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木腐果甲醇提取物对白化Wistar大鼠冷应激性胃溃疡细胞保护的影响

AN Archibong, AO obmbe, CC Mfem, DE Ikpi和VU Nna*

尼日利亚克罗斯河州卡拉巴尔市卡拉巴尔大学医学院生理学系。

*通讯作者:
VU Nna
生理学系
医学院
卡拉巴大学
尼日利亚克罗斯河州。

收到:03/03/2014接受:28/03/2014

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摘要

随着水果消费的广泛普及Xylopia在尼日利亚,这项研究旨在研究这种水果对胃溃疡的影响。将体重150 ~ 200 g的白化雄性wistar大鼠12只,随机分为两组(n = 6),驯化7 d后,试验组以木蠹甲醇提取物10 mg/100g /日剂量口服,连续14 d。所有动物都可以自由地获得食物和水。处死动物,采用标准方法测定胃酸分泌、溃疡评分和黏附粘液。组胺分别使用促酸剂和阻滞剂西咪替丁来加重和减少酸分泌。试验组平均基础胃酸排出量显著低于对照组(P<0.05)。实验组给予组胺后,平均胃酸输出量显著低于对照组(P<0.001)。西咪替丁给药后各组患者的胃酸排出量差异无统计学意义。试验组平均溃疡评分显著低于对照组(P<0.001)。试验组平均胃粘液量显著低于对照组(P<0.01)。木草果提取物可减少胃酸分泌,增加胃粘液分泌,对治疗胃溃疡有一定的疗效。

关键字

冷应激,细胞保护,胃溃疡,Xylopia aethiopica

介绍

胃溃疡指的是胃穿孔或单纯的损伤粘膜。胃或胃溃疡的发生取决于胃侵犯因素和胃保护因素之间的平衡[1]。当出现妥协时,胃侵犯因素(胃酸分泌、运动异常、幽门螺杆菌感染),没有相应增加胃保护因子(粘液分泌、粘液分泌细胞和胃粘膜细胞增殖等),就会产生胃溃疡。胃溃疡的发病率是由生活方式、年龄、环境等因素决定的[23.]。

Xylopia aethiopica是一种广泛使用的药用植物,属于番荔枝科(蛋黄科)[4]。它常见于非洲大草原地带的低地森林和湿润的边缘森林,但主要分布在非洲西部、中部和南部[4-6]。这是一种绿色芳香树,可长到20米高,果实辛辣[6]。

在尼日利亚的大部分地区,水果Xylopia aethiopica在食物中作为香料被食用。果提取物Xylopia aethiopica已被证明对治疗各种疾病有益。Xylopia aethiopica已被认为对治疗痢疾有益[7),疟疾8]。它的精油常与面霜和香水等化妆品一起使用,也被用作杀虫剂[9]和作为防腐剂[10Woode1(2011)报道了古塞果提取物可增加类固醇激素和精子数量,并有镇痛作用[1112]。

随着X的广泛推广使用。aethiopica在各种疾病的治疗中,以及在膳食中经常作为香料使用时,确定其对胃溃疡的作用变得重要,以便更好地向公众宣传其使用情况。

材料与方法

植物原料及提取物的制备

干果Xylopia aethiopica都是从尼日利亚克罗斯河州卡拉巴尔的瓦特市场买的。它是由卡拉巴尔大学植物系的首席植物标本室官员确定的。将干果洗净,用电动搅拌机磨成粗粉。1gXylopia aethiopica然后在10毫升甲醇中浸泡,搅拌均匀。混合物保持在无空气的室温下,以使甲醇蒸发。从残留物中制备出10毫升橄榄油中1克的原液。提取物的中位致死剂量采用Lorke,(1983)的方法计算[12]。本研究采用每日口服剂量10mg /100g。

动物制备与分组

雄性白化wistar大鼠12只,体重150 - 200 g,来自尼日利亚卡拉巴尔大学医学院生理学系动物馆。所有的动物都有食物和水随意,并置于通风良好的笼子中,暴露于室温下,12/12小时明暗循环。驯化7 d后,随机分为2组(n = 6),第1组为对照组,口服蒸馏水0.2 ml;第2组为处理组,口服蒸馏水0.2 mlXylopia aethiopica每天以10毫克/100g体重的水果口服剂量,持续14天。

溃疡诱导

采用Senay和Levine, 1997的方法建立应激性溃疡[14]并由Wong等人修改。[15禁食24小时后,动物被放置在一个装有冰块的冰室中,温度为4 - 10℃,4小时后,将它们取出并麻醉。

胃酸测定

胃酸测量由Gosh和Schild [16] Osim等改进的连续灌注法[17]。所有动物在测定胃酸前禁食24小时。每只动物接受尿素烷(6ml/kg 25% (v/v)溶液;西格曼,英国)腹内麻醉。通过半圆形切口暴露气管并插管。另一根插管穿过口腔和食道,直到到达胃。然后在颈部的食道周围用结扎法牢牢地绑住。然后沿着白线切开腹部以减少出血。胃暴露,幽门端在幽门括约肌处插管。等渗(0.9%)生理盐水通过食管插管轻轻注入,冲洗胃内容物。 The perfusate was allowed to flow freely after clearing the stomach of its contents. The abdominal incision was then covered with a moist cotton wool soaked in normal saline. The stomach was continuously perfuse with normal saline at the rate of 1ml/min. The pH of the saline was maintained at 7.0 and the body temperature of the rat was maintained at 37oC by a heating lamp. This was monitored using a rectal thermometer. The flow was adjusted to give an effluent volume of about 1ml per minute. The effluent was collected at 10 minutes interval and care was taken not to ligate the blood vessels to avoid collecting a stained perfusate. At 10 minutes interval, the perfusate was titrated against 0.01N NaOH (May and Baker, UK) to determine its total acidity, using phenolphthalein as indicator. The experiments were repeated using histamine (100mg/kg body weight) and cimetidine (100mg/kg body weight) as acid secretagogue and blocker respectively.

Cytoprotection研究

每只动物的胃都被分离出来,清洗并沿着大弯曲切开,用生理盐水冲洗。使用大头针将组织固定在适当的位置以使其可见。用放大镜和游标卡尺测量溃疡程度。溃疡评分采用Alpin法和Wards法[18和阿德尼伊和奥洛沃科伦[19]。

胃粘液测量

采用Tan等方法测量胃黏液[20.在开始实验程序之前,动物被禁食24小时,之后它们被处死,胃被切除。每个胃都沿着大曲率被切开,摊在解剖板上,用销钉固定边缘。用刮刀刮去粘膜表面的胃粘液,并将其放入预先称重的装有3ml蒸馏水的灭菌样品瓶中。然后将装有蒸馏水和收集的粘液的样品瓶放在灵敏的电子天平上称重。粘液输出量即为装水的样品瓶与装水和粘液的样品瓶的重量差。数值被记录。

统计分析

结果以均数±均数标准误差(SEM)表示。数据分析采用学生t检验。P = .05被认为是显著的。采用SPSS和Excel Analyzer软件进行分析。

结果

不同组间胃酸分泌的比较

对照组和试验组的平均基础胃酸输出量分别为1.30±0.01和0.67±0.03 μmol/10min。试验组基础胃酸排出量显著低于对照组(P<0.05)。对照组和试验组给予组胺后平均胃酸排出量分别为3.67±0.69和2.31±0.19 μmol/10min。在组胺的反应中,试验组的酸产量显著(P<0.001)低于对照组。对照组和试验组给予西咪替丁后胃酸输出量分别为0.84±0.18 μmol/10min和0.68±0.09 μmol/10min。西咪替丁给药后各组患者的胃酸排出量差异无统计学意义。(无花果12).

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图1:不同实验组平均胃酸产量的比较。

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图2:不同实验组平均胃酸产量的比较。

不同实验组应激性溃疡的比较

对照组溃疡评分为5.6±0.4分,试验组溃疡评分为1.0±0.0分。试验组平均溃疡评分显著低于对照组(P<0.001)。(无花果3.).

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图3:各组粘液分泌情况比较。

胃粘液量

对照组胃粘液量为0.01±0.00g,试验组胃粘液量为0.03±0.00g。试验组胃黏膜平均分泌量显著低于对照组(P<0.01)。(无花果4).

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图4不同实验组黏液粘附情况比较。

讨论

溃疡由于其高死亡率和发病率,是全世界高度关注的问题。本研究的目的是研究其对细胞的保护作用Xylopia aethiopica白化wistar大鼠冷应激性溃疡模型的建立。

胃酸分泌增加是胃溃疡程度的主要决定因素。对照组的平均基础胃酸输出量显著降低Xylopia aethiopica治疗组与对照组比较。与对照组相比,提取物处理组对促分泌剂组胺的平均酸分泌显著降低。给予西咪替丁(组胺H2受体阻滞剂)可减少胃酸输出,但与对照组相比不显著。的果实Xylopia aethiopica据报道含有几种脂肪酸和前列腺素的前体[21]。据报道前列腺素可减少胃酸分泌。Xylopia aethiopica可促进前列腺素从而减少胃酸分泌[22-24]。

胃粘膜黏液的平均黏附量在对照组显著升高Xylopia aethiopica治疗组与对照组比较。Xylopia aethiopica与对照组相比,治疗组溃疡评分显著降低。这种降低胃溃疡的效果与治疗组胃酸分泌(胃溃疡侵袭因子)减少,粘液分泌(胃溃疡保护因子)增加直接相关。

位于胃窦的胃粘液分泌细胞会分泌含有一定量碳酸氢盐的粘液[25]。治疗组粘液分泌增加有助于胃酸中和程度,因此是胃保护因素。

除胃酸分泌外,先前的研究亦显示前列腺素是分泌粘液的重要前体[2627]。Barminas [21表明Xylopia aethiopica含有前列腺素形成所必需的多不饱和脂质,提示其可能发挥保护胃粘膜和增强粘膜血流量的作用。

结论

从本研究的结果,我们因此得出结论,水果提取物Xylopia aethiopica可能有助于治疗胃溃疡,因为它能减少胃酸分泌,增加胃粘液分泌。”

参考文献

全球科技峰会