研究与评述:生物学研究雷竞技苹果下载杂志
菜单ISSN: 2322 - 0066
ISSN: 2322 - 0066
印度布尔德万大学生物技术系，印度西孟加拉邦布尔德万-713104
收到:14/11/2013接受:30/11/2013发表:12/12/2013
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顺势疗法是医学生物学的一个分支，为人类服务了两个多世纪，在研究领域仍然是罕见的。目前的方法是使用这个宇宙来检查它的作用和副作用(如果有的话)，这些作用和副作用可能会或可能不会引起原核和真核系统的任何变化。因此，它可以被认为是一种众所周知的顺势疗法药物，即硝酸银或硝酸银(AgNO3)，它是对抗疗法药物“头孢嗪”的类似物。顺势疗法药物有不同的顺势疗法效力(稀释度)，但出于实验目的，它考虑了粗提取物(母酊剂)，安全剂量(效力30)和以上的更高稀释度200。药物作用的评估是在两个系统上进行的，即体内(体内)和体外(实验室)。在体外系统中，研究了细菌(革兰氏阳性、革兰氏阴性)和真菌在正常条件下的生长情况和顺势药物治疗后的生长情况。此外，分子分析是通过检查中央教条通路来完成的。而在体内系统中，在真核生物(遗传纯种白化大鼠)中检查了剂量有效性，并研究了与相关器官有关的各种生理参数。
细菌和真菌生长，中心教条，真核生物体，顺势疗法效力。
本研究的主要目的是研究顺势疗法药物对真核系统解毒机制的有效性，并规范其有效方式体外，已分子分析。还希望揭示表型特征和生理参数的不同变化。顺势疗法是Samuel Hahnemann在1796年根据他的“以毒毒毒”学说发展起来的一种替代医学体系，根据该学说，在健康人身上引起某种疾病症状的物质可以治愈病人身上类似的症状。顺势疗法经常被批评缺乏可用的研究证据。它使用许多动物、植物、矿物和合成物质来治疗。大多数关于顺势疗法的主流研究结果往往是不确定的主要原因之一，因为所使用的方法通常不遵守顺势疗法的原则。不幸的是，补救措施往往不是单独规定，而是根据病理的典型临床表现来选择。“经典顺势疗法被定义为全面的顺势疗法病史记录，然后是单一的个体化治疗处方，随后可能会根据症状的变化而改变治疗方法。如果没有全面的顺势疗法病史，并且所有患者接受单一、相同的治疗，则干预措施被归类为“临床顺势疗法”。在治疗疾病的过程中，所使用的过程被称为“强化”，即用酒精或蒸馏水稀释物质，然后在“震荡”过程中对弹性体进行10次猛烈震动。 Accepting that homeopathic medicines have a biological effect, even in potencies where dilution goes beyond Avogadro’s number, the point at which not a single molecule of the original substance is likely to remain in the solution is not easy.
硝酸银又称硝酸银(AgNO)3.)，是一种无机化合物，因其防腐性能而用作防腐药物。阿根廷氮的俗称是地狱石或魔鬼石。它是通过将硝酸银溶解在酒精中形成母酊剂来制备的。硝酸银的药用可以追溯到中世纪，当时它被用作防腐剂和腐蚀剂来治疗伤口。今天硝酸银仍然用于治疗疣，虽然不常见。治疗疣仍然会发生轻微中毒，这让人们对这种化合物的毒性有了一些了解。轻度中毒的症状是焦虑和躁动，最初由哈内曼证实，1845年又由穆勒证实。
最重要的作用是对血液，产生抗塑作用，使其更流畅，颜色更深;红色小体失去了它们的着色物质;血液在血管中淤积，营养受到干扰。神经中枢也受到影响，引起大脑和脊柱紊乱的各种症状。硝酸银用于消除各种类型的疾病，如紧张，忧虑，消化系统疾病，哮喘和焦虑。它的效力范围在6摄氏度到200摄氏度之间。这种顺势疗法的特殊治疗用途非常适合中世纪，当它被用作防腐剂和腐蚀剂来处理伤口时。
从细菌和真菌源中分离基因组DNA
革兰氏阳性芽孢杆菌(MTCC-2497)和革兰氏阴性芽孢杆菌大肠杆菌(BL-12)作为菌株，在LB肉汤中培养过夜，转移到微离心管中离心。将颗粒重悬于TE缓冲液(Tris-EDTA, pH 8.0)中。加入10% SDS孵育。加入苯酚-氯仿混合物(1:1)混合。将混合物以10000 rpm离心。将上水相转移到新管中，用等体积的苯酚-氯仿重新提取。再次以10,000 rpm的转速离心混合物。取上水溶液与3M醋酸钠(pH 5.2)混合，加入异丙醇轻轻混合，沉淀DNA。再次以10000 rpm离心沉淀DNA。DNA用70%乙醇洗涤30秒，并短暂离心。 The DNA was re-suspended in TE buffer.
取真菌培养液(YEPD)，将0.5M悬浮缓冲液(Tris clide, pH-7.5)与沙粒混合，冰保存15秒。加入1% SDS孵育。离心后加入苯酚氯仿混合物(1:1)离心。在上清液中加入3M醋酸钠(pH 5.5)，然后立即加入无水酒精。然后在-20°C的冷冻室中放置30分钟。冷却后离心，并用70%乙醇洗涤球团。最后它被挂在TE缓冲区中。
琼脂糖凝胶电泳DNA
琼脂糖凝胶(0.8%)溶解于1X TAE缓冲液中。在倒凝胶之前插入梳子。凝胶静置30-40分钟凝固，取下梳子。电泳槽内填充1X TAE电泳缓冲液。将1体积的样品缓冲液与5体积的DNA样品混合。将样品应用于凝胶形成的孔中。在凝胶中加入浓度为0.5μg/ml的溴化乙锭。连接电极，施加70伏电流1小时。电泳后，在紫外光下观察凝胶。
十二烷基硫酸钠(SDS)凝胶电泳:
sds -凝胶电泳按照Konar et al.(2013)采用的方法进行。为此，SDS板被组装起来。在锥形烧瓶中制备丙烯酰胺分离凝胶，并将其倒入板间。制备了丙烯酰胺堆积凝胶。这些成分混合后倒在分离凝胶上。水井是用梳子准备的。用等体积的样品缓冲液制备样品。然后在沸水浴中加热样品并装载。施加的电压取决于凝胶的尺寸。允许凝胶运行，直到样品到达溶解凝胶的底部。 The power supply was then turned off; the gel was removed from the apparatus. The gel was allowed to stain overnight. Next day, the gel was dipped in destaining solution and observed.
体内工作:
取4只白化大鼠，用酒精治疗作为对照组，分别为硝酸银母、硝酸银潜能-30、硝酸银潜能-200。60 d后处死，观察有无囊肿、脏器大小变化及肝、心、脾、肾有无异常等生理参数(表1)。研究其表型和血液学参数。从心脏取血放在载玻片上，用Leishmann染色，用水冲洗，在显微镜下观察。
表1:在在活的有机体内实验组:取4只白化大鼠;研究了顺势疗法不同效价对患者生理参数的影响
在体外条件下观察细菌生长、细菌与顺势疗法药物、真菌与顺势疗法药物三个结果。当细菌正常生长时，光密度值随时间增加。细菌生长时用顺势疗法药物，光密度中提到表2随着顺势疗法抑制细菌的生长，光密度值下降，因此革兰氏阴性细菌的光密度值下降，而革兰氏阳性细菌的光密度值逐渐增加。对中心规律进行了研究，发现DNA(琼脂糖凝胶电泳)和蛋白质(SDS-PAGE)的条带存在(+)或缺失(-)表3。
表2:细菌和真菌培养物400纳米时的光密度
表3:琼脂糖凝胶电泳及SDS-PAGE结果
从图1，可以得出结论，顺势疗法药物对真菌的生长没有任何显著的影响，因为它们的生长是静止的。由于细菌/真菌的正常生长，图表最初向上移动，然后下降(杀菌/杀真菌)，或者由于顺势疗法的效力而处于静止阶段。
图1:氮足菌对真菌的影响
令人惊讶的是，顺势疗法药物并没有抑制革兰氏阳性细菌的生长，因为它们随着光密度的增加而显示出正常的生长活性(图2)。另一方面，顺势疗法药物对革兰氏阴性菌生长的抑制作用表现为光密度(图3)。
图2:硝酸阿根廷菌对革兰氏阳性菌的影响
图3:硝酸阿根廷菌对革兰氏阴性菌的影响
血膜镜检显示，强力-200硝酸argentum nitum处理的细胞有收缩，其余细胞无明显变化(图4)。
图4:显微玻片;(a)对照血膜玻片，(b) AgNO血膜玻片3.-200年
硝酸银对小鼠肝脏囊肿形成的影响(图5)。与低稀释度(效价- 30)的药物相比，高稀释度药物(效价- 200)处理的小鼠显示出更多的囊肿，因为它更容易被其身体细胞吸收。
图5:小鼠解剖;(a) AgNO处理小鼠肝脏单个囊肿3.AgNO对小鼠肝脏双囊肿的影响为30 (b)3.效力- 200。
图6:组织视图;(a)小鼠器官作为对照，(b) AgNO处理小鼠器官3.-30， (c) AgNO3.(d)粗AgNO处理3.
本实验旨在研究顺势疗法药物硝酸银对真核和原核系统的影响。体外和体内均显示出顺势疗法的解毒效力。但革兰氏阳性菌由于某些未知的原因，其光密度随时间呈持续增加的趋势。在体内条件下，治疗组与未治疗组相比，出现脾脏变小、囊肿形成等生理变化。还观察到一些表型变化，如头发脱落和体重突然变化。我们都知道顺势疗法药物没有副作用，但从这个实验中我们可以得出结论，顺势疗法药物长期使用是不安全的。
