光谱方法的开发和验证的同时估计别嘌呤醇,Ž±-酸结合平板电脑。

文摘

一个简单、准确和精确的光谱方法开发同步估计别嘌呤醇α-Lipoic酸的组合平板电脑剂型使用AUC &吸光度校正方法。曲线下的面积和吸收校正方法,α-Lipoic酸少吸光度与别嘌呤醇10到50 ppm这个方法我们认为曲线下的面积在310 nm - 390 nm的α-Lipoic酸发现线性在给定范围的浓度和没有干扰的别嘌呤醇在这个区域,因为它没有吸光度在这个地区。别嘌呤醇是由吸收校正方法估计在250海里。甲醇作为溶剂使用。线性浓度范围的观察10 - 50μg /毫升α-Lipoic和别嘌呤醇酸与相关系数0.9998和0.9999分别别嘌呤醇和α-Lipoic酸。意味着复苏被发现是别嘌呤醇和α-Lipoic酸101.35%和101.41%,分别。该方法被成功地申请了这两种药物的同时估计结合平板电脑。

关键字

别嘌呤醇,α-硫辛酸,AUC &吸收校正方法

介绍

别嘌呤醇,α-硫辛酸组合用于治疗痛风和高尿酸血。Allopurino lis嘌呤模拟;这是一个结构异构体次黄嘌呤(一种天然体内嘌呤)和黄嘌呤氧化酶的抑制剂。黄嘌呤氧化酶负责连续次黄嘌呤和黄嘌呤氧化,导致尿酸的生产(1,2]。它ischemically互变异构的混合1 h-pyrazolo [3,4 - d] pyrimidin-4-ol和1,5-dihydro-4H-pyrazolo [3,4 - d] pyrimidin-4-one。别嘌呤醇是一种白色或几乎白色结晶powderhaving分子量136.11克/摩尔(3,4]。别嘌呤醇的结构显示图1号。α-硫辛酸也称为硫辛酸和硫辛酸。α-硫辛酸是一种抗氧化剂。它中和自由基防止损害的细胞释放更多的尿酸。这也使得sensefor我们自己的,我们的身体产生更少的抗氧化剂,尿酸,当我们给外部抗氧化剂5- - - - - -7]。它是化学1,2-Dithiolane-3-pentanoic酸。α-Lipoic酸是一种白色或关闭——白色无定形,吸湿粉有分子量206.33克/摩尔(8,9]。α-硫辛酸的结构显示图2

回顾文献有关α-Lipoic和别嘌呤醇酸的定量分析表明,没有试图制定别嘌呤醇和α-Lipoic酸的分析方法。一些光谱方法和色谱方法已报告的评估个人药品(3,8,10- - - - - -27]。本研究的重点是开发和验证一个快速的、稳定的、具体的、和经济评估别嘌呤醇和光谱方法α-Lipoic酸结合平板电脑。

材料和方法

别嘌呤醇从Purvi化工分公司购买,α-Lipoic酸从蒸馏器天才制药公司。甲醇AR级(FINAR)使用方法开发。双光束紫外/可见分光光度计(日本岛津公司型号2450、日本)和光谱宽度2 nm, 1厘米石英细胞是用来测量吸光度的所有解决方案。

别嘌呤醇的标准储备溶液(氧化铝)

准确称取量别嘌呤醇(10毫克)被转移到一个单独的100毫升容量瓶和溶解和稀释的甲醇获得标准溶液浓度的氧化铝(100μg /毫升)。如果需要用10分钟。

标准储备溶液α-Lipoic酸(洛杉矶)

准确称取量α-硫辛酸(10毫克)被转移到一个单独的100毫升容量瓶和溶解和稀释的马克与甲醇获得标准溶液浓度(100μg /毫升)。

方法AUC &吸收校正方法

结合剂型别嘌呤醇α-Lipoic酸ispresentin 1:1ratios,分别。纯药物的吸收光谱及其混合记录使用甲醇assolvent between200 - 400 nm。A0是显示max。吸光度在250 nm和L显示马克斯。吸光度在328海里。LA少吸光度与别嘌呤醇10到50 ppm这个方法我们认为曲线下的面积在310 nm - 390 nm的LA发现线性在给定范围的浓度和没有干扰的氧化铝在这个区域,因为它没有吸光度在这个地区。别嘌呤醇是由吸收校正方法估计在250海里。表面光谱两种药物所示图3和线性光谱面积曲线所示图4。

校准曲线的氧化铝和洛杉矶

由五个浓度系列标准氧化铝和洛杉矶的解决方案从10 - 50μg /毫升。解决方案是由吸量1毫升,2毫升,3毫升,4毫升和5毫升标准氧化铝和LA原液和转换成一系列独立10毫升容量的玻璃瓶,成交量调整与甲醇马克。

估计氧化铝& LA平板剂型

20“ALUNO选项卡”平板电脑(含100毫克的别嘌呤醇,100毫克的硫辛酸)准确称重和地面细粉。准确称取量相当于别嘌呤醇的50毫克,50毫克的硫辛酸制定细粉被转移到100毫升容量瓶由甲醇的马克。用了15分钟。过滤原液(500μg /毫升)。2毫升稀释10毫升(100μg /毫升)。从上面的解决方案需要3毫升稀释10毫升(30μg /毫升)。注意吸光度在250 nm, AUC在310到390纳米。计算别嘌呤醇浓缩的。使用吸收校正方程和硫辛酸浓缩的,使用y = mx + c方程。

验证的方法(28]线性和范围

线性响应决心通过分析5独立的校准曲线的范围10 - 50μg / mlfor氧化铝和洛杉矶。

精度

开发方法的精度评估通过分析包含三个不同浓度标准溶液20 30 40μg /毫升氧化铝和洛杉矶。盘中精密三个复制(n = 3)。Interday精度三个复制(n = 3)连续3天。这些% RSD值被发现小于±2.0%表明,方法是精确的。

精度

为了演示该方法的准确性,恢复标准添加法所进行的研究。溶液的配方浓度15μg /毫升氧化铝和LA飙升了50%,100%和150%浓度的标准对氧化铝和拉(7.5,15 25.5μg /毫升)。%复苏然后用回归方程计算。

检测极限

从线性曲线方程,标准差(SD)的拦截(响应)计算。然后LOD测量用数学表达式给出部分。检测极限(LOD)药物被使用以下公式计算指定的国际协调会议(我)的指导方针:

LOD = 3.3 *σ/ S

在那里,σ=响应的标准偏差
S =校准曲线的斜率。

量化的限制

从线性曲线方程,标准差(SD)的拦截(响应)计算。定量限是衡量使用数学表达式给出部分。量化的极限(定量限)的药物是使用以下公式计算指定的国际协调会议(我)的指导方针:

定量限= 10 *σ/ S

在那里,σ=响应的标准偏差
S =校准曲线的斜率。

鲁棒性和强度

鲁棒性和强度的方法取决于对方法方法条件的微小变化,分别:

•改变股票的解决方案准备,

•改变仪器紫外分光光度计型号1800和2450年)

三个复制的浓度(20、30、40μg /毫升氧化铝和LA)与不同股票的解决方案准备和吸光度的记录是在紫外可见分光光度计。% RSD为计算。

储备溶液稳定性

分析的样品准备工作就绪定期紫外线为72小时/测试程序。

结果和讨论

线性

零阶光谱(图3显示行arabsorbance 250 nmfor氧化铝(10 - 50μg /毫升)和(视图在310 - 390纳米)线性AUC LA(10 - 50μg /毫升)的相关系数(r2) 0.9998和0.9999氧化铝和洛杉矶,分别。线性数据对药物所示表1和校准曲线图表,r2value显示图5和6。

精度

国际米兰,盘中精度数据所示表2和3分别。这些%相对标准偏差值被发现比±2.0 indicatedthatthemethod声称这次逮捕是精确。

精度

%恢复y值列表表4和表5。%恢复对氧化铝和拉通过这种方法被发现在101.18 - 101.61%和100.81 - 101.84%的范围,分别。%的价值相对标准偏差在限制表示凡响准确和百分比复苏表明,毫无作用的干扰。

LOD和定量限

氧化铝和洛杉矶的LO D是符合0.16μg / mland0.46μg /毫升,分别。氧化铝和洛杉矶的定量限符合0.5μg /毫升和1.38μg / ml,分别。

鲁棒性和强度

研究的结果发表在获得的坚固性和鲁棒性表6。% R.S.D被发现在氧化铝范围0.11 - 0.66%和0.43 - 1.41%。没有明显的光谱变化的观察,证明开发方法是崎岖和鲁棒性。

销售配方的试验数据

百分比测定表明,没有辅料的干扰,该方法可以成功地应用于分析商业配方含有氧化铝和洛杉矶。%化验值列表表7。

总结产品的

总结所有的参数中给出表8。

结论

两种物质的所有参数满足我的标准指南的方法验证和发现适合常规定量分析在药物剂型。的结果线性、准确性、精密证明是较低的限制范围内的检测和量化。强度和鲁棒性的方法被证实是没有明显的观察到在对该方法的分析方法条件的微小变化。

确认

我们衷心感谢Shree Dhanvantary医药学院,金姆,苏拉特,为我们提供基础设施和道德支持开展这项研究工作。我们也感谢SDPARC给我们他们的特殊的时间和指导研究工作。我们还要感谢我们的同事对他们的援助之手。

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