汀和雷米普利测量峰值区域。

方法

发达色谱系统适用性的验证方法,线性精度、精度、强度和鲁棒性按照我的指导方针。

系统适用性参数:评估系统适用性参数如保留时间,拖尾因子和USP理论塔板数,允许流动相流经列1.0毫升/分钟的流量平衡列在环境温度12分钟。色谱分离是通过注入一卷20μL标准phenomenex luna C18(250×4.6毫米,5μm),合成甲醇的移动阶段除了磷酸摇篮被允许流过的列在流量1.0毫升/分钟。保留时间,拖尾因子和USP理论塔板数的开发方法所示表1。

试验药品配方:该验证方法已成功应用于确定阿托伐他汀和雷米普利片剂剂型。结果获得了阿托伐他汀和雷米普利相当与相应的标签数量和他们所示表2。

分析方法的验证

线性和范围:股票的解决方案是由溶解适量的阿托伐他汀和7毫升的稀释剂,进一步用稀释剂稀释至所需浓度。雷米普利的解决方案是准备在5个浓度水平从800μg /毫升到2400μg /毫升的阿托伐他汀和30μg /毫升到60μg /毫升的雷米普利。注入每一层色谱系统和测量峰面积。画一个图的峰面积与浓度(浓度轴和轴峰面积)和计算相关系数。所示的结果表3。

精度的研究:的准确性取决于帮助恢复研究。恢复方法进行了三个层面的50%,100%,150%。色谱系统注入的标准解决方案。计算发现量和添加量对阿托伐他汀和雷米普利和计算个人恢复,恢复值。所示的结果表4和5。

精密的研究:精确计算系数的方差六注射复制的标准。六次的标准解决方案是注射,并测量了区域所有六个注射在高效液相色谱法。%的面积RSD为六个复制注射被发现。所示的结果表6和7。

强度:评估方法的中间精密度、精密执行在不同的一天。5倍和测量的标准解决方案是注射在高效液相色谱中的应用五个注射的区域。%的面积RSD为五个复制注射被发现。所示的结果表8和9。

鲁棒性:的鲁棒性,故意改变流量,流动相组成、温度变化来评估影响的方法。流量是不同±0.1 ml / min。所示的结果表10和11。

LOD和定量限:反的敏感性决定从LOD和定量限。从校准曲线计算使用以下方程按照我的指导方针。所示的结果表12。

LOD = 3.3σ/ S
定量限= 10σ/ S,
标准差σ= y轴截距的回归线
S =校准曲线的斜率

结果与讨论

表1。系统适用性参数。

表2。雷米普利和阿托伐他汀试验结果。

表3。线性结果雷米普利和阿托伐他汀。

表4。雷米普利显示精度的结果。

表5所示。阿托伐他汀显示精度的结果。

表6所示。雷米普利精确结果。

表7所示。阿托伐他汀的精确结果。

表8所示。雷米普利和阿托伐他汀的强度结果。

表9所示。雷米普利和阿托伐他汀的强度结果。

鲁棒性结果

表10。雷米普利和阿托伐他汀流变化结果。

表11所示。结果不一致的影响在流动相配置(有机相)。

表12。LOD,阿托伐他汀和雷米普利的定量限。

结论

拟议中的发现是简单,高效液相色谱法(HPLC)同时估计精确、准确和敏感的阿托伐他汀和雷米普利制药剂型。因此,这种方法可以很容易和方便地采用常规质量控制分析的阿托伐他汀和雷米普利纯及其药物剂型。

引用

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