美马哈拉施特拉邦制药研究所,麻省理工学院校园,Paud路,Kothrud,普纳- 411038,印度马哈拉施特拉邦
收到日期:2015年6月27日;接受日期:2015年8月13日;发表日期:2015年8月21日
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目的:开发简单、快速和精确的液相色谱法同时测定Mometasone糠酸盐(MF)、水杨酸(SA), Methylparaben (MP)和尼泊金丙酯(PP)药物制剂形式。方法:权力平等主义的分离MF, SA,议员和PP通过使用Kromasil C18(250×4.6毫米,5µm)分析柱,流动相乙腈:使用0.1%醋酸(比例% v / v)在0.8毫升/分钟的流量。列保持在30°C和探测器被设定为264海里。样品中的分析物浓度是衡量重量的基础上避免内部标准。根据我分析方法验证了方法验证指导方针。结果:开发方法是线性相关系数> 0.998的所有分析物。曼氏金融的复苏值、SA、议员和PP介于98.56 - 101.70%,% RSD为总是小于1.17。独立变量的范围用于优化ACN - 60 - 90%, Temp - 30 - 50ºC和流量0.8 - -1.0毫升/分钟。这些独立变量在尾矿的影响因子(Tf)和决议(Rs)进行评估。使用此策略,数学模型被定义为分离并获得了响应面,同时优化通过能源部的反应。 Conclusion: Optimised RP-HPLC-PDA method found to be accurate, precise, specific and经济运行时间较短。方法将有用的定性和定量分析的商业配方在制药行业和研究实验室。
Mometasone糠酸盐、水杨酸、Methylparaben,尼泊金丙酯,实验设计、响应面图,RP-HPLCPDA,权力平等主义的,药膏配方
目前的工作描述一个简单的反向阶段,权力平等主义的LC方法MF的决心,SA、议员和PP的药膏。Mometasone糠酸盐(MF)是化学(11β,16α)9日21-dichloro-11-hydroxy-16-methyl-3, 20-dioxopregna-1, 4-dien-17 - yl 2-furoate,它是一个局部皮质类固醇;它有抗炎、止痒和vasoconstrictive活动(1]。水杨酸(SA)是化学2-hydroxybenzoic酸抑菌、抑菌和角质层分离的行为(2]。尼泊金甲酯防腐剂的化学公式CH3(C6H4(OH)首席运营官),是羟基苯甲酸甲酯(3]。丙尼泊金酯对羟基苯甲酸丙酯,化学是钠(C3H7(C6H4首席运营官)O)和作为食品添加剂和抗真菌保护(4]。曼氏金融报告在USP (5)和欧盟(6),文献调查表明有稳定indicating-HPLC [7,8和质9),高效液相色谱法测定方法可用于MF决心结合其他分析物在局部10),计量剂量配方(11)和薄层色谱方法对其决心在局部制剂(12,13]。有各种方法报道SA包括紫外光谱(14]。高效液相色谱法(15)方法测定结合其他分析物局部配方。效果(16)方法在局部的决心准备报道。有各种方法报道议员和PP包括紫外光谱17),和液体色谱的方法确定其个人或结合其他分析物局部配方和食品18- - - - - -21]。
文学的调查显示,没有方法可以确定这四个分析物结合配方中出现在商业市场。防腐剂的进一步评估控制配方的质量是至关重要的根据我问1和Q 8指南(22,23]。因此感到有必要开发高效液相色谱法分析药物和方法防腐剂同时商业制剂形式。高效液相色谱法是广泛使用,接受和多功能工具分析食品和药品。我们的目标是开发一个方法估计这些分析物在更短的时间内,发展低成本的方法。因此这项研究的目的是开发和验证敏感,精确,精确和特定的高效液相色谱方法测定MF、SA、PP和MP同时在配方按我分析方法验证指南(24]。
材料和试剂
MF(%纯度,99.6)被Avik天才制药有限公司、伟碧,SA(%纯度,99.8),国会议员和PP被Nulife制药Pvt。礼物,浦那。高效液相色谱级乙腈(ACN),甲醇和分析试剂级醋酸买来研究实验室,孟买,蒸馏水是可以在实验室规模的两倍。膏配方HH萨利克(10 g)生产的M / s颅脑Pharmaceutica Baddi,塘鹅(HP)包含,MF 0.1% w / w, SA 3.5% w / w,议员0.2% w / w和PP 0.02% w / w从当地市场购买和使用进行分析。
仪器及色谱条件
高效液相色谱系统由一个二进制泵(模型水域515高效液相色谱泵),自动取样器(模型717 +自动取样器),列加热器(模型CHM,老不。A08CHM 289 m)和PDA检测器(水域2998)。使用授权,执行数据收集和分析软件(水域Inc .)版本2。分离是实现Kromasil C18柱(250毫米×4.6毫米,5.0μ)保持在30°C。权力平等主义的洗脱ACN: 0.1%棉酚(60:40% v / v)为流动相流速0.8毫升/分钟。检测监控在264 nm和注射量是20μl。
准备和校准曲线的标准解决方案
标准的曼氏金融股票的解决方案,包含1000μg / SA、议员和PP毫升在乙腈溶解适量准备单独的每个单独的标准。研究每个分析物的线性和范围,包含曼氏金融解决方案的混合标准工作,SA,议员和PP准备从1 - 10μg /毫升,35 - 350μg /毫升,2 - 20μg /毫升和0.2 - 2μg / ml,分别在流动相,注入到列。校准曲线被绘制为药物的浓度与峰面积响应每个分析物。
系统适用性测试(SST)和配方的分析
对于系统适用性测试(SST),标准溶液包含MF、SA、议员、PP、浓度5,175年,10岁和1μg / m,分别由混合,稀释股票解决方案和流动相。系统适用性决定从六个复制注射对海温标准样品分析之前。估计分析物形成的药膏,2 g的配方相当于2毫克的MF(70毫克的SA 4毫克的议员和0.4毫克的PP)是称重和转移到100毫升容量瓶包含60毫升的乙腈和热水浴加热5 - 10分钟。进一步的解决方案是用了20分钟,与流动相体积是100毫升0.45微米的滤膜过滤。滤液与流动相得到适当稀释的溶液5μg /毫升的MF(175μg /毫升的SA, 10μg /毫升的议员和1μg /毫升的PP)和注射的柱色谱。
方法验证
的高效液相色谱方法验证精度、准确性、特异性、灵敏度、鲁棒性、解决方案稳定性和线性根据我的指导方针。
重复性精度分析方法研究了六次注入目标分析物的浓度和% RDS计算。Inter-day盘中方法精度确定使用三个浓度和三个复制。复苏的试验方法评价辅料的标准。恢复三个不同的测试方法量(80、100和120%)的标准添加到preanalysed配方和使用开发的高效液相色谱分析方法。检测极限(LOD)和限制的定量(定量限)值的计算是通过使用σ响应(SD)和b(校准曲线的斜率)使用方程,LOD =(3.3×σ)/ b和定量限=(10×σ)/ b。计算方法的灵敏度值被反复证实注射含有大量的被分析物的样品范围的LOD和定量限。确定方法的鲁棒性,最后的实验条件是故意改变,结果检查。流量的变化是±5%;列温度±2°C;列来自不同供应商的影响进行了研究;测量波长不同的±1海里;注射体积改变了±2μl,和有机溶剂内容改变了±5%。药物的短期稳定的解决方案是由储存在室温下12 h,然后分析;的长期稳定性是由储存在4°C 30天。Autosampler /流动相的稳定性取决于Autosampler保持24小时的样品。
方法开发和优化的色谱条件
得到了明确的对称峰在优化条件下测定洗脱液的反应后彻底的实验结果可以总结。两列用于性能调查,包括Kromasil C18(4.6×250毫米,5μ)和水域,对称C18(4.6×250毫米,5μ)列,第一列是最合适的一个,因为它产生对称的峰高分辨率。
Trial-1发展与流动相是基于文献信息ACN:甲醇:水(25:25:50% v / v / v)在环境温度。此外,流动相组成的几个修改尝试为了研究改变色谱系统的选择性的可能性。这些修改包括有机溶剂的比例的变化,pH值(0.3 - -6.5),流量(0.7 - -1.3毫升/分钟),温度(环境35°C),并使用不同的列。这是观察到乙腈作为有机溶剂和Kromasil C18柱给更好的洗脱峰的形状和系统适用性参数。因此乙腈作为有机相,Kromasil C18柱被认为是进一步发展试验。
此外,改变ACN的比率的影响(40 - 80%)选择性和保留时间进行了考察。图1一个显示代表色谱优化试验中获得的1。在实验2中,60% ACN被发现是最合适的,给好解决高峰和高理论板块。流量的影响在高峰的形成和分离研究了不同流量从0.5 - -1.0毫升/分钟;0.8毫升/分钟的流量是可选的很好的分离和解决高峰在合理的时间。最初SA显示峰值不对称(Tf 1.5 - -1.8),添加0.1%冰醋酸(棉酚)的流动相,对称峰值与跟踪观察,1.0 - -1.2,而不影响其他山峰(图1 b)。MF的紫外检测器响应、SA、议员和PP进行了研究,发现最好的波长为264 nm (图2)没有任何显示最高峰敏感性基线干扰。
图1:代表色谱试验期间获得A, B和C。
图2:在线表面光谱的分析物。
因此试验3执行使用kromasil C18柱(250毫米×4.6毫米,5.0μ),ACN: 0.1%棉酚(60:40% v / v)为流动相为0.8毫升流量和列保持在30°C。充分实现分离的色谱条件和相同条件下被认为是研究各种参数的影响,为进一步开发利用科学方法和优化色谱法(图1 c)。色谱数据形式试验3饲料在能源部软件,选择因素与水平所示表1饲料在软件和软件建立与各种参数的水平(19分表2)。
| 的名字 | 单位 | 水平 | |
|---|---|---|---|
| 低 | 高 | ||
| 流量 | 毫升/分钟 | 0.8 | 1.0 |
| 浓度的乙腈 | v / v | 60 | 90年 |
| 温度 | °C | 30. | 50 |
表1:设计因素。
所有实验的顺序是随机的,以最小化控制变量的影响。复制(n = 6)中央点进行估计实验误差。色谱数据的19组参数是作为能源部提出的软件生成的。按运行实验,实验试验分析了生成的数据和结果进行编译(表2)。
| 因素* | 实验反应# | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 运行 | 一个 | B | 临时(°C)。 | Tf页 | R年代页和SA | TfSA | R年代SA和议员 | Tf国会议员 | R年代国会议员和曼氏金融 | Tf曼氏金融 |
| 1 | 0.80 | 80.00 | 30. | 5.31 | 1.035 | 4.12 | 1.913 | 4.23 | 3.521 | 5.2 |
| 2 | 0.90 | 70.00 | 30. | 2.9 | 1.352 | 2.65 | 2.084 | 2.51 | 4.416 | 2.42 |
| 3 | 1.00 | 70.00 | 32 | 3.4 | 1.428 | 2.9 | 2.171 | 2.7 | 3.825 | 2.72 |
| 4 | 0.90 | 60.00 | 32 | 2.6 | 1.725 | 2.4 | 2.436 | 2.5 | 5.175 | 2.4 |
| 5 | 0.90 | 80.00 | 30. | 5.52 | 1.004 | 4.62 | 1.845 | 4.92 | 3.647 | 5.84 |
| 6 | 1.00 | 70.00 | 28 | 2.9 | 1.697 | 2.6 | 2.299 | 2.3 | 4.867 | 2.3 |
| 7 | 0.80 | 60.00 | 30. | 1.5 | 1.119 | 1.61 | 2.705 | 1.42 | 5.011 | 1.31 |
| 8 | 1.00 | 60.00 | 32 | 2.8 | 1.792 | 2.7 | 2.421 | 2.5 | 5.231 | 2.3 |
| 9 | 0.90 | 60.00 | 28 | 1.6 | 2.101 | 1.59 | 2.813 | 1.61 | 6.026 | 1.54 |
| 10 | 0.80 | 80.00 | 28 | 4.96 | 1.011 | 4.52 | 2.152 | 4.87 | 3.592 | 5.63 |
| 11 | 1.00 | 80.00 | 30. | 5.75 | 1.105 | 4.75 | 1.654 | 5.32 | 3.304 | 6.23 |
| 12 | 1.00 | 80.00 | 32 | 5.81 | 1.002 | 5.21 | 1.521 | 5.62 | 3.162 | 5.1 |
| 13 | 0.90 | 60.00 | 30. | 2.3 | 2.025 | 2.2 | 2.612 | 2.1 | 5.725 | 2.1 |
| 14 | 0.90 | 70.00 | 28 | 2.4 | 1.063 | 2.41 | 2.131 | 2.6 | 5.326 | 2.26 |
| 15 | 0.80 | 60.00 | 30. | 2.5 | 1.756 | 1.9 | 2.135 | 1.8 | 5.531 | 1.7 |
| 16 | 0.80 | 60.00 | 32 | 1.7 | 1.910 | 1.82 | 2.525 | 1.7 | 4.803 | 1.54 |
| 17 | 0.80 | 60.00 | 28 | 1.1 | 2.394 | 1.31 | 2.998 | 1 | 5.946 | 1.1 |
| 18 | 1.00 | 60.00 | 28 | 1.7 | 2.016 | 1.73 | 2.524 | 1.85 | 5.792 | 1.72 |
| 19 | 0.80 | 70.00 | 28 | 2.1 | 1.305 | 2.21 | 2.326 | 2.24 | 5.411 | 1.9 |
*流率、B-concentration甲醇、C - pH值和# Tf:尾矿因素和R年代:分辨率。
表2:中心复合设计、响应和软件验证数据。
响应面图
开始前一个优化过程,重要的是调查这个词用析因设计中心。32析因设计的方差分析生成显示曲率是重要的反应(Rs)和拖尾因子(Tf)因为假定值小于0.0525]。这意味着二次模型应考虑模型的分离过程。为了获得二阶预测模型,采用中心复合设计(CCD),它是一种设计类型下的响应曲面模型。选择CCD由于其灵活性和可应用于优化的高效液相色谱分离的主要因素和交互影响的理解。选择关键因素进行优化是基于初步实验和先验知识从能源部文学(表3)。
| 响应模型 | 党卫军 | df | 女士 | F值 | P值 | R2 | 精度 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 尾矿(PP) | 43.65 | 9 | 4.85 | 357.23 | < 0.0001 | 0.9972 | 56.262 |
| 决议(PP与SA) | 1.43 | 3 | 0.48 | 34.61 | < 0.0001 | 0.8738 | 13.391 |
| 尾矿(SA) | 27.36 | 9 | 3.04 | 138.98 | < 0.0001 | 0.9929 | 34.179 |
| Rs (SA)和议员之间) | 0.50 | 3 | 0.17 | 43.45 | < 0.0001 | 0.8968 | 20.337 |
| 尾矿(MP) | 35.80 | 9 | 3.98 | 76.77 | < 0.0001 | 0.9871 | 24.913 |
| Rs (MP和MF之间) | 0.78 | 3 | 0.26 | 76.68 | < 0.0001 | 0.9388 | 24.719 |
| 尾矿(MF) | 52.37 | 9 | 5.82 | 100.25 | < 0.0001 | 0.9901 | 28.211 |
ss:平方之和,df:自由度,女士:意味着广场。
表3:方差分析用于生成统计模型。
响应面分析实验设计是用于确定独立变量的影响在所有可能的因变量。在本实验设计的三个因素,即流量、乙腈浓度和温度被认为是对尾矿和分辨率的影响。
变量的影响在尾矿和分辨率公式所示下列方程(eq。1 - 7)
R1 b = 2.95 + 0.38 + 1.72 + 0.28 c - 0.12 - 0.04 ab + ac - 0.13 - bc - 0.12 a2+ 0.94 b2 - 0.13 c2(1)
R2 = 0.34 + (4.299 e - 004 a) -0.33 - 0.03 b - c (2)
R3 b = 2.55 + 0.34 + 1.38 + 0.12 + 0.08加元ab + 0.13 ac - 0.25 - bc - 0.16 a2+ 0.81 b2+ 0.06摄氏度2(3)
R4 = 0.77 - -0.06 - 0.17 - 0.05 b - c (4)
R5 b = 2.44 + 0.37 + 1.61 + 0.07 + 0.08加元ab + 0.18 ac - 0.24 - bc - 0.29 a2+ 1.06 b2+ 0.17摄氏度2(5)
R6 = 1.48 + (2.711 e - 003 a) -0.2 - 0.1 b - c (6) R7 b = 2.45 + 0.36 + 1.92 - 0.28 - 0.04 c + ab + ac - 0.44 - bc - 0.29 - 0.072+ 1.47 b2-0.08摄氏度2(7)
在上面的方程参数A、B和C是流量,分别的乙腈浓度和温度。
从方程1、3、5和7的因素A, B和C对尾矿分别显示了积极的影响。结合AB和交流展示了积极的效果除了eq.1, eq。公元前显示了负面影响。当参数A、B和C增加显示的负面影响(翻倍),B显示了积极的影响和C显示了eq.1和eq.3积极影响和负面影响eq.7 (图3 - 9)。
图3:(一)响应曲面图显示流量的影响和乙腈浓度在尾矿(PP)和(B)计数器情节显示不同程度的流量之间的关系和乙腈的浓度。
图4:(一)响应曲面图显示流量和浓度的乙腈对分辨率的影响{PP与SA}和(B)柜台情节之间的关系显示各种级别的流量和浓度的乙腈。
图5:(一)响应曲面图显示流量和乙腈浓度的影响尾矿(SA)和(B)计数器情节表现出不同程度的流量之间的关系和乙腈浓度。
图6:(一)响应曲面图显示流量和浓度的乙腈对分辨率的影响{SA之间7 MP}和(B)柜台情节之间的关系显示各种级别的流量和浓度的乙腈。
图7:(一)响应曲面图显示流量的影响和乙腈浓度对尾矿(MP)和(B)计数器情节显示不同程度的流量之间的关系和乙腈的浓度。
图8:(一)响应曲面图显示流量和浓度的乙腈对分辨率的影响{议员与MF}和(B)柜台情节之间的关系显示各种级别的流量和浓度的乙腈。
图9:(一)响应曲面图显示流量和乙腈浓度的影响尾矿(MF)和(B)计数器情节表现出不同程度的流量之间的关系和乙腈浓度。
足够的精度值测量的信噪比和比例大于4是可取的26]。改变ACN的一部分的研究显示,温度和流量低到高显示对分析物的保留时间和分辨率的影响。计数器的阴谋和响应曲面图的尾矿和分辨率(图3 - 9)。反情节解释各级流量之间的关系和甲醇的浓度。响应曲面图代表流量和甲醇浓度对尾矿的影响和解决药物(%乙腈浓度绘制与流量当temp.中心举行恒定值)。计数器和响应图生成与优化模型显示因子A, B和C对分析物的分离产生重大影响。
验证软件设计专家
后由设计专家软件统计分析,预测优化结果设计专家所示是记录和批17。(软件生成的)预测结果与观测结果(实验值)和实验验证所示表4。使用获得的色谱标准提出了优化条件图10和典型的色谱软膏制定提出了图11。
图10:标准使用的典型色谱条件进行了优化。
图11:典型的色谱膏的配方。
| 老不。 | 17批。 | 预测价值 | 观测值 | SEM * | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 尾矿 | 决议 | 尾矿 | 决议 | |||
| 1 | 页 | 1.04 | - - - - - - - | 1.04 | - - - - - - - - - - | 0.0866 |
| 2 | SA | 1.4 | 2.01 | 1.08 | 2.181 | 0.1099 |
| 3 | 国会议员 | 1.28 | 2.88 | 1.21 | 3.3047 | 0.1692 |
| 4 | 曼氏金融 | 1.02 | 6.09 | 1.05 | 5.923 | 0.1791 |
* SEM:均值的标准误差。
表4。设计实验的验证软件。
方法验证
按照我方法验证指南线性、范围、准确度、精度、LOD和定量限、特异性、溶液稳定性和鲁棒性。
线性、范围和方法灵敏度:线性决心MF的1 - 10的范围μg /毫升,SA 35 - 350μg /毫升,2 - 20议员μg /毫升和0.2页2μg /毫升。相关系数值> 0.9988 (n = 5)。回归方程线性和范围提出了数据表1。优秀的响应因子之间存在相关性和浓度的药物浓度范围内显示。低的LOD值和定量限指示灵敏度的方法。结果线性、范围和方法敏感性提出了表5。
| 参数/分析物名称 | 页 | SA | 国会议员 | 曼氏金融 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 范围(µg /毫升) | 0.2 - 2 | 35 - 350 | 2 - 20 | 1 - 10 | |
| 回归 y = mx + c |
拦截(c) | 5940.4 | 4234.1 | 9010.2 | 5723.1 |
| 斜率(m) | 33698年 | 249012年 | 409213年 | 9061年 | |
| r | 0.9988 | 0.9992 | 0.9989 | 0.9998 | |
| Methodsensitivity | LOD(µg /毫升) | 0.00197 | 0.00681 | 0.4901 | 0.0472 |
| 定量限(µg /毫升) | 0.0596 | 0.02065 | 1.4852 | 0.1425 | |
表5:线性、范围和方法敏感数据。
配方分析,系统适用性测试(SST),准确度和精密度研究:商业药膏配方中描述的材料和试剂部分被用于这项研究。分析物的分析总是在100±1.45%。
相对标准偏差总是< 1.5。风场参数的值中的分析物被限制。测试结果的准确性分析物在药物产品的技术标准,复苏的所有分析物的愤怒100±1.7%,% RSD为总是< 1.17。配方分析、系统适用性、准确性和精度提出了研究数据表6。
| 参数/分析物名称 | 页 | SA | 国会议员 | 曼氏金融 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 配方试验,%相对标准偏差 | 101.45,1.5 | 100.65,0.3 | 99.93,0.89 | 100.33,0.88 | |
| 系统适用性数据 | |||||
| 保留时间(tR)分钟。 | 3.26 | 4.03 | 5.39 | 11.68 | |
| USP决议(RS) | 推荐- - - - - - | 2.18 | 3.30 | 5.92 | |
| 拖尾因子(Tf) | 1.040 | 1.08 | 1.21 | 1.05 | |
| 不。理论板块(N) | 2268.97 | 2493.88 | 3113.71 | 3968.27 | |
| 容量因子(k) | 2.25 | 3.03 | 4.39 | 1.06 | |
| %的复苏,%相对标准偏差在选择恢复的水平 | |||||
| 80% | 99.78,0.62 | 98.56,0.52 | 98.80,1.57 | 101.70,0.76 | |
| 100% | 100.78,1.02 | 101.48,0.84 | 100.21,1.17 | 98.73,0.49 | |
| 120% | 99.01,0.32 | 100.63,0.32 | 100.46,0.65 | 99.18,0.881 | |
| 精度,%相对标准偏差 | |||||
| 可重复性,n = 6 | 1.4 | 0.5 | 0.7 | 0.9 | |
| 盘中的精确显示,n = 3 x3times | 1.12,0.45 | 262.12,0.45 | 15.12,0.45 | 7.79,0.82 | |
| x5days Inter-day精度,n = 3 | 1.87,0.82 | 262.27,0.82 | 15.27,0.82 | 7.07,0.86 | |
表6:制定分析、系统适用性,准确度和精密度研究数据。
鲁棒性
上述研究是按程序执行。MF的解决方案包含5μg /毫升,175μg /毫升的SA, 10μg /毫升的议员和1μg /毫升的PP注入在列。复制的数量分析(n = 3)在3水平的因素(- 0 +)。流量的结果鲁棒性研究(tR)和柱温箱温度了表7。其他参数的鲁棒性研究结果即列从不同的供应商;测量波长的变化,改变注入体积和有机溶剂含量变化进行了研究。测定值和% RSD为确定每个参数的变化总是在极限水平。
| 因子(限制) | 水平 | AnalyteName | 系统适用性参数(SD) n = 3 | %化验,%取代,n = 3 | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| tR* | N | Rs | k * | ||||
| 流量(毫升/分钟)(±0.05毫升) | (-)0.75 | 页 | 3.258 | 2268年 | - - - - - - | 1.07 | 100.16,0.24 |
| SA | 4.033 | 2493年 | 2.18 | 3.03 | 98.97,0.16 | ||
| 国会议员 | 5.394 | 3113年 | 3.30 | 4.39 | 99.78,0.25 | ||
| 曼氏金融 | 11.64 | 3968年 | 2.22 | 2.26 | 101.04,0.27 | ||
| 0.85 (+) | 页 | 3.165 | 2212年 | - - - - - - | 1.07 | 100.15,0.78 | |
| SA | 3.989 | 2433年 | 2.154 | 3.06 | 98.98,0.24 | ||
| 国会议员 | 5.298 | 3102年 | 3.312 | 4.98 | 99.54,0.59 | ||
| 曼氏金融 | 11.45 | 3945年 | 2.35 | 2.14 | 101.41,0.49 | ||
| 柱温箱温度(ºC)(±2ºC) | (-)28 | 页 | 3.243 | 2257年 | - - - - - - | 1.05 | 101.3,0.29 |
| SA | 4.00 | 2453年 | 2.14 | 3.01 | 101.15,0.72 | ||
| 国会议员 | 5.28 | 3121年 | 3.32 | 4.23 | 99.89,0.47 | ||
| 曼氏金融 | 11.54 | 3945年 | 2.09 | 2.22 | 99.75,0.55 | ||
| (+)32 | 页 | 3.21 | 2257年 | - - - - - - | 1.05 | 101.3,0.29 | |
| SA | 3.956 | 2486年 | 2.21 | 3.03 | 101.12,1.27 | ||
| 国会议员 | 5.198 | 3143年 | 3.33 | 4.98 | 99.92,0.83 | ||
| 曼氏金融 | 11.25 | 3923年 | 2.12 | 2.17 | 101.6,0.95 | ||
表7:鲁棒性研究的结果。
特异性、溶液稳定性和流动相的稳定性
该方法的特异性是由峰纯度测试。峰纯度决心与PDA探测器,在峰角的值小于阈值峰值表明峰纯度。
长期和短期的结果,自动取样器曼氏金融的稳定性,SA,议员和PP的解决方案是从名义浓度计算,发现浓缩的。稳定性研究的结果在可接受的限制(98 - 102%)。RSD的测定分析物在溶液稳定性和流动相的稳定性实验在1.8%。没有观察到显著变化的内容分析物在溶液的稳定性和流动相的稳定性实验。峰纯度和方法的稳定性研究结果不满表8。
| 参数/分析物名称 | 页 | SA | 国会议员 | 曼氏金融 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 方法 特异性/峰纯度 |
峰角 | 0.46 | 0.77 | 0.35 | 0.21 |
| 峰阈值 | 0.67 | 1.02 | 0.56 | 0.53 | |
| 方法稳定(%相对标准偏差)n = 4 | 短期内 | 1.6 | 0.8 | 1.3 | 0.8 |
| 长期 | 1.8 | 0.6 | 1.4 | 0.7 | |
| 流动相 | 1.1 | 1.0 | 1.5 | 1.4 | |
表8:峰纯度和稳定性研究方法的结果。
高效液相色谱方法开发和验证按照我的指导方针。同时估计的方法是特定MF, SA、议员和PP在制药剂型。声明的方法有线性响应范围1 - 10μg MF /毫升,2 - 20μg 35 - 350 /毫升SAμg /毫升议员和0.2 - 2μg PP /毫升,准确和精确。%相对标准偏差在精度总是小于2和恢复各级研究。80年,100年,120%在98 - 102%的范围。测定值在98 - 102%的范围。鲁棒性研究没有任何明显的变化在不同的系统适用性参数和试验值是在限制。LOD和定量限的值表明,该方法是敏感的。统计分析证明,该方法适用于分析MF、SA、议员和PP的散装药品和制药配方没有任何辅料的干扰。
上述讨论和统计数据证明该方法简单、精确、准确和有一个广泛的工业应用,因此可用于自身的估计MF, SA,议员和PP同时形式完成样品和配方。
作者要感谢Nulife制药分公司,浦那(和Avik制药分公司,Vapi药物样品提供礼物。作者也感谢美管理和主要的马哈拉施特拉邦制药研究所浦那提供必要的设施。
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