开发和验证产物的稳定性指示方法同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平在奶油

文摘

一个简单的、具体、准确、指示准确稳定rp -同时估计的方法硝苯地平和盐酸利多卡因结合剂型已经被开发。rp方法开发的同时估计硝苯地平和盐酸利多卡因联合剂型。分离是通过在C18 LC - 20(250毫米×4.6毫米。d, 5μm)海泼斯尔合金BDS列和缓冲(0.05 KH2PO4 pH值3.0):甲醇(50:50)作为流动相,在1毫升/分钟的流量。检测是在234海里。盐酸利多卡因的保留时间和硝苯地平被发现分别是4.170分钟,6.530分。方法验证了线性、准确性和精度。线性观察硝苯地平1.5 - -4.5μg /毫升和盐酸利多卡因7.5 -22.5μg /毫升。开发方法是准确、精确、简单、具体的同时估计硝苯地平和盐酸利多卡因结合剂型。水解的药物受到应力状态,氧化、光解和热降解。该方法已成功申请的同时估计商业结合的药物剂型。

关键字

硝苯地平;盐酸利多卡因;产物稳定性指示方法;验证。

介绍

分析方法的介绍

医药产品制定有超过一种药物,通常称为组合产品。这些组合产品分析化学家提出严峻的挑战负责分析方法的开发和验证。光度分析方法的开发和验证,高效液相色谱法(高效液相色谱)和高性能薄层色谱法(效果)药物含有多个活性成分的产品。官方的测试方法,使用这些过程质量控制实验室,确保身份、纯度、效力,和性能的药物产品。

药物引入到市场的数量每年都在增加。这些药物可能是新的实体或局部结构修改现有的服务。经常有一个日期的时间差引入药物进入市场的日期在药典的包容。这是因为可能的持续的不确定性和更广泛的使用这些药物,新的毒性的报道(导致其退出市场),病人的发展阻力和介绍更好的药物的竞争对手。在这种情况下,标准和分析方法对这些药物可能不是药典中可用。它变得必要,因此开发新的分析方法对于此类药物(1- - - - - -7]。

介绍了高效液相色谱法:液相色谱法(LC)是一种物理分离技术进行液相。样本分为其组成部件(或分析物)的流动相之间的分配(流动的液体)和固定相(一列里吸着剂)。例如,流动的液体可以通过列在有机溶剂迫使高速和固定相可以多孔二氧化硅颗粒装在一个列。柱层析法的现代形式被称为高性能、高压力、高分辨率、高速液相色谱。高效液相色谱是一种现代的LC列使用小颗粒的流动相在高压泵。

高效液相色谱法(HPLC),有时被称为高压液相色谱法,是基于一个坚实的分离技术固定相和液体流动相1- - - - - -4)(图1)。

分离原则:分离的原则在正常模式和反相模式是吸附阶段。当混合物的组件介绍了高效液相色谱柱,他们根据他们的相对亲和力向固定相。的组件更亲和吸附剂的旅行慢。少的组件关联到固定相传得更快。因为没有两个组件有相同的亲和力对固定相,分离的组件。

图2一个是色谱过程的示意图,分析物的混合物a和B是分为两个截然不同的乐队为他们迁移列满包装(固定相)。

图2 b表示的动态分区过程分析物之间的流动液体和球形填料粒子。组件B是弱智的运动在B列因为每个分子具有较强的亲和力比分子的固定相。

内联探测器监测的浓度废水中的每个组件分隔带和生成一个跟踪称为“色谱”所示图2 c。

有不同的模式在高效液相色谱分离

1)正常阶段模式

2)反相模式

3)离子交换色谱法

4)反相离子对色谱法

5)亲和色谱法和

6)尺寸排阻色谱法

正常的阶段:在正常模式阶段,固定相极性流动相在本质上是无极性的。在这种技术中,非极性化合物的传播速度,并筛选了。这是因为较低的非极性化合物和固定相之间的亲和力。极性化合物保留更长时间倍,因为他们的高亲和力与固定相。这些化合物,因此采取多次洗提。正常阶段的分离模式因此,不是通常用于制药应用程序,因为大部分的药物分子在本质上是极性的,因此需要一定的时间来洗提(图3)。

反相模式:反相模式是最受欢迎的模式分析和制备分离的化合物化学的兴趣,生物、制药、食品和生物医学科学。在这种模式下,固定相非极性疏水性包装与辛或八面体癸官能团键合硅胶和流动相极性溶剂。二次溶质的水流动相允许使用化学平衡(如电离控制、离子抑制离子配对和并发症)控制保留和选择性。极性化合物被筛选了第一次在这种模式下,非极性化合物保留更长时间。大部分的药物和药物在本质上是极性的,他们不是保留更长时间,因此洗提得更快。使用不同的列是八面体癸硅烷(ODS)或使用C18 C8, C4,等等,(增加的顺序固定相的极性)(图4)。

离子交换色谱法:在离子交换色谱中,固定相包含离子NR3 +或SO3 -这样的组织,它与样品的离子组分子。这是适合的分离带电分子。改变pH值和盐浓度可以调节保留。

反相离子对色谱法:离子对色谱法可用于离子化合物的分离,该方法也可以代替离子交换色谱法。强酸性和碱性化合物可能是分开由形成离子对反相模式(含铌的协会物种之间形成两种带相反电荷的离子)与合适的反离子。这种技术被称为反相离子对色谱法或soap色谱法。

亲和色谱法:亲和色谱法为分离使用高度特定的生化作用。固定相包含特定群体的分子能吸收样品如果某些空间和满足相关条件。这种技术可用于分离蛋白质,酶和抗体从复杂的混合物。

尺寸排阻色谱法:尺寸排阻色谱法分离分子根据其分子质量。最大的分子筛选了姓和最小的分子。时这种方法通常是使用一个混合物包含化合物分子质量不同的至少10%。这种模式还可以进一步细分为凝胶渗透色谱法(有机溶剂)和凝胶过滤色谱法(水溶剂)。

参数的变化影响色谱条件:

1。决议(Rs)

2。能力因素(k)

3所示。选择性(α)

4所示。列效率(N)

5。峰值不对称因子()

1)决议(Rs)

分辨率参数描述系统完整的色谱的分离能力相对于特定组件的混合物。

两个相邻峰的分辨率(Rs),被定义为两个峰之间的距离的比值最大值。这是区别两个溶质的保留时间除以平均峰值宽度。为基线分离,Rs的理想值是1.5。

是有用的相关决议,盘子的数量列,选择性的因素和两种溶质的保留因素;

获得高分辨率,这三个条件必须最大化。N的增加,理论板数,延长列导致增加保留时间和增加频带展宽,并不是我们想要的。相反,增加板的数量,相当于理论塔板高度可以减少减少固定相粒子的大小。

经常发现,通过控制能力因子(k”),可以大大提高分离。这可以通过改变温度(气相色谱)或流动相的组成(液相色谱)(图5)。

2)能力系数(k)

能力因素是比保留体积减少的死体积。容量因子(k”),被定义为分子的数目的比率固定相的溶质分子的数量相同的流动相。能力因素是衡量样本分子是如何保留一个列在权力平等主义的分离。从2 - 10 k的理想值的范围。能力

3)选择性因子(一个)

它还可以改善分离操作。当接近统一,优化k”和增加N是不够给良好的分离在合理的时间。在这些情况下,k”优化,然后增加了下列程序:

1。改变流动相组成

2。改变列的温度

3所示。改变固定相的合成

4所示。使用特殊的化学作用(如将一个物种的复合物的溶质在固定相)(图6)。

4)柱效率(N)

列的效率(N),是由理论板数来衡量每米。这是一个衡量乐队蔓延的高峰。类似的乐队蔓延,更高的理论板数,显示良好的列和系统性能。列与N从5000到00000板/计是一个好的系统的理想(图7)。

5)峰值不对称因子(Tf)

峰值不对称因子(Tf)可以用作柱性能的标准。峰半宽度(b),峰的峰高的10%,除以相应的前一半宽度(a),给出了不对称因子(图8)。

介绍稳定性指示方法:根据FDA的指导文档,stability-indicating法(SIM)是一种验证定量分析方法可以检测出随时间变化的相关药物物质和药物产品的属性。稳定性指示方法准确地测量活性成分,没有降解产物的干扰,过程杂质,辅料,或其他潜在的杂质(2,3]。

我指南Q1A (R2)(2003)复杂的API的稳定性测试和药物产品为了确定存储条件,测试周期,最大到期约会时间的药物产品,正确的包装保护产品和运输条件。

强制降解研究:

任何药物物质的降解的主要途径包括水解、氧化、热量和光解。

1。水解降解

2。氧化降解

3所示。热降解

4所示。光解的退化

水解:酸性和碱性条件下水解研究涉及catalyzation ionisable官能团存在的分子。盐酸和氢氧化钠用于生成酸性和碱性压力样本,分别。

氧化条件:许多药物物质发生自氧化即氧化在正常贮存条件和涉及基态氧元素。

•因此是一个重要的许多药物的降解途径。汽车-氧化反应是一个自由基反应,需要开始链式反应的自由基引发剂。过氧化氢、金属离子或微量药物的杂质水平物质作为自动氧化的发起者

•药物物质的氧化降解机理包括一个电子转移机制,形成活性阴离子和阳离子。

•胺、硫化物、酚类氧化易受电子转移给N-oxides,羟胺、亚砜和砜。

•生产过氧化氢是很常见的氧化剂氧化降解产物也可能出现轻微杂质在长期稳定性研究。

热条件

•在一般情况下,反应速率随着温度的增加而增加。因此,药物容易退化在更高的温度。

•许多api对热敏感或热带温度。例如,维生素、肽等。热降解涉及不同的反应热解、水解、脱羧、异构化、重排和聚合。

光解的条件

•photodegradtion的速度取决于入射光的强度和数量的光吸收的药物分子。可以通过non-oxidative发生光解的退化或氧化光解的反应。

•光解的退化是由公开药物物质或药物产品结合可见光和紫外线。

•的non-oxidative光解的反应包括异构化、二聚环化、重组和脱酸等,而氧化发生光解反应通过单线态氧(1 o₂)或三重态氧(3 o₂)机制。

介绍光谱方法:吸收光谱是最有用的和广泛使用的工具之一,可以定量分析的分析师。分析物的浓度之间的关系和吸收的光线是大多数分子光谱的分析应用的基础。这种分析方法获得的重要性是由于简单、快速、精确、高度精确和更少的时间消耗5- - - - - -7)(图9)。

定量的分析紫外可见分光光度法。

使用标准的吸光系数值。b。使用校准曲线。

c。单引号或双点标准化。

多组分系统:药物的光度分析很少涉及样品的吸光度测量只包含一个吸收组件。医药分析师经常遇到的情况是必需的一个或多个物质的浓度已知样本中包含其他吸收物质,这可能干涉分析。吸光度比药物以外的其他来源的杂质,分解产品,制定辅料称为无关的吸光度,如果不是被赋予一个系统误差分析药物的样本。数量的修改在前一节中描述的简单的光谱光度测量的过程可用单一组件样品分析,消除某些干扰的来源和允许精确测定一个或所有的吸收组件。所有的光谱光度测量的技术的基础多组件样品是所有波长的财产,

我。溶液的吸光度是单个组件的吸光度之和。

二世。测量吸光度之间的区别是在样品室的总吸光度的解决方案,解决方案的参考(空白)细胞。

各种光谱技术用于多成分分析如下:

联立方程法

集中的几个组件呈现相同的混合物可以由解联立方程的资产即使他们的光谱重叠(如果啤酒法律之后)这个方程是线性的。

b)吸收比率方法

吸光度比值法联立方程的修改过程。这取决于物质的属性,遵循比尔定律在所有波长,任意两个波长的吸光度的比值是恒定值独立于浓度或路径长度。

如。2稀释相同的物质给相同的吸光度比例A1 / A2。USP,这个比例被称为Q值。

c)几何校正方法

这是一个方法,消除可能存在的背景不相关的吸收的生物起源样本。最简单的是三分的几何校正方法。

d)正交多项式方法

一个数学校正过程,涉及复杂的计算基础上,吸收可以用正交函数。

e)不同光谱

这是一个敏感的检测方法小发色团的化学环境的变化。该方法的基本特征是,测量吸光度分析物之间的克分子数相等的解决方案在不同的化学形式展示不同的光谱特征。

f)导数光谱

导数分光光度法是有用的手段解决两个重叠的干扰矩阵谱分解和消除由于模糊的肩膀上的吸收带。

它涉及转换正常光谱[= f(λ)]首次[d1A / dλ1 = f(λ)],第二[d2A / dλ2 = f(λ)和高阶导数光谱导数光谱的振幅成正比的浓度分析物应遵循法律规定,啤酒的基本谱。

g)曲线下面积的方法

在这种方法中,吸收率值(ε1和ε2)每个两种药物的测定在选定的波长范围。曲线下面积的混合物在波长范围等于面积的总和个人组件在这个波长范围。这种方法适用的λmax两个组件是相当不同的,两个组件没有化学和组件交互必须溶于溶剂。

倾斜的方法当重叠的紫外光谱两种药物显著标记强度和大差异。

介绍验证参数:方法验证是用来确认的过程分析方法用于特定的测试适用于其预期使用。方法验证结果可用于判断质量,可靠性和一致性分析结果;它是不可分割的一部分,任何良好的分析实践(7,8]。

•分析方法需要验证或重新检验它。

•在他们引入到常规使用

•当条件改变的方法验证(例如,具有不同特点的乐器或样品不同的矩阵)

•只要方法改变,改变是超出原方法的范围

•我发表了具体指导方法验证复合评价(图10)。

准确性:分析过程的准确性表达亲密之间的协议价值被接受作为一个传统的真实价值或一个公认的参考价值和价值发现。这有时被称为真实。

应该建立一个分析方法的准确性在其范围内。对于药物的分析制定产品,精度可能由应用程序的分析方法合成药物产品组件的混合物添加了已知数量的分析物范围内的方法。最小测试浓度从50%到120%通常使用,建立准确的测定药物物质(或成品)。平均回收率应在每个级别98 - 102%的药物。

精度:分析过程的精确表达了亲密之间的协议(分散程度)的一系列测量获得的多个采样相同的均匀样品在规定的条件下。精度可以考虑在三个层面:重复性、中间精密度和重现性。

使用均匀精度应该调查,真实的样品。然而,如果它是不可能获得均匀的样品可以使用人工调查准备样品或者样品溶液。

分析过程的精度通常表示为方差,标准差和变异系数的测量。在所有样品的精确结果不应该RSD为> 2%。

特异性:特异性是能够评估明确的分析物的存在组件可能会出现。通常这些可能包括杂质、降解、矩阵等。

标识:以确保一个分析物的身份。

纯度测试:确保所有允许精确的语句执行的分析方法分析物的杂质含量,即相关物质测试,重金属,残留溶剂含量等。

分析:提供一个确切的结果,允许一个准确的声明内容或样品中分析物的效力。

测定特异性:我文件状态,当使用色谱过程,代表色谱应该用于演示应该适当检测特异性和单个组件。峰纯度测试可能是有用的展示分析物色谱峰不是由多个组件(如二极管阵列,质谱)。

检测极限:个人的检测极限分析过程中被测物能被定量测定的最低金额,可以检测到,但不一定量化作为精确值。

检测极限的确定:工具性和non-instrumental方法检出限通常是由样品的分析已知浓度的分析物和通过建立分析物的最低水平可以检测可靠性。

检测极限(LOD)可以表示为:

LOD = 3.3σ/ s

在那里,σ=响应的标准偏差。

S =校准曲线的斜率。

从校准曲线斜率S可能估计的分析物。

定量的限制:限制个体的定量分析过程中被测物能被定量测定的最低金额,可以定量地确定合适的精密度和准确度。定量是一个参数的极限低水平的化合物的定量化验样本矩阵,并特别用于测定杂质或降解产物。

确定定量限度:工具性和non-instrumental方法定量限制通常是由样品的分析已知浓度的分析物和通过建立分析物的最低水平可以量化和可接受的准确度和精密度。

定量的极限(定量限)可以表示为:

定量限= 10σ/ s

在那里,σ=响应的标准偏差。

S =校准曲线的斜率。

线性和范围:分析的线性过程的能力(在一定范围内)获得的测试结果直接与浓度成正比(量)分析物的样品。

分析程序的范围上下之间的间隔被分析物的浓度(含量)的样本(包括这些浓度)已经证明了分析性程序有一个合适的精度水平,精度和线性度。

测定线性和范围:线性的决心,建议5的最低浓度。线性可以由一系列的样品浓度跨度80 - 120%的预期的浓度范围。通过图形化线性评估。

强度:程度的再现性测试结果由同一样品在不同条件下,如不同的分析师,不同的实验室条件,不同的乐器等通常表示为缺乏对测试结果的影响操作和环境变量的分析方法。强度是衡量测试结果的再现性变化条件下通常期望从实验室到实验室和从分析师分析师。

强度的确定:通过分析整除的同质很多在不同的实验室,通过不同的仪器和使用操作和环境条件可能有所不同,但仍与指定参数的测定。测试结果的再现性程度然后决定作为分析变量的函数。

不同的运营商在同一实验室,不同的设备在同一实验室。

不同来源的段和解决方案,不同来源的列。

鲁棒性

分析性程序的健壮性是衡量其能力不受影响小,但故意变化方法参数和提供了一个指示正常使用时的可靠性。

鲁棒性测定:鲁棒性的评估应该考虑在开发阶段,取决于手术的类型研究。它应该显示的可靠性分析对深思熟虑的方法参数的变化。

典型的变化的例子有:

•解析解的稳定性

•提取时间

•在液相色谱中,典型的变化的例子有:

•流动相的pH值变化的影响

•移动相组成变化的影响

•不同的列(不同批次和/或供应商)

•温度和流量

一个¢ž¢应用和优点

我。一个理想的方法分离植物提取物中各种化合物结构相似,因此需求特定的和非常敏感的方法。

二世。主要分离技术能够多成分分析现实生活中样品和复杂的混合物。

三世。该方法用于确定各种药品。可以进行各种降解产物的分析,从而稳定指示开发了高效液相色谱系统和方法。

四、高度自动化,使用复杂的无人值守auto-samplers和数据系统分析和报告生成。一些技术可以匹配它的多功能性和精度为±0.5%。

诉的高度敏感和特定探测器检测范围扩展到毫微克,沙克,甚至毫微微克水平。制备技术,它提供了定量恢复许多不稳定的组件在毫克公斤数量。

第六,拥有快速、准确的定量分析。定量样品恢复和服从不同样品。最重要的是,它是适合所有现有的化合物的60%到80% (1,2]。

介绍疾病

1。慢性肛裂肛门疼痛是最常见的原因与内部肛管张力亢进有关。减少hypertonocity为裂缝愈合是一种特殊的待遇。为此慢性肛门裂缝是传统治疗肛门扩张或横向括约肌切开术。

2。然而,这两种方法在某些病人可能导致一定程度的尿失禁。的医学治疗方法,创建一个可逆化学括约肌切开术最近变得普遍。本前瞻性临床试验研究的目的是评估的有效性硝苯地平治疗肛裂,钙通道阻滞剂,降低括约肌压力。

3所示。单盲随机比较试验设置比较传统治疗大便软化剂和2%盐酸利多卡因对硝苯地平0.5%霜霜4周。110名患者包括在这项研究中,60名患者硝苯地平组和对照组50例,治疗效果和副作用都被记录下来。疗愈发生在硝苯地平组中70%的患者和12%的患者在4周治疗后对照组(P < 0.005)。

4所示。治愈患者的症状复发发生在四个硝苯地平组和对照组在两个月内三个病人。硝苯地平应用程序的最终结果随访12个月后复发11例(26.19%)。轻度头痛发生在4名患者(6.6%)的硝苯地平组。硝苯地平组的患者显示显著的治疗和减轻疼痛与对照组患者相比。复发率与硝苯地平使用尽管控制诱发因素如便秘是很重要的。这种治疗的另一个发现是低并发症率(9]。

组合的理由

盐酸利多卡因:

•药理类:局部麻醉和心脏镇静剂

硝苯地平:

•药理类:钙通道阻滞剂和血管舒张。

盐酸利多卡因和硝苯地平的作用机制:

盐酸利多卡因作为麻醉和硝苯地平作为血管舒张药降低括约肌压力,这导致肛裂[减少超级强壮9- - - - - -13]。

药物简介

盐酸利多卡因(10,11](表1)

表1。盐酸利多卡因(- 11)。

硝苯地平(12,13](表2)

表2。硝苯地平(12 - 13)。

回顾文献[14- - - - - -54]

盐酸利多卡因(14- - - - - -33]

官方盐酸利多卡因的方法(14- - - - - -15](表3)

表3。盐酸利多卡因的官方方法[14]。

盐酸利多卡因的报告方法(16- - - - - -33](表4)

表4。盐酸利多卡因的方法报道[16-33]。

硝苯地平(33- - - - - -53]

官方硝苯地平的方法(表5)(33- - - - - -35]

表5所示。官方的方法硝苯地平(到三十五)。

方法报道硝苯地平(表6)(33- - - - - -53]

表6所示。方法报道硝苯地平(33-53)。

盐酸利多卡因和硝苯地平在组合的报告方法(表7)(54]

表7所示。报道的方法[54]结合盐酸利多卡因和硝苯地平。

介绍销售配方

硝苯地平的奶油Anobliss包含组合(0.3% w / w)和盐酸利多卡因(1.5% w / w)由Samarth生命科学(14- - - - - -54)(表8)(图11)。

表8所示。介绍销售配方。

Psar报告的总结

1)专利EP19960113165与包含药品的制备硝苯地平延长释放成分和制备过程。特别是本发明涉及制药配方提供控释以固定利率和预期的时间内药物和活跃药物硝苯地平的有用,其中,Vasopastic心绞痛、慢性稳定性心绞痛(经典的努力相关的心绞痛)和高血压。

2)专利我们07/472,659与硝苯地平含有药物成分和制备过程。特别是本发明涉及到一个包含硝苯地平缓释配方和制备过程。

3)专利我们08/738,925与小说口服硝苯地平的制药配方控释特性,也准备这样的配方的方法。

丸有多个涂料的配方组成,硝苯地平的里层是随着时间的推移慢慢释放。这些配方可以表现出优秀的控释性能。方法准备的剂型为口服制剂片剂和胶囊剂型,而且,更特别,提供治疗的准备工作包括涂层颗粒释放剂量硝苯地平的长期时间在病人的消化系统。

4)专利EP20040741683与人类医学领域,特别是局部麻醉配方包括几个麻醉5剂的混合物。

5)专利我们13/722,458指向一块皮肤交付由当地的止痛剂,选择性地渗透增强剂,减少疼痛(55- - - - - -59)(表9)。

表9所示。总结Psar报告[55-59]。

看着上面05年专利,我的论文项目是小说:新奇等级:- < 50%

基本原理

经过专利搜索和文献调查分析方法发展为硝苯地平和利多卡因。只有过程合成、专利配方和制备的专利。

即便如此,直到现在没有分析方法开发报道硝苯地平和盐酸利多卡因。

剂型包含硝苯地平和盐酸利多卡因也可以在市场。所以,我认为发展同时评估硝苯地平和盐酸利多卡因的方法。

目的和目标

目的

一个¢ž¢文献综述表明,个体的数量分析方法可用于评估盐酸利多卡因和硝苯地平在他们的个人和与其他剂型和只有一个分析方法发现这个组合。

一个¢ž¢但仍然没有产物稳定性指示方法已经报道了同时估计的盐酸利多卡因和硝苯地平联合制药剂型。

¢ž¢所以,现在工作的目标是开发简单、准确、精确、快速、特异、灵敏和选择性的反相高效液相色谱法同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平执行稳定指示方法结合制药剂型。

客观的

一个¢ž¢产物开发方法,同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平在制药剂型。

一个¢ž¢应用新开发,验证分析方法的评估盐酸利多卡因和硝苯地平配方。

一个¢ž¢执行稳定指示方法开发的RP - HPLC方法。

一个¢ž¢应用新开发和验证产物稳定性指示方法同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平。

实验工作

用于实验仪器和试剂

仪器(表10)

表10。仪器。

设备(表11)

表11所示。设备。

试剂

•盐酸利多卡因从绿洲实验室采购。

•硝苯地平从RPG生命科学采购

•水

•甲醇

•磷酸二氢钾

对药物的初步分析

盐酸利多卡因

1)描述

盐酸利多卡因的样本观察它的颜色和纹理。

2)熔点

盐酸利多卡因的样品在毛细管熔点测定仪和地点。观察到的熔点和比较引用(表12)。

表12。熔点盐酸利多卡因。

3)溶解性

硝苯地平的样本是在试管中,观察各溶剂溶解度像水,甲醇,0.1 N盐酸和0.1 N氢氧化钠(表13)。

表13。溶解度。

Nifedipin

1)描述

观察硝苯地平的样品的颜色和质地。

2)熔点

硝苯地平的样品在毛细管熔点测定仪和地点。观察到的熔点和比较引用(表14)。

表14。硝苯地平的熔点。

3)溶解性

硝苯地平的样本是在试管中,观察各溶剂溶解度像水,甲醇,0.1 N盐酸和0.1 N氢氧化钠(表15)。

表15。溶解度。

表16所示。系统适用性参数的结果。

药物通过红外光谱的识别

颗粒的药物和KBr(光谱级)准备使用小球液压机的压力7 - 10音调。傅立叶变换红外光谱扫描400 - 4000厘米¹

峰出现。

1)盐酸利多卡因(数字12和13)

盐酸利多卡因的红外光谱的解释

2)硝苯地平(图14和15)

硝苯地平的红外光谱的解释

方法开发的同时估计盐酸利多卡因和硝苯地平

选择洗脱模式

反相色谱法被选中,是因为它的推荐使用离子和中等极性化合物。反相色谱法不仅简单、方便而且性能更好的效率、稳定性和重现性。C18柱最小极地与C4和C8列。这里,250×4.6 mm列5.0μm粒子填料选择分离盐酸利多卡因和硝苯地平。权力平等主义的模式选择是由于简单应用和健壮性对长柱的稳定性。

波长的选择

理想的波长是给好反应的药物发现。在目前的研究药物盐酸利多卡因的解决方案(15μg /毫升)和硝苯地平(3μg /毫升)准备在甲醇。这些药物比扫描解决方案在紫外区域的200 - 400 nm和表面光谱被记录(图16)。

盐酸利多卡因和硝苯地平均显示出良好的反应在234海里。

流动相的选择(相当于17 - 30的数字)

流动相的选择

优化的流量

1毫升/分钟流量,被证明是比其他的分辨率,峰形状和保留时间短。

效用的解决方案

(一)盐酸利多卡因标准储备溶液(150μg /毫升):

15毫克盐酸利多卡因的称重和转移到100毫升容量瓶。成交量由马克的甲醇。

(B)硝苯地平标准储备溶液(30μg /毫升):

硝苯地平的30毫克称重和转移到100毫升容量瓶。体积是由马克从上述解决方案1毫升甲醇被转移到10毫升容量瓶成交量由马克的甲醇

(C)制备缓冲(0.05 KH2PO4 pH值3.0)解决方案:

6.8通用KH2PO4摄于1000毫升烧杯中,加入800毫升水,调节pH值3.0 O-Phosphoric酸,容量1000毫升的水。

(D)的标准溶液制备盐酸利多卡因(15μg /毫升)和硝苯地平(3μg /毫升)

1毫升盐酸利多卡因原液和1毫升硝苯地平原液被转移到10毫升容量瓶,体积被流动相组成的。

色谱条件

专栏:C18(250海里×4.6毫米。d, 5μm)海泼斯尔合金BDS

流量:1.0毫升/分钟

操作温度:室温

选定的波长:234海里

流动相:缓冲区(0.05米KH2PO4 pH值3.0):甲醇(50:50)

运行时间:10.0分钟

注入量:20μl

产物的验证方法

特异性:盐酸利多卡因的色谱(15μg /毫升)和硝苯地平(3μg /毫升)标准和盐酸利多卡因(15μg /毫升)和硝苯地平(3μg /毫升)样本没有干扰盐酸利多卡因的色谱和硝苯地平空白,因此,开发方法是特定(数字31-35)。

线性和范围

一个¢ž¢盐酸利多卡因和硝苯地平的线性评估分析,结合标准溶液在7.5 - 22.5范围μg /毫升和分别为1.5 -4.5μg /毫升

¢ž¢5,7.5,10日,12.5,15毫升的解决方案是吸管从盐酸利多卡因的原液(150μg /毫升)和硝苯地平(30μg /毫升)转移到100毫升容量瓶和马克的流动相组成(缓冲区(0.05米KH2PO4 pH值3.0):甲醇(50:50)]获得7.5,11.25,15日μg /毫升18.75和22.5和1.5,2.25,3.75和4.5μg分别/毫升盐酸利多卡因和硝苯地平

一个¢ž¢的斜率,拦截和相关系数值。峰面积得到的图像诗各自浓度绘制(表17和18)(数字36-38)。

表17所示。盐酸利多卡因的线性数据。

表18。硝苯地平的线性数据。

精度

答:可重复性

标准溶液含有盐酸利多卡因(15μg /毫升)和硝苯地平(3μg /毫升)注射6倍和地区的山峰和% R.S.D.测量计算

b .盘中精度

标准溶液包含(7.5,15日22.5μg /毫升)盐酸利多卡因和(1.5、3、4.5μg /毫升)分析了硝苯地平的当天和% R.S.三倍D计算。

c . Inter-day精度

标准溶液包含(7.5,15日22.μg /毫升)盐酸利多卡因和(1.5、3、4.5μg /毫升)分析了硝苯地平和% R.S.不同天的三倍D计算。

我可重复性。

% RSD为盐酸利多卡因和硝苯地平被发现分别为0.57和0.86 (表19和20.)。

表19。盐酸利多卡因可重复性的数据。

表20。硝苯地平可重复性的数据。

二世。盘中精度

盘中的数据精度为盐酸利多卡因和硝苯地平所示表21。

表21。盘中精度数据评估盐酸利多卡因和硝苯地平。

三世。Interday精度

盐酸利多卡因Interday数据精度和硝苯地平所示表22。

表22。Interday精度数据评估盐酸利多卡因和硝苯地平。

精度

一个¢ž¢盐酸利多卡因

7.5μg /毫升药物解决方案是在三个不同的瓶标签,B和c .飙升80%,100%,120%的标准溶液,稀释10毫升。每个解决方案的面积测量峰值在234海里。盐酸利多卡因的含量计算每一层和%恢复计算(表23)。

表23。盐酸利多卡因的恢复数据。

一个¢ž¢硝苯地平

1.5μg /毫升药物解决方案是在三个不同的瓶标签,B和c .飙升80%,100%,120%的标准溶液,稀释10毫升。每个解决方案的面积测量峰值在234海里。硝苯地平的数量计算每一层和%的经济复苏被计算。

精度的方法证实了销售的复苏研究制定三个级别的标准。结果如下表所示(表24)。

表24。硝苯地平的恢复数据。

极限检测和量化的极限

•组3的LOD估计用于测定线性校正曲线。LOD可能计算表25,

表25。盐酸利多卡因和硝苯地平检测极限数据。

LOD = 3.3×(SD /坡)

在那里,

SD =标准差3校正曲线的截距。斜率=意味着3校正曲线的斜率。

•估计从定量限的一组3用于确定线性校准曲线。不得计算为定量限表26,

表26。盐酸利多卡因的定量数据和硝苯地平的极限。

定量限= 10×(SD /坡)

在那里,

SD =标准差3校正曲线的截距。斜率=意味着3校正曲线的斜率。

鲁棒性

一个¢ž¢参数改变后,观察它们的影响对系统适用性标准准备。

1。流动相流速的改变(±0.2毫升/分钟)0.8毫升/分钟和1.2毫升/分钟。

2。流动相的pH值变化(±0.2)3.2和2.8

3所示。流动相的比例被改变(±2)缓冲:甲醇(48:52)和缓冲:甲醇(52:48)

一个¢ž¢改变带来的影响被发现在验收标准如下表所示。%相对标准偏差应小于2% (表27和28)。

表27。盐酸利多卡因的健壮性数据。

表28。硝苯地平的健壮性数据。

分析销售配方的开发方法

一个¢ž¢该方法的适用性测试通过分析商用霜配方Anobliss,结果所示表29。

表29。分析销售配方。

一个¢ž¢奶油相当于15μg /毫升盐酸利多卡因和3μg /毫升的硝苯地平。准确的加权1通用的奶油在被转移到一个100毫升容量瓶,成交量由流动相的标志,动摇了

15分钟比把这个解决方案对超声发生器和用15 - 20分钟在室温下,解决方案是通过绘画纸过滤滤纸。42和前几滴滤液被丢弃。10毫升的这个解决方案是用流动相稀释至100毫升。解决方案是注射20μl。产生的峰值测量等领域的234海里。

一个¢ž¢化验结果与标示每个药物剂型相结合的价值。这些结果表明,开发的方法是准确的,精确的,简单和快速。它可以用于常规剂型的质量控制行业。

概述的验证参数:

所示表30。

表30。总结验证参数。

稳定性指示方法同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平,rp完成

(图39岁和40)

酸降解

酸分解进行了研究以1毫升的股票的解决方案和在10毫升容量瓶转移。2毫升盐酸0.1 N的解决方案添加和混合,放置4小时。时间后成交量与稀释剂调整15μg /毫升盐酸利多卡因和硝苯地平3μg /毫升(数字41-44)。

基地退化

基本分解进行了研究以1毫升的股票的解决方案和在10毫升容量瓶转移。2毫升0.1 N氢氧化钠添加解决方案和混合,放置4小时。时间后成交量与稀释剂调整15μg /毫升盐酸利多卡因和硝苯地平3μg /毫升(数字45-48)。

氧化降解

氧化分解进行了研究以1毫升的股票的解决方案是在转移到10毫升容量瓶。2毫升3%过氧化氢溶液添加和混合好,把3小时。时间后成交量与稀释剂调整15μg /毫升盐酸利多卡因和硝苯地平3μg /毫升(数字49-52)。

照片退化

照片进行降解研究通过1毫升的股票的解决方案是在转移到10毫升容量瓶。容量瓶是保持阳光的存在为3小时。那么成交量与稀释剂调整15μg /毫升盐酸利多卡因和硝苯地平3μg /毫升(数字53-56)。

热降解

热降解研究进行1毫升的股票的解决方案是在转移到0毫升容量瓶。容量瓶是存储在烤箱在110°C为4小时。那么成交量与稀释剂调整15μg /毫升盐酸利多卡因和硝苯地平3μg /毫升(年度的数据)。

稳定性指示参数的概述

所示表33节

表31。硝苯地平和盐酸利多卡因std稳定。

表32。硝苯地平%退化。

表33。盐酸利多卡因%退化。

结论

rp方法开发同时估算硝苯地平和盐酸利多卡因。在rp方法,良好的分辨率和分离两种药物。0.05米磷酸二氢钠(pH值3.0):甲醇(50:50 v / v)作为流动相。保留时间的硝苯地平和盐酸利多卡因被发现分别是4.170和6.530分钟的流量1毫升/分钟。

盐酸利多卡因局部麻醉和心脏作为antiarrhythmia剂镇静剂。盐酸利多卡因稳定所需的神经元通过抑制离子通量的起始和传导冲动从而影响局部麻醉作用。硝苯地平是dihydropyridine通道块l型钙通道阻滞剂。它的主要用途是作为一个防心绞痛的和抗高血压。盐酸利多卡因是充当麻醉剂和硝苯地平作为血管舒张药降低括约肌压力,导致肛裂hypertonocity减少。

准确、精确、简单、具体方法和验证的同时估计盐酸利多卡因和硝苯地平奶油。压力进行研究,结果发现了退化的限制之内。我们可以应用这个产物稳定性指示开发方法,同时评估盐酸利多卡因和硝苯地平在奶油。

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