系统杀菌剂阿米星和二甲烷M-45对玉米生长参数和抗氧化酶的影响

摘要

杀菌剂用于保护最常见的各种真菌疾病的种子。杀菌剂的使用对作物生长是有益还是有害一直是一个争论的问题。因此，本研究旨在评价灭米星和二甲烷m -45杀菌剂对玉米幼苗各项生长参数和抗氧化酶的影响。研究参数为发芽率、根长、笋长、活力指数、鲜重、干重和活力率。使用了五种不同浓度的杀菌剂，包括推荐剂量的杀菌剂。在所有研究的浓度中，发芽率、根长和芽长均有所增加，信号强度指标、鲜重和可行性比例均有所增加，干重则有所下降。在各课浓度下，发芽率、根长、芽长均有增加，而信号强度指标、鲜重和可行性比例及干重均有下降。经咪星坦和二甲烷M-45处理后，玉米根系抗氧化酶水平升高。过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、硫氧还蛋白还原酶、抗坏血酸过氧化物酶和愈创木酚过氧化物酶活性呈比例增加，且在高浓度(75和100 ppm)时更有意义。从这项研究中得出的结论是，在推荐剂量下，有真菌存在的幼苗的持水能力会增加，但高于推荐剂量可能对幼苗的生长有害。

关键字

米星达，二甲烷M-45，杀菌剂，抗氧化剂，玉米

介绍

大量使用比其他除害剂更具致癌风险的杀真菌剂[2]可能对动物及人类造成不良影响[21］．采用全身性杀菌剂处理种子是控制玉米侵染的传统方法，玉米侵染是在集约化生产中通过种子传播的。适当配方的种子处理会影响植物的初始发育，进而影响Tatrmurahal随后的生长发育，最终影响回报水平[10］．

玉米是研究得最好的植物之一，具有植物的特点，关于玉米生物学的许多方面的大量信息，玉米是一种一年生草，长度可达4米。

植物有一个先进的防御系统对抗活性氧，包括酶和非酶的手段。过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶和guaïacol-peroxides是抗氧化酶，在保持H₂O₂水平无害，因此有助于保护植物免受ROS损害[13］．

该研究选用的杀菌剂是Amistar和Dithane M-45。Amistar是先正达公司生产的广谱系统性杀菌剂。其活性成分为250 g/L的偶氮菌酯，具有一种新颖的生化作用方式:抑制真菌线粒体呼吸[3.］．它对攻击农作物的所有四类真菌都有活性。它已在全球85个国家的80多种作物上注册使用。今天，农民们使用阿米斯塔来控制亚马逊和大麦等谷物以及葡萄藤、水果、蔬菜、香蕉、大米、大豆、草皮和观赏植物的真菌。

二甲烷M-45是一种广谱接触杀菌剂，由陶氏农业科学公司生产。雷竞技网页版其活性成分为800克/公斤代森锰锌，具有多位点作用模式，可影响真菌中的许多酶[4］．二甲烷M-45被推荐用于控制各种疾病。当杀菌剂在一个有规律的、预防性的程序中使用时，可以达到最佳的疾病控制。

关于真菌对豆类和谷物，特别是玉米的影响，现有的信息很少。因此，本研究旨在了解常用真菌的影响。米星坦和二甲烷M-45对玉米幼苗生长的影响。

材料与方法

合成杀菌剂

研究选用的杀菌剂是目前辣椒农场使用的阿米斯塔和二甲烷M-45。前者来自先正达公司，后者来自L&L胡椒农场。杀菌剂通常在农场中混合使用，用量为175-210克/公顷的Amister(280克混合在900升水中)和3-4kg/公顷的Dithane M-45(2公斤混合在900升水中)(L. Campagnolo，个人通信)

玉米(Zea may L.)

玉米属属于禾本科玉米亚科，芒萁亚科，芒萁科。玉米属有五个品种。

生长参数

本研究使用杀菌剂阿米星和二甲烷M-45。四种不同的浓度(25。50.研究中使用了75和100 ppm的系统杀菌剂(Amistar和Dithane M-45)溶液。将健康玉米种子用2.5%次氯酸钠在乙醇中消毒3 min，然后用无菌水清洗。在发芽箱(Gerbox)中进行萌发，种子被放置在事先消毒过的双层滤纸中。种子在装有25粒种子的齿轮箱中孵育。50.75和100 ppm的系统杀菌剂(Amistar和Dithane M-45)。未处理的培养皿作为对照。 The seeds were germinated under controlled conditions. The seeds were then allowed to germinate for 24 hrs. Germinated seeds were then transferred in gearbox lined with Whatmann filter paper no. 1. At the start of the experiment 3 ml of respective concentration was added to moisten filter paper in each gearbox and every day, 2 ml of respective concentration was added for consecutive 6 days. Three sets in each concentration were maintained along with the control for comparison. On the seventh day, various growth parameters were evaluated as follows:

发芽率

发芽率由Rehman等给出的公式计算，[22]：

发芽% = no。种子发芽数/总数量。种子× 100

根与梢长

用标准厘米尺度记录幼苗的根和梢长[14］．

活力指数

活力指数采用以下公式计算，公式由Abdul Baki和Anderson提出[1]：

活力指数=发芽% ×(根长+芽长)*(*表示根长、芽长单位为cm)

鲜干重量

将各处理4粒种子称量以确定鲜重，然后在80˚C的烘箱中干燥24小时，得到干重[14］．鲜重和干重以克计。

生存能力的百分比

它是用Lakon [15]，其中使用无色的三苯四唑染料，当通过呼吸胚胎减少时，即表明萌发。

为了提取抗氧化酶，8天的根尖用0.1 M磷酸钠缓冲液(pH 6.8)在冷却的杵和臼中均质。按照Loggin等人的描述进行提取。[16］．用二极管阵列分光光度计测定每种提取物的酶活性。试验在总体积为3 ml、25°C、3 min的条件下进行，使用15 - 20个根尖重复试验3次。

过氧化氢酶(CAT)，按cacmac和Horst方法测定。8]，超氧化物歧化酶[20.]，山梨醇脱氢酶，硫氧还蛋白还原酶，guaïacolperoxydase (GPX)， [20.］．抗坏血酸过氧化物，[19]，按Bradford方法测定各提取物中的蛋白质[7］．

结果

现在的结果是。表1发芽率增加，根长增加;不同浓度杀菌剂对玉米幼苗茎长、活力指数的影响。对照的发芽率为56.33±3.3,25、50、75和100 ppm浓度下，灭真菌剂的发芽率分别为78.0±6.1、87.5±1.8、92.13±3.4和79.16±1.3。在浓度为75 ppm的Amistar杀菌剂处理下，种子发芽率增加最大。对照的发芽率为56.33±3.3%，25、50、75和100 ppm浓度的二烷M-45杀菌剂的发芽率分别为69±3.1、78.5±2.7、85.16±1.8和91.12±2.4。在浓度为100 ppm的Dithane M-45杀菌剂处理下，种子发芽率增加最大。结果表明，未处理玉米幼苗根系长度为5.45±1.2 cm。施用25ppm、50ppm、75ppm和100ppm阿米斯达杀菌剂处理的玉米幼苗根长为8。分别为84±2.5 cm、9.8±4.2 cm、11.8±1.43 cm和10.6±0.58 cm。Amistar杀菌剂浓度为75ppm时根长最大。 Root length of maize seedlings treated with 25, 50, 75 and 100 ppm of Dithane M-45 fungicide was found to be 7. 46 ± 1.8, 8.94 ± 1.1, 10.2 ± 2.6 and 11.2 ± 1.12 cm respectively. Maximum root length was found at 100 ppm concentration of Dithane M-45 fungicide. The present data also, showed that the short length in control seedlings was 6.2±1.10 cm and at 25, 50, 75 and 100 ppm concentration of Amistar fungicide was found to be 8.12 ± 0.64, 9.21 ± 0.52, 10.13 ± 0.73 and 9.23 ± 0.81 cm respectively. The highest increase was found at 75 mg/l concentration of Amistar fungicide. While the short length of maize seedlings treated with 25, 50, 75 and 100 ppm of Dithane M-45 fungicide was found to be 6. 88 ± 1.8, 7.8 ± 2.6, 8.8 ± 2.5 and 10.4 ± 0.78 cm respectively. The short length was increased with increase in concentration of fungicide. The present data showed that the Vigor index of maize seedlings treated with 25, 50, 75 and 100 ppm was found to be 1433.2 ± 221.2, 1697±82.2, 1806.4 ± 240.7 and 1616.2 ± 23.1 respectively when compared with control (Vigor index of maize seedling in control was (920.1±120). While Vigor index of maize seedlings treated with 25, 50, 75 and 100 ppm of Dithane M-45 fungicide was found to be 1311.2 ± 111.4, 1421 ± 54.2, 1588.4 ± 256.2 and 1686.4 ± 44.2 respectively.

现在的结果是表2．结果表明，施用杀菌剂可提高玉米幼苗鲜重、干重和活率。

本试验数据表明，与对照相比，施用阿米星和二甲烷M-45杀菌剂处理的玉米种子鲜重增加。25、50、75和100 ppm阿米星处理的玉米种子鲜重分别为0.84±0.31、1.18±0.18、1.26±0.26、1.31±0.41和1.31±0.32倍。与对照相比，异米星和二甲烷M-45杀菌剂处理的玉米种子干重降低。在25、50、75和100 ppm浓度下处理玉米种子的干重分别为0.11±0.018、0.10±0.045、0.10±0.22和0.09±0.16 g。

结果表明，25、50、75和100 ppm浓度下玉米幼苗的活力率分别为72.12±3.3、78.5±6.7、82.22±4.2和88.6±6.1，而对照为54.22±4.2。25、50、75和100 ppm二烷M-45杀菌剂处理的玉米幼苗存活率分别为68.16±2.8、72.8±4.4、80.22±3.2和81.55±3.5。现在的结果是表1结果表明，与对照相比，异米星和二甲烷M-45杀菌剂对抗氧化酶CAT、SOD、TrxR、GPX和APX活性有显著提高。CAT、SOD和TrxR含量随Amistar和Dithane M-45杀菌剂浓度的增加而增加，在100 ppm时达到最大值(%和%)。结果表明，杀真菌剂Amistar和Dithane M-45对玉米根系中guaïacolperoxydase (GPX)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)含量有显著的促进作用，在75和100 ppm时达到最大值(分别约为80%和140%)。

讨论

结果表明，杀真菌剂浓度对玉米幼苗生长参数有显著影响，且随着杀真菌剂浓度的增加，玉米幼苗生长参数呈上升趋势。这一结果得到了Horii等人的支持，[9，7］．他们发现噻虫嗪能刺激大豆、豌豆和玉米的种子萌发。这一结果与Marini等人相反，[17他们报告说杀菌剂对种子萌发产生负面干扰。结果表明，随着杀真菌剂用量的增加，根长和梢长均增加。这与Sarkar和Saxena的观点一致[24]和本索尔坦等人，[6］．目前的研究结果与Windham & Windham相反[26他们指出，以甾醇生物合成抑制剂为基础的系统杀菌剂与植物生长调节剂密切相关，而植物生长调节剂以高于标记的速率使用会缩短节间，从而可能导致枝条生长缓慢。此外，本试验数据还表明，与对照相比，在所有浓度下，灭米星和二甲烷M-45杀菌剂的活力指数均有显著提高。Doyle等人(2001)证实了这些发现，他们证明了用噻虫嗪处理的幼苗具有提高幼苗活力的特殊优势

目前的数据表明，增加浓度的阿米星和二甲烷M-45杀菌剂处理玉米幼苗的鲜重增加。这些结果与Avinash和Hoshmani的发现一致。5多菌灵处理的高粱种子叶片鲜重随杀菌剂浓度的增加而增加。结果与三环唑对玉米种子的影响相似[5］．结果表明，在杀真菌剂的作用下，干重降低，这可能是由于幼苗保水能力的提高。结果与Minamor [18]，他们报告杀菌剂处理和未处理的可可苗的干重没有差异。结果表明，随着杀菌剂浓度的增加，菌体活菌率呈上升趋势。

本研究表明，随着杀真菌剂用量的增加，根系CAT、SOD和TrxR含量增加。种子对米星塔和二甲烷M-45活性成分的吸收。后期萌发爆发，包括穿透各种组织细胞和根。种子对米星达和二甲烷M-45活性成分的吸收。为了应对杀菌剂的毒性作用，根细胞启动了一套主要依赖于ATP的解毒机制，以维持可能的正常生长速率[11］．Amistar和Dithane M-45杀菌剂可提高玉米根愈创木酸过氧化物酶(GPX)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)含量。这些结果与Avinash和Hoshmani的结论一致[5］．Mittelstaedt等人认为细胞核和线粒体是毒性作用的主要目标，可能是通过增加自由基硫氧还蛋白过氧化物酶的产生，硫氧还蛋白过氧化物酶是一种可以中和过氧化氢的酶。硫氧还蛋白过氧化物酶-1需要从硫氧还蛋白中还原等量物。硫氧还蛋白依次维持在硫氧还蛋白还原酶活性和NADPH的还原状态。

结论

本试验结果表明，两种杀菌剂的浓度均适宜种子萌发，但高于推荐浓度的杀菌剂不适宜种子萌发。用系统杀菌剂Artea处理硬粒玉米，结果表明该杀菌剂可引起负代谢和生化变化，证实了杀菌剂对植株的毒性作用

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