研究和评论:药物分析杂雷竞技苹果下载志》上
菜单e-ISSN: 2320 - 0812
e-ISSN: 2320 - 0812
药物化学、js药学院,js学院高等教育和研究,印度迈索尔
收到日期:05/06/2018;接受日期:16/08/2018;发表日期:23/08/2018
访问更多的相关文章研究和评论:药物分析杂雷竞技苹果下载志》上
一个简单的、RP-UFLC方法建立了确定Linagliptin活性药物成分。Linagliptin DPP-4抑制剂由BoehringerIngelheim(德国制药公司)用于治疗II型糖尿病。Linagliptin 2011年5月2日被美国FDA批准用于治疗II型糖尿病。Linagliptin及其降解产物分离使用C18柱和乙腈:甲醇(50:50 (v / v)为流动相。检测是在238 nm使用PDA探测器和流量1.5 ml / min和保留时间为4.4分钟。该方法验证使用我的指导方针和线性范围2 - 10μg Linagliptin /毫升(r2 = 0.995)。线性度好,精度、精度强度,健壮性和特异性。良好的分析物的分离和降解产物是通过使用这种方法。发达的方法可以成功应用Linagliptin的决心。目前的方法验证对系统适用性、准确性(复苏)精度、线性、检测极限(LOD)和量化的限制(定量限)和鲁棒性根据我的指导方针。
Linagliptin DPP-4抑制剂由BoehringerIngelheim(德国制药公司)治疗II型糖尿病。Linagliptin 2011年5月2日被美国FDA批准用于治疗II型糖尿病。它被BoehringerIngelheim销售和莉莉。Linagliptin DPP-4的抑制剂(dipeptidyl肽酶4)一种酶,这种酶降解的内分泌激素,Glucagonlike peptide-1 (GLP-1)和葡萄糖依赖Insulinotropic多肽(GIP)。有glp - 1和GIP接收glp - 1增加胰腺β细胞的胰岛素合成和分泌正常,血糖水平升高。GLP-1也从胰α细胞,减少胰高糖素分泌的功能障碍导致的减少肝脏葡萄糖输出。因此,Linagliptin glucose-dependent的方式刺激胰岛素的释放,减少胰高糖素在血液循环的水平。Linagliptin显示,这种药物可以有效地降低血糖。总之,Linagliptin降低血糖水平通过抑制DPP-4和增加GLP-1和GIP的水平。Linagliptin是FDA批准的2011年5月(1]。
药物简介:
| 分子结构: |  |
|---|---|
| 同义词 | Tradjenta, Trajenta |
| 熔点 | 202ºC |
| 溶解度 | 溶于甲醇;少溶于乙醇;极微溶于异丙醇、酒精 |
| 外表 | 白色到黄色固体 |
| 类别 | 抗糖尿病的代理 |
剂量和管理
口服单一5毫克剂量的健康受试者,Linagliptin的血浆浓度峰值发生在大约1.5小时后剂量(达峰时间);意味着等离子体曲线下面积(AUC)是139 nmol * h / L和最大浓度(Cmax)是8.9 nmol / L。
的作用机制
Linagliptin属于一个叫做DPP-4抑制剂类药物。DPP-4抑制剂防止激素肠促胰岛素降解,允许从胰腺β细胞的胰岛素释放。虽然肠促胰岛素仍在血液,刺激胰腺产生更多的胰岛素。同时,从胰腺胰高血糖素释放交错,防止血糖水平增加。换句话说,Linagliptin,随着饮食和锻炼,可以帮助身体产生更多的胰岛素和血糖低。管理血糖可以意味着降低糖化血红蛋白,索引Glycaemia控制,理论上与血液中葡萄糖水平(2- - - - - -4]。
色谱条件
| 列 | Kinetex 5μC18 (250 x 4.6毫米。5μ) |
| 流量 | 1.5毫升/分钟 |
| 运行时 | 10分钟 |
| 波长 | 238海里 |
| 注入量 | 10μL |
| 探测器 | PDA探测器 |
| 洗脱 | 二元梯度 |
| 流动相 | 甲醇和乙腈(50:50)(v / v) |
| 柱温箱温度 | 25±5ºC |
稀释剂的制备
的稀释剂的混合物50部分甲醇和乙腈的50部分。
流动相的制备
流动相是甲醇和乙腈中使用的比率(50:50)(v / v)。
Linagliptin标准储备溶液的准备
100毫克的Linagliptin被带进100毫升容量瓶。加入50毫升的稀释剂,用溶解和稀释剂的体积是由马克(1000μg /毫升)。吸管1毫升以上解决方案为10毫升容量瓶和弥补卷使用稀释剂(100μg /毫升)。
线性的解决方案做准备
线性的解决方案准备从原液和稀释剂稀释。浓度范围从2、4、6、8、10μg /毫升Linagliptin做好准备。吸管的0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升10毫升容量的玻璃瓶,上面的体积使用稀释剂浓度。
校准曲线的准备
从股票的解决方案(100μg /毫升)整除的Linagliptin用移液器吸取为一系列10毫升容量瓶。体积是由马克用乙腈和甲醇作为稀释剂,获得2 - 10的浓度范围μg /毫升和过滤膜过滤0.45μ孔隙大小。10μL解决方案注射和峰值区域都被记录下来。建立了校准曲线。比尔定律是服从的浓度范围2 - 10μg /毫升
分析选择波长(λ马克斯)
Linagliptin的标准解决方案是在200 - 400纳米的范围扫描对流动相为空白。在238 nm Linagliptin显示最大吸光度。因此,波长选择的决心Linagliptin 238海里。
方法开发
RP-UFLC策略在这次考试中创建了寻找适合洗脱色谱框架和解决Linagliptin及其降解产物与履行框架适当性条件。建立不同的参数条件,例如,多才多艺的阶段,pH值、流率和可溶解的比例变化和合理的色谱条件创建常规调查药物测试。开始小径都是利用同一段以甲醇和乙腈在不同区段流率为1.5毫升/分钟。列是跟上梯度阶段。色谱有后续注入药物测试和运行时保持10分钟详细的分离和峰值与厚看着宽峰头和高的保留时间。
方法验证
方法验证是用来确认的过程分析方法用于一个特定的测试是合理的预期使用。结果从方法验证可以用于可靠性,判断分析结果的质量和一致性;这是一个必要的任何伟大的诊断实践。它是描述科学的必要性,和申明下的技术思想与应用程序需要执行能力稳定。
不同的审批参数结合线性、精密度、准确度、选择性和特异性,范围,健壮性和LOD,定量限5- - - - - -10]。
在开发方法中,系统研究各种参数的影响。最初确定Teneligliptin药物的溶解度。在UFLC方法中,色谱条件先进站获得伟大的高峰。最初,各种流动相组成试图药物洗提。流动相、流速的选择是基于峰值参数(高度、能力理论板块,尾矿或不对称因子),运行时间和分辨率。系统与含有流动相的流动相(甲醇):移动阶段B(乙腈):流动相C (pH值4.6的邻位的磷酸二氢钾)用于40:20:40的比值(v / v)与1毫升/分钟流量是非常强大的。识别是理想的波长246 nm的更好的探测器响应的药物。空白和Teneligliptin的色谱保留时间为3.308分钟所示图1和2分别。
图1:色谱图的空白(稀释剂)。
图2:linagliptin色谱。
从标准色谱各种系统合适的参数记录。
系统适用性
系统适用性测试是用来验证色谱系统的再现性。以确定其有效性,系统适用性测试进行了刚做好股票的解决方案。
资料解释
从上面的列表数据表1,观察系统适用性参数在验收标准(图3 - 10,表2)。
| 参数 | 验收标准 | 结果 |
|---|---|---|
| 拖尾因子 | NMT 2.0 | 1.215 |
| 理论板 | 壮年的2000 | 4078.495 |
表1:结果系统适用性
线性
| 水平 | 浓度(µg /毫升) | 峰面积的Linagliptin |
|---|---|---|
| 1 | 2 | 88571年 |
| 2 | 4 | 125745年 |
| 3 | 6 | 156769年 |
| 4 | 8 | 190716年 |
| 5 | 10 | 214721年 |
| 回归方程 | y = x + 60123 15864 | |
| 相关系数(R2) | R²= 0.995 | |
| 坡 | 15864年 | |
| 拦截 | 60123年 | |
表2:线性的结果。
图3:linagliptin的校准曲线。
图4:色谱标准linagliptin(2μG /毫升)。
图5:色谱标准linagliptin(4μG /毫升)。
图6:色谱标准linagliptin(6μG /毫升)。
图7:色谱标准linagliptin(8μG /毫升)。
图8:色谱标准linagliptin(10μG /毫升)。
图9:为空白linagliptin图。
图10:图标准linagliptin(10ΜG /毫升)。
验收标准
相关系数应该是壮年的0.95。
资料解释
从线性数据的统计处理表2Linagliptin Linagliptin很明显,响应的15%到50%之间是线性的工作浓度。相关性不小于0.95,因此线性参数在验收标准。
精度
分析方法的精度是程度的个体之间的协议测试结果的方法是反复适用于多个取样均匀样本。
系统精度
系统精度,确保分析系统正常工作(表3)。
| Sl.No | 2µg | 6µg | 10µg |
|---|---|---|---|
| 1 | 88571年 | 156769年 | 214721年 |
| 2 | 88575年 | 158999年 | 215780年 |
| 3 | 88756年 | 158950年 | 216330年 |
| 4 | 88780年 | 159795年 | 218690年 |
| 5 | 88570年 | 158989年 | 219800年 |
| 6 | 85811年 | 159790年 | 218547年 |
| 平均 | 88177.16667 | 158882年 | 217311.3 |
| 标准偏差 | 1061.829776 | 1012.633859 | 1809.184 |
| %相对标准偏差 | 1.204200379 | 0.637349643 | 0.832531 |
表3:系统精度的研究结果,SD:标准差为:相对标准偏差。
验收标准
%为Linagliptin峰面积响应来自6注射标准准备应该NMT 2.0%。
资料解释
从上面的表3,可以得出结论:区域响应是一致的相对标准偏差就证明了这一点。
方法精度
方法精度表示方法是否给单一材料或不一致的结果(表4)。
| Sl.No | 2µg | 6µg | 10µg |
|---|---|---|---|
| 1 | 88571年 | 156769年 | 214721年 |
| 2 | 89678年 | 159658年 | 215858年 |
| 3 | 89751年 | 153658年 | 215455年 |
| 4 | 89652年 | 158954年 | 215885年 |
| 5 | 90581年 | 158655年 | 215888年 |
| 6 | 91874年 | 158666年 | 225858年 |
| 平均 | 90017.83333 | 157726.6667 | 217277.5 |
| 标准偏差 | 1014.590133 | 2018.733899 | 3859.338 |
| %相对标准偏差 | 1.127099038 | 1.279893845 | 1.776225 |
表4:结果精度的方法研究SD:标准差为:相对标准偏差。
验收标准
6日%相对标准偏差计算决定应该NMT 2.0%。
资料解释
从上面的表4,可以得出结论,该方法精确。
定量的检测极限与极限
检测极限(LOD)中被测物能被定量测定的最低金额,可以检测到,但不一定是估计的数量,在规定的实验条件。
定量限度(定量限)中被测物能被定量测定的最低金额,可以量化和可接受的准确度和精密度,根据实验条件。
LOD和定量限计算根据斜率,拦截和相关系数和线性曲线的相对标准偏差。
资料解释
从上面的表5,可以得出结论,不同的可见峰出现在LOD层次浓度。LOD和定量限Linagliptin被发现分别是0.097和1.023μg /毫升。
| LOD | 0.097(µg /毫升) |
| 定量限 | 1.023(µg /毫升) |
表5:结果定量的检测极限与极限。
精度
一个分析方法的准确性是该方法获得的试验结果的亲密的真正价值(标准值)。
验收标准
个人和意味着%恢复每一层应该在98.0%至102.0%之间。
资料解释
从表6,可以得出的结论是,经济复苏的极限。因此该方法是准确的。
| Sl.No | %的水平 复苏 |
性病的配方 (µg /毫升) |
添加的药物的量(µg /毫升) | 总金额的药物 (µg /毫升) |
总数量的药物发现 | % 复苏 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 1。 | 50 | 4 | 2 | 6 | 5.9 | 98.3 |
| 5.8 | 96.6 | |||||
| 6.2 | 103.3 | |||||
| 的意思是 | 99.4 | |||||
| 2。 | One hundred. | 4 | 4 | 8 | 8.3 | 103.7 |
| 7.8 | 97.5 | |||||
| 8.1 | 101.2 | |||||
| 的意思是 | 100.8 | |||||
| 3所示。 | 150年 | 4 | 6 | 10 | 9.8 | 98年 |
| 9.7 | 97年 | |||||
| 10.4 | 104年 | |||||
| 的意思是 | 99.6 |
表6:结果准确性的研究方法。
鲁棒性
分析性程序的健壮性是衡量其能力不受影响小,但故意变化方法参数和提供了一个指示正常使用时的可靠性。
验收标准
►尾矿因素应该NMT 2.0。
►理论板块应该NLT 2000
►相对标准偏差应NMT 2.0%
资料解释
从表7它可以得出结论,没有观察到显著变化由于上述色谱条件的变化,因此,方法是健壮的。
| 条件 | 尾矿 | %相对标准偏差 | 理论板 | %相对标准偏差 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 这样条件(优化方法) | 1.215 | - - - | 4478.4 | - - - | |
| 流动相比例 因此(50:50) |
25:75 | 1.341 | 0.9789 | 4417.8 | 0.6811 |
| 45:55 | 1.358 | 1.6086 | 4415.6 | 0.7060 | |
| pH值的变化 | 下降(-0.2单位) | 1.328 | 0.4918 | 4419.3 | 0.6642 |
| 增加(+ 0.2个单位) | 1.322 | 0.2654 | 4421.3 | 0.6415 | |
| 流量 | 下降(-0.2毫升/分钟) | 1.358 | 1.6086 | 4425.9 | 0.5896 |
| 增加(+ 0.2毫升/分钟) | 1.366 | 1.9022 | 4430.5 | 0.5376 | |
| 列温度 | 减少(5°C) | 1.354 | 1.4612 | 4435.6 | 0.4801 |
| 增加(+ 5°C) | 1.333 | 0.6797 | 4440.9 | 0.4204 | |
| 波长 | 减少(1纳米) | 1.348 | 1.2392 | 4445.3 | 0.3709 |
| 降低(2海里) | 1.352 | 1.3873 | 4447.9 | 0.3416 | |
| 增加(1纳米) | 1.356 | 1.5350 | 4449.9 | 0.3192 | |
| 增加(2海里) | 1.358 | 1.6086 | 4321.9 | 1.7783 | |
表7:鲁棒性的结果。
强制降解研究
压力研究进行Linagliptin药物50μg /毫升浓度。这里大部分药物暴露在酸性压力增加1.0毫升盐酸0.1药物解决方案和1.0毫升的0.1 m氢氧化钠中和,在0分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时,6小时分别和32小时。同样,基本应力进行了研究通过添加1.0毫升的0.1 M氢氧化钠和中和1毫升0.1盐酸。氧化的研究取得了大量药物通过添加1.0毫升的3%过氧化氢,热加热所进行的研究样本在600 C和紫外线研究也由样本分别在紫外线灯450ºC。整个样本被放置在不同的容量瓶(10毫升)和高效液相色谱级甲醇溶解。最后测定药物浓度是由甲醇和注入色谱系统。所有这些稳定性研究,降解的发展项目被对比确认,安排的色谱普通轻的条件下保存。每一个强调样本进行了分析改进的UFLC法。Linagliptin的退化数据显示(11- - - - - -16]。
酸的压力
2毫升样品加入2毫升0.1 n HCl保持为5分钟,然后添加2。毫升0.1 n氢氧化钠,然后注入这个样例36小时每隔30分钟,1小时。,分别为1.30分钟(图11)。
图11:对酸色谱压力。
基本的压力
2毫升样品加入2毫升0.1 n氢氧化钠保持为5分钟,然后加入2毫升盐酸0.1 n,并注入样品(图12)。
图12:色谱图基本压力。
过氧化应激
2毫升样品加1毫升3%过氧化氢溶液和注入这个示例(图13)。
图13:色谱过氧化应激。
热应力
带2毫升样品和热1小时。在80 c和注入样品(图14)。
图14:热应力的色谱图。
光解的压力
取代2毫升样品在紫外室1小时。紫外线灯450 ocrespectively然后注入样品(图15,表8)。
图15:色谱的光解的压力。
| 时间 | 药物 | 紫外线 | 热 | 0.1 n盐酸 | 0.1 n氢氧化钠 | 3% h2O2 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 0分钟 | Linagliptin | |||||
| 89.23% | 80.76% | 87.79% | 89.35% | 81.34% | ||
| 30分钟 | Linagliptin | |||||
| 85.34% | 77.31% | 84.14% | 87.34% | 74.34% | ||
| 1小时 | Linagliptin | |||||
| 82.43% | 60.16% | 78.86% | 80.34% | 68.23% | ||
| 2小时 | Linagliptin | |||||
| 77.34% | 57.14% | 74.78% | 78.38% | 60.87% | ||
| 4人力资源 | Linagliptin | |||||
| 69.34% | 31.69% | 67.27% | 70.34% | 44.34% | ||
| 8小时 | Linagliptin | |||||
| 52.23% | 20.15% | 59.65% | 57.23% | 32.62% | ||
| 16小时 | Linagliptin | |||||
| 43.87% | 19.6% | 44.64 | 43.24% | 22.23% | ||
| 32小时 | Linagliptin | |||||
| 34.24% | 推荐- - - - - - | - - - | 推荐- - - - - - | - - - |
表8:后复苏研究结果linagliptin压力条件(%恢复的药物)。
上述RP-UFLC分析方法满足所有验证参数,如准确性、精度、系统适用性,特异性,线性检测器的响应,坚固性和鲁棒性。同时该方法满足强制降解研究。因此,验证方法可用于常规测定稳定性研究在制药行业质量控制实验室。
作者表达自己衷心感谢校长,js药学院,Mysuru,提供必要的设施来开展研究工作。
