鞣花酸防止LPS-Induced急性肺损伤通过抑制核转录因子k B,促炎细胞因子和白细胞介素- 10”的增强

文摘

鞣花酸是一种天然多酚化合物存在于许多水果,坚果五倍子和植物提取物。在目前的研究中,我们探讨了鞣花酸的调节能力有限合伙人使用macrophage-mediated炎性反应条件和急性肺损伤(ALI)。方法和结果:首先,我们发现鞣花酸减少肿瘤坏死factor-α(TNF-α)、白细胞介素- 6 (il - 6)和白介素- 1β(IL-1β)分泌物,提高白细胞介素- 6 (il - 10)生产脂多糖(LPS)刺激生264.7巨噬细胞体外。这些结果激励我们进一步研究体内鞣花酸的影响。在阿里小鼠模型中,老鼠鞣花酸处理之前,有限合伙人的挑战。数据显示,鞣花酸具有LPS-induced阿里小鼠的保护作用。此外,我们进一步研究了如何通过免疫印迹鞣花酸参与信号转导和采用免疫分析。数据显示,鞣花酸有效地削弱了核factor-kappa B (NF-κB)通过抑制IκBα的退化和磷酸化,激活以及p65从细胞质到细胞核的易位。结论:这些结果表明,鞣花酸可以在抑制阿里是非常有效的,和潜在的机制可能是通过震惊NF-κB途径减弱非特异性LPS引起的肺部炎症。

关键字

鞣花酸,抗议,有限合伙人,急性肺损伤,NF-A’›B, Cytokines.”

介绍

急性肺损伤(ALI)或更严重的形式,急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种急性致命形式的血氧过低的呼吸衰竭,表现为肺组织水肿和损伤,炎症反应,巨噬细胞激活后,血管通透性增加,薄壁组织的损伤和受损的气体交换。在过去的几十年,阿里和ARDS的发病率在美国被报道是79和59每年每100000人,分别为(1- - - - - -5]。基于人口指数增长,发病率可能在未来25年(双4]。阿里被认为在脓毒症的发病率最高,大约25%的ARDS病例因严重脓毒症和7%的重症监护患者最终发展ALI / ARDS [6,7]。阿里的机制逐渐变得清晰起来。有限合伙人内毒素是最重要的病原体导致ALI / ARDS的发展和多器官功能障碍综合征。在这个过程中,LPS-activated炎症细胞可以产生大量的介质在疾病的早期阶段,导致损伤血管内皮细胞和肺泡上皮细胞(8,9]。肺泡毛细血管屏障损伤肺泡壁的渗透性增加,增加炎症细胞和细胞因子的积累,积累和损害肺泡液体间隙,导致肺泡空间和富含蛋白质的水肿的肺组织损伤(9]。尽管最近以证据为基础的临床管理的进步和广泛调查治疗新策略,ALI / ARDS仍然是显著的死亡率有关。目前流行的方法处理LPS诱导炎症及其相关症状包括甾体或非甾体抗炎药物的使用,然而这些药物的使用与严重的副作用。因此,调查涉及自然炎症控制的方法是必要的。生产过剩促炎细胞因子是ALI / ARDS的重要原因之一。所以,这些炎性分子的抑制剂可能成为候选人的方式减少ALI / ARDS的死亡率。

鞣花酸,所示的结构图1,是一种天然多酚化合物发现在许多水果,坚果五倍子和植物提取物,如树莓,草莓,葡萄,石榴,黑醋栗,camu-camu、芒果、番石榴、核桃、杏仁、龙眼种子和绿茶10- - - - - -12]。鞣花酸已被报道有一个广泛的生物效应,主要包括ant致癌(13),抗菌14),和抗病毒15,抗炎16),抗焦虑(17和神经保护18]。然而,很少研究研究监管鞣花酸对有限合伙人的反应的影响。本研究的目的是调查鞣花酸对LPS诱导ALI的影响及相关机制。我们的结果将有利于鞣花酸阿里进一步作为潜在的治疗选择。

材料和方法

材料

鞣花酸(纯度> 98%)购买的国家控制药品和生物制品研究所(NICPBP,中国)。有限合伙人(大肠杆菌O55: B5), 3 - (4 5-dimethylthiazol-2-y1) 2, 5-dipheny-ltetrazolium溴化(MTT)和格里斯试剂购自西格玛化工有限公司(圣路易斯,密苏里州,美国)。地塞米松(DEX)从长乐购买药业有限公司(河南新乡,中国)。鼠标髓过氧化酶(MPO) ELISA试剂盒购自USCN生活有限公司(密苏里州的城市,TX)。TNF-αIL-1β,il - 6和il - 10 ELISA试剂盒购自Biolegend。杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)和胎牛血清(的边后卫)获得Invitrogen-Gibco(大岛,纽约)。为IκB Phospho-specific抗体以及抗体IκB和β-actin购自圣克鲁斯生物技术(圣克鲁斯、钙、美国)。Cy3-conjugated羊anti-rabbit免疫球蛋白,Peroxidase-conjugated AffiniPure山羊anti-mouse免疫球蛋白(H + L)和Peroxidase-conjugated AffiniPure山羊anti-rabbit免疫球蛋白(H + L)从PTG购买(美国芝加哥,IL)。

实验动物

雄性Balb / c小鼠体重在18到22岁的g从吉林大学实验动物中心购买,适应在使用前2星期。啮齿动物实验室周润发和自来水随意提供和维护受控条件下的温度24±1°C,湿度40 - 80%,12 h光/ 12 h暗周期。所有的程序都是严格按照指南的护理和使用实验动物由美国国立卫生研究院出版。

细胞培养

原始264.7小鼠巨噬细胞细胞系获得中国细胞系银行(中国,北京)。细胞在DMEM培养补充10% heat-inactivated的边后卫在37°C下5%的调湿大气CO₂。

细胞毒性试验

鞣花酸是由引起的细胞毒性研究MTT试验。264.7原始细胞机械刮,镀在4×10的密度⁵细胞/毫升到96 -孔板(美国演对手戏)包含100μL DMEM培养基。隔夜孵化后,细胞治疗与不同浓度的鞣花酸(清廉μg /毫升)根据实验设计。20 h后,肝癌和20μL添加到每一个细胞,进一步培养4 h在37°C公司为5%₂。MTT被细胞细胞溶解和150μL / DMSO溶液。光密度值(OD)测定在570 nm标(TECAN、奥地利)。

细胞因子检测在体外

确定鞣花酸对细胞因子的影响从LPS-induced细胞反应,264.7原始细胞被镀上24-well板块(4×10⁵细胞/毫升),孵化的1μg /毫升有限合伙人,或者有限合伙人+鞣花酸1、2、4μg /毫升为24小时37°C公司为5%₂。浮在表面的游离被收集并存储在-20°C到化验细胞因子。细胞因子的浓度TNF-αIL-1β,il - 6和il - 10在上层清液生264.7细胞文化是衡量使用商用ELISA试剂按照制造商的指示(BioLegend公司卡米诺圣达菲,套件E圣地亚哥,美国)。

rt - pcr分析TNF-α,il - 6、il - 10和IL-1βmRNA的表达

RAW264.7细胞(4×10⁵细胞/毫升)被孵化的单独1μg /毫升有限合伙人或有限合伙人+鞣花酸1,2,4μg /毫升为24小时37°C公司为5%₂。总RNA分离使用easy-BLUETM包根据制造商的指示和储存在-70°C到使用。短暂的、正直的RNA是经琼脂糖凝胶电泳,和RNA被光度分析量化。PCR混合物准备根据制造商的指示使用以下引物:鼠标TNF-α,5 ' - AATGAGGCTGGATAAGAT 3 '和反向5 ' -AGAGGTTCAGTGATGTAG 3 ', 387个基点;鼠标il - 6,向前5 ' - ACAAGAAAGACAAAGCCAGAGT 3 '和反向5 -TGCCGAGTAGATCTCAAAGTG-3, 229个基点;IL-1β,向前5 -CCTCGTGCTGTCGGACCCAT-3和反向5-CAGGCTTGTGCTCTGCTTGTGA 3 ', 344个基点;il - 10向前5 -AAGACCAAGGTGTCTACAAGGCCA-3和反向5 -TGAAAGGACACCATAGCAAAGGGC-3, 488个基点;β-actin向前5 -GACTACCTCATGAAGATCCT-3和反向5 -CCACATCTGCTGGAAGGTGG-3, 510个基点。每个反应是使用2μg总RNA,执行和thermocycler天生就是逆转录的60°C 45分钟,95°C 5分钟,5分钟和5°C。最初的变性cDNA在94°C 5分钟完成,其次是30放大周期,每一个都由变性在94°C 30年代,30年代的退火(51°C, 53.5°C, TNF-α54°C, il - 6、il - 10, IL-1β,分别),和扩展1分钟30年代的72°C。这些是紧随其后的是最后一个在72°C扩展10分钟。放大PCR产品1.5% TAE琼脂糖凝胶电泳。

LPS-induced ALI模型

基于体内实验中,我们选择5毫克/公斤体重与腹腔注射实验。BALB / c小鼠ether-anaesthetized二乙酯后,10μg有限合伙人的灌输鼻内(i.n)在50μL PBS诱导肺损伤。控制老鼠给50μL PBS i.n.没有有限合伙人。鞣花酸(5毫克/公斤体重)或车辆(PBS)前腹腔注射1 h有限合伙人管理。5毫克/公斤敏捷是由腹腔内注射是一个积极的控制。12 h (LPS)治疗后,收集的支气管肺泡灌洗液(BALF)进行三次通过气管插管与0.5毫升的热压处理过的PBS,灌输总量为1.5毫升。流体恢复从每个样本离心机(4°C, 3000 rpm, 10分钟)颗粒细胞。BALF的上层清液储存在-70°C,直到所需的细胞因子水平测定蛋白质含量和细胞的渗透。

细胞因子的分析

促炎细胞因子的水平TNF-α,il - 6, IL-1β和BALF中il - 10夹心酶联免疫试剂盒测定。

蛋白质分析

蛋白质浓度的上层清液BALF量化使用bicinchoninic酸(BCA)方法来评估血管渗透性的航空公司。

髓过氧物酶测定

嗜中性粒细胞和巨噬细胞实质浸润,反映在MPO活性,测定。老鼠在乙醚麻醉被杀后12 h有限合伙人管理。正确的肺切除和100毫克均质在50 mM羟乙基哌嗪ethanesulfonic酸(玫瑰)(pH值8.0)包含0.5% cetyltrimethyl溴化铵(CTAB)和三个冻融周期。匀浆离心机在13000 g×30分钟在4°C,和无细胞提取存储在-20°C,直到进一步的使用。MPO活性是化验使用鼠标MPO酶联免疫试剂盒。样品被稀释在磷酸柠檬酸缓冲(pH值5.0)。

组织病理评价

肺与中性10%福尔马林固定。光显微镜检查,肺组织与梯度酒精脱水,然后嵌入石蜡。石蜡切片是苏木精和伊红染色(他)。病变在肺组织光学显微镜下观察

免疫印迹分析

老鼠在乙醚麻醉被杀后12 h有限合伙人管理。立即组织被收获,在液态氮冷冻直到均匀化。组织样本均质里帕缓冲区和细胞溶解冰30分钟。这些蛋白质提取物用于免疫印迹分析,和蛋白质浓度测定用BCA蛋白质化验设备。等量的蛋白质被加载到油井10%的十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶。随后,蛋白质被转移到聚乙二烯二氟化物(PVDF)膜(BIO-RAD)甘氨酸转移缓冲区。后阻断特异性的网站屏蔽解决方案(5% (wt /卷)脱脂奶粉),孕育了PVDF与特定的抗体IκBα,p-IκBα抗体在5% (wt. /卷)BSA溶解在渐变20 / Tris-buffered盐水(TBST)。使用peroxidase-conjugated二级抗体,结合抗体检测(ECL +(通用电气医疗集团白金汉郡、英国)。

采用免疫分析

264.7原始细胞(4×10⁵玻璃盖玻片上培养的细胞/毫升)、镀到24-well板24 h,使用1、2、4毫克/公斤的鞣花酸1 h治疗前1μg /毫升有限合伙人1 h 37°C, 5%的公司₂孵化器。玻璃盖玻片洗0.01 PBS和固定在4%甲醛在室温下30分钟;洗涤剂进行提取3% tritonx - 100在室温下10分钟。盖玻片和PBS饱和含5%牛血清白蛋白为30分钟在室温和处理多克隆抗体免疫荧光与兔子anti-NF-κB / p65紧随其后Cy3-conjugated羊anti-rabbit免疫球蛋白。最后,盖玻片是安装在幻灯片。荧光信号分析Fluoview显微镜(日本奥林巴斯)。

统计分析

所有数据都表示为平均数±标准差。数据分析使用SPSS 18.0版(SPSS Inc .)、芝加哥,美国)。生存率估计使用kaplan meier方法和生存率较。统计signiA¯A¬通过接受时P < 0.05或< 0.01。

结果

鞣花酸对LPS-Induced细胞因子的影响生产在体外

TNF-α、IL-1β文化上层清液中il - 6和il - 10浓度RAW264.7细胞被夹心ELISA测定。264.7原始细胞的治疗与有限合伙人仅导致显著增加细胞因子的生产与控制。然而,TNF-αIL-1β和细胞上清液中il - 6水平处理1、2和4 ug /毫升的鞣花酸相比显著降低LPS组以剂量依赖性的方式(P < 0.05)。相反,il - 10水平增加剂量依赖性的方式(图2)。评估是否鞣花酸还可以调节细胞因子的生产LPS-induced mRNA表达,我们进行rt - pcr。所示图3ELISA试验,结果是一致的。

鞣花酸的细胞毒性效应评估使用MTT试验,和红景天甙并不影响细胞的生存能力264.7原始细胞治疗浓度范围从0到8 ug /毫升24 h(数据未显示)。这些结果向我们保证鞣花酸的影响264.7原始细胞由于其抑制TNF-α,IL-1β、il - 6和il - 10产品直接或间接但不是由于细胞死亡。

TNF-α鞣花酸对生产的影响,IL-1β、il - 10、il - 6的BALF LPS-Induced阿里老鼠

小鼠腹腔内政府的鞣花酸(5毫克/公斤)1 h i.n.政府之前的有限合伙人。BALF收集在12 h后分析生产TNF-α有限合伙人挑战,IL-1β,il - 6、il - 10。所示图4,结果是相似的在体外。

鞣花酸对BALF中总蛋白浓度

总蛋白浓度显著增加阿里BALF的老鼠在12 h后有限合伙人的挑战相比对照组(P < 0.05或P < 0.01)。鞣花酸和DXM显著降低血清总蛋白浓度(P < 0.01)相比BALF中LPS组(图5)。

鞣花酸对MPO活性的影响

MPO活性是另一个衡量肺实质白细胞浸润。如图所示图6,有限合伙人的挑战导致肺MPO活性显著增加。与对照组相比。腹腔内,注入一剂鞣花酸前1 h有限合伙人暴露显著降低MPO活性与LPS组(P < 0.01)。同时,DXM治疗显著降低LPS-induced MPO活动增加肺与LPS组(P < 0.01)。

鞣花酸对组织病理学变化的影响的肺部组织

评估后的组织学变化ceftiofur治疗LPS-treated老鼠,肺部分与苏木精和伊红染色。正常肺组织学发现对照组(图7)。LPS组(图7 b),小鼠表现出明显的增加炎症细胞浸润,主要包括中性粒细胞、巨噬细胞,等等。此外,从实验组肺组织管理有限合伙人仅明显受损,间质水肿,出血,肺泡壁增厚。然而,这些组织病理学变化改善鞣花酸和敏捷集团(图7 c和7 d)。

鞣花酸对LPS-Induced P-I-κB, I-κB NF-κB信号通路激活

首先,我们检查了鞣花酸的影响在LPS诱导P-I-κB I-κB细胞质中使用不同的phospho-specific抗体(免疫印迹分析图8)。所示图8,有限合伙人治疗导致IκB老年病。然而,当我们添加不同浓度鞣花酸,NF-κB IκB明显的退化被鞣花酸。确定这是否IκB退化与IκB磷酸化,我们检查了鞣花酸的影响LPS-induced P-IκB免疫印迹。结果表明,磷酸化的IκBαRAW264.7细胞增加有限合伙人管理后,但明显被鞣花酸治疗。

此外,我们评估了鞣花酸对LPS诱导的影响与Fluoview显微镜NF-κB通路。所示图9,有限合伙人治疗导致的累积p65细胞核。大多数的细胞内p65转移从细胞质到细胞核,证明了强p65细胞核染色。然而,核易位p65 LPS诱导剂量依赖性抑制鞣花酸治疗采用免疫染色。

讨论

在这项研究中,我们探索了一种天然多酚化合物的能力从水果和螺母调节有限合伙人使用macrophage-mediated炎性反应条件和LPS-induced阿里。地塞米松(DEX)是最常用的抗炎药物在阿里的临床治疗。所以在活的有机体内模型中,我们使用它作为一个积极的控制效果评估LPS-induced阿里的鞣花酸。

越来越多的证据表明,巨噬细胞在炎症反应的调节起着关键作用[19,20.]。巨噬细胞是重要的免疫细胞的先天免疫和代表宿主对感染的前线,入侵,和伤害。LPS-mediated激活巨噬细胞导致生产各种炎症细胞因子和介质。适当的帮助清除入侵的病原体和炎症反应消退,恢复免疫内稳态(21,22]。但是这些细胞因子过度产生持续性或丰富的感染可能会导致全身炎症反应综合征(SIRS),败血症,严重的组织损伤,包括阿里(23]。因此,任何方法,抑制炎症在体外和在活的有机体内可能影响阿里的预防或治疗。

在实验中,我们首先测试了鞣花酸对LPS诱导的影响炎性因子TNF-αIL-1β,il - 6和il - 10在体外特征,这是阿里的细胞因子在炎症过程。抑制炎症细胞因子是一种重要的抗炎治疗的目标。但在细胞因子,il - 10是一种重要的抗炎细胞因子在控制炎症反应(24,25]。结果表明,鞣花酸显著调节生产大量TNF-αIL-1β,和il - 6、il - 10增加在体外。这些结果鼓舞了我们进一步研究鞣花酸的影响在活的有机体内。正如我们所知,在阿里和ARDS患者,浓度升高IL-1and TNF-a BALF中测量,和有关贫穷的结果26]。抑制促炎细胞因子的生产过剩显示肺损伤的减少在LPS诱导ALI模型(27,28]。正如预期的那样,这里给出的数据表明,鞣花酸可以显著抑制生产LPS-induced TNF-a, il - 6、il - 1和il - 10在活的有机体内。

在ALI模型,我们还测试了总蛋白浓度和髓过氧化酶(MPO) BALF的活动。总蛋白质表明上皮通透性和肺水肿。MPO活性是肺实质的测量白细胞渗透和被认为是中性粒细胞的激活和积累的标记炎症。治疗前鞣花酸和敏捷有限合伙人暴露显著降低血清总蛋白和MPO活性较LPS组。这些发现表明,鞣花酸在阿里的防护效果有限合伙人取决于衰减引起的炎症细胞封存并迁移到肺部组织。

此外,鞣花酸治疗后,我们使用圆)染色评估肺组织的组织学变化与急性肺损伤小鼠。LPS组,肺显示重要的病理变化,如肺泡壁增厚,间质水肿、炎症细胞浸润,肺泡出血。然而,治疗与鞣花酸和敏捷显著减弱这些变化。但鞣花酸的作用弱于敏捷。

进一步描述鞣花酸的抑制作用的本质阿里,我们检查了鞣花酸的影响NF-κB信号通路的激活,而调节许多免疫和炎症基因的表达。NF -κB是其中最重要的转录因子和细胞类型中找到表达细胞因子,趋化因子,生长因子,细胞粘附分子,和一些急性期蛋白质在健康和疾病状态29日,30.]。激活NF-κB IκBs磷酸化的涉及两个关键的丝氨酸残基(Ser32和Ser36)通过一些复杂IκB激酶信号。如果细胞,NF-κB本地化与IκB胞质由于其绑定。然而,当细胞被激活有限合伙人,IκB由IκB激酶磷酸化和退化,然后NF-κB迁移释放到核诱发炎性介质的转录,如进气阀打开,cox - 2, TNF-αand IL-1β,il - 6,引发30.]。因此,NF -κB的激活是通过测量评估IκB蛋白质的磷酸化程度。在实验中,我们评估了鞣花酸对LPS诱导的影响NF-κB途径免疫印迹和采用免疫分析。所示图8,我们首先确定这个IκB退化与IκB磷酸化,磷酸化的结果表明,在肺组织增加IκBα有限合伙人管理,但明显被鞣花酸治疗。IκBα蛋白质表现出相反的趋势。采用免疫分析、治疗与LPS导致在细胞核中p65的积累。大多数的细胞内p65转移从细胞质到细胞核,证明了强p65细胞核染色。然而,核易位p65 LPS诱导剂量依赖性抑制鞣花酸治疗采用免疫染色。数据显示,鞣花酸有效地削弱了核factor-kappa B (NF-κB)通过抑制IκBα的退化和磷酸化,激活以及p65从细胞质到细胞核的易位。

结论

总之,与鞣花酸预处理结果显著减少炎症细胞的数量,蛋白质泄漏BALF中,进入到肺组织炎性细胞浸润。ELISA结果表明,鞣花酸可以显著抑制TNF-α,il - 6,引发的水平,增加il - 10的生产在体外和在活的有机体内。鞣花酸的保护作用引起的阿里有限合伙人可能通过抑制NF-κB途径激活。

承认

这项研究是由国家科技支撑计划(2013号bad16b09)。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关这篇文章的内容。

引用

1. 伯纳德•GR et al . ARDS欧美共识会议。定义、机制相关的结果,和临床试验的协调。我和CritCare医学。1994;149年:818 - 824。
2. 惠勒AP和伯纳德GR。急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征:临床评估。《柳叶刀》2007;369:1553 - 1564。
3. Peek GJ, et al。塞萨尔:常规通气支持对体外膜肺氧合严重成人呼吸衰竭。BMC健康服务公司。2006;6:163年。
4. Rubenfeld GD, et al。急性肺损伤的发病率和结果。郑传经Med.2005; 353年:1685 - 1693。
5. Herridge女士和安格斯。急性肺injury-affecting许多生命。郑传经Med.2005;353:1736 - 1738。
6. Brun-Buisson C, et al。活着学习小组,流行病学和急性肺损伤的结果在欧洲重症监护病房。活着的结果研究。重症监护医学。2004;30:51 - 61。
7. 戈斯CH, et al。急性肺损伤的发病率在美国。暴击保健医学。2003;31:1607 - 1611。
8. 器皿磅和Matthay MA。医学进步——急性呼吸窘迫综合征。地中海NEngl J。2000; 342年:1334 - 1349。
9. Tomashefski摩根富林明。肺急性呼吸窘迫综合征的病理。胸部医学。2000;21:435 - 466。
10. 宋子文Y andBarlow PJ。量化的没食子酸和鞣花酸龙眼(DimocarpuslonganLour)种子和芒果(Mangifera籼稻l .)内核及抗氧化活性的影响。食品化学。2006;97年:524 - 530。
11. Turk G, et al。衰减的环孢霉素A-induced睾丸和精子损害与氧化应激相关的鞣花酸。Int免疫药理学。2010;10:177 - 182。
12. Plundrich N et al。生物活性多酚从Muscatine葡萄和黑醋栗稳定为局部应用集中到富含蛋白质的矩阵。Int J Cosmet。Sci.35:394 - 401。
13. 李T, et al。鞣花酸诱导p53、p21表达,G1被捕,在人膀胱癌T24细胞凋亡。抗癌Res.2005; 25:971 - 980。
14. Abuelsaad, et al .抗菌andimmunomodulation活动橘皮苷和鞣花酸腹泻的Aeromonashydrophila小鼠模型。93年生活Sci.2013;:714 - 722。
15. 公园西南等al.Antiviral活动和可能的模式决定的鞣花酸确定各自Lagerstroemia叶的叶子向人类犀牛病毒。BMC交错的补充。医学。2014;14:171年。
16. El-Shitany n鞣花酸防止carrageenan-induced核fac-torκB,通过抑制急性炎症诱导环氧酶促炎细胞因子和增强白细胞介素- 10”通过一种抗氧化剂。Int Immunopharmaco,2014;19:290 - 299。
17. Girish C, et al。参与的gaba ergic制度anxiolytic-like mice.Eur.J黄酮类鞣花酸的影响。杂志。2013;710年:49-58。
18. 夸克H等al.beta-Secretase (BACE1)inhibitorsfrom石榴皮(Punicagranatum)。拱门。制药。杂志2005;28:1328 - 1332。
19. 皮尔斯的女朋友。巨噬细胞:重要的生理和病理ofpolypeptide生长因子来源。我和细胞杂志。1990;2:233 - 234。
20. 你们M, et al。木蝴蝶素发挥抗炎activityon lipopolysaccharide-induced老鼠巨噬细胞通过Nrf2 /激活。生物化学细胞杂志。2014;92:337-48。
21. 王h . HMGB1-targeting代理在脓毒症的治疗潜力。专家摩尔地中海牧师。2008;10:e32。
22. Serhan j . CN和Savill解决炎症:endNat开始项目。Immunol。2005; 6:1191 - 1197。
23. 粗捷RP, et al .拯救败血症患者运动:国际管理严重脓毒症和脓毒性shock.Intens指南。保健医学。2008;34:17-60。
24. 佛罗伦萨DF,等。通过激活巨噬细胞细胞因子il - 10抑制生产。J Immunol。1991; 146年:3444 - 3451。
25. Berg DJ, et al .白细胞介素- 10”的中央监管机构应对有限合伙人inmurine内毒素休克模型和施瓦茨曼反应但不是内毒素耐受。中国投资。1995;96年:2339 - 2347。
26. Meduri顾,et al . Inflammatorycytokines ARDS患者的落下帷幕。随着时间的推移持续海拔pooroutcome预言。胸部。1995;108:1303 - 1314。
27. 贝克BD,等。一个体内仓鼠生物测定评估肺颗粒物的毒性。Toxicol:制药。1982;66年:9-29。
28. 陈F, et al。核factor-kappaB洞察的作用,一个无处不在的转录因子在疾病的起始。中国化学1999;45:7-17。
29. 鲍德温。nf -κB和κB蛋白:新发现和见解。为Immunol。1996; 14:649 - 683。
30. Baeuerle PA和巴尔的摩d nf -κB:十年after.Cell。1996;87:13-20。