紫外光谱法测定二甲双胍和西格列汀含量联立方程法的建立与验证

摘要

建立了一种简便、灵敏、快速、经济的紫外分光光度法测定西格列汀-二甲双胍纯剂型和片剂剂型的方法。二甲双胍在200 ~ 400 μ/ml之间线性，西格列汀在20 ~ 45 μ/ml之间线性。二甲双胍在232nm处最大吸光度，西格列汀在266nm处最大吸光度，通过应用验证参数确定和检查验证参数，如精密度、准确度和系统适用性参数。

关键字

二甲双胍，西格列汀，方法开发，验证，紫外光谱

简介

西格列汀是(3R) -3-氨基-1-[3-(三氟甲基)-6,8-二氢-5h-[1,2,4]三唑[3,4-c]吡嗪-7-基]-4-(2,4,5-三氟苯基)丁烷-1- 1，一种口服降糖药，可阻断二肽基肽酶4 (DPP-4)酶活性[1，2］．这种酶的抑制会导致活性肠促胰岛素、胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)和胃抑制多肽(GIP)的数量增加，从而显著增加胰岛素的分泌。进而降低血糖水平[3.］．

二甲双胍是3-(二氨基甲基)- 1,1 -二甲基胍，是口服降糖药中的双胍类药物[1，2］．它是治疗2型糖尿病的首选一线药物，降低基础和餐后血糖。本品为口服，治疗非胰岛素依赖型糖尿病[1］．

文献综述提示已有方法可用于西格列汀的估计[4-10]及二甲双胍[11，12]在紫外分光光度计和高效液相色谱仪等仪器的帮助下。本文试图建立一种精确、简便、经济的紫外分光光度法来同时测定它们。

材料与方法

蒸馏水是常用的溶剂。二甲双胍、西格列汀纯药购自Mylan Laboratories，含二甲双胍500mg、西格列汀50mg的Janumet商用片购自当地药店。仪器的规格和所维持的所有条件列于表1．

联立方程法

取二甲双胍和西格列汀标准溶液，分别在200-400nm范围内扫描其最大吸光度。二甲双胍在232nm(λ₁) &西格列汀266nm (λ₂)．在其线性范围内构建校准曲线。二甲双胍的线性范围为10 ~ 50μg/ml，西格列汀的线性范围为20 ~ 80μg/ml。

一个₁和一个₂CX和CY分别为二甲双胍和西格列汀的浓度。

实验

标准溶液的制备

二甲双胍和西格列汀各100mg，分别溶解于100ml容积瓶中，用蒸馏水补充容积。从上述原液中分别制备浓度为10μg/ml的二甲双胍和西格列汀。

样品溶液的制备

20片被粉碎，片剂粉末的重量相当于100毫克二甲双胍(其中还含有相当于10毫克西格列汀的片剂粉末)。将原液溶解在100毫升蒸馏水中制备。从上述溶液中提取10ml，配制成100ml。该溶液被认为是样品溶液，用于检测[13-17］．

结果与讨论

建立了一种经济、准确、精密度和灵敏度高的测定二甲双胍-西格列汀联合剂型的紫外分光光度法。优化了光谱条件。二甲双胍在西格列汀浓度10 ~ 50 μg/ml和20 ~ 80 μg/ml之间呈线性关系。二甲双胍和西格列汀的线性相关系数分别为0.99928和0.99977。检测限量及定量限量(表1)，用回归线的标准差和斜率计算。LOQ为3.3s/S, LOD为10s/S。所有优化条件均为(表1)．精度(表2)通过考虑日内和日间测量，从一批组合剂型中确定了该方法。准确度(表3)通过进行恢复研究来验证该方法的有效性。回收率在3个水平，即所选浓度的80,100,120%下测定。每个回收水平准备三个样品。化验(表4)配制浓度在标准溶液线性范围内的片粉溶液，制成复方片剂。采用标准偏差、相对标准差等统计公式对所有验证参数进行检验。结果在规定的范围内。

结论

目前二甲双胍和西格列汀的组合作为一个配方(Janumet 50 mg/500mg)上市。

采用紫外分光光度法对二甲双胍西格列汀固定剂量合用片进行同时测定。通过对验证参数的计算，验证了所提方法的有效性。分析在短时间内完成。

建立了二甲双胍与西格列汀合用片剂定量测定的紫外分光光度法。所得结果重复性好，可靠。统计参数和分析参数表明了方法的有效性和精密度。

结果表明，所建立的方法简便、快速、选择性强、精密度高，适用于药物制剂的常规分析。

确认

作者感谢海得拉巴的迈兰实验室为研究工作提供了二甲双胍和西格列汀的礼品样品。

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