乌拉尼草本植物黄菖蒲的适应活性评价

摘要

本研究旨在评价野菖蒲叶乙醇提取物对大鼠和小鼠的适应活性。本研究探讨了强迫游泳耐力应激对大鼠游泳耐力时间、器官重量和生化指标的影响，以及小鼠缺氧耐受试验。这些活性在口服提取物剂量为50和100 mg/kg时进行测试。在这些应激模型中，提取物预处理显著改善了应激引起的这些生化参数的变化——血清葡萄糖、甘油三酯、胆固醇、尿素氮和皮质醇水平以及器官重量。经提取物处理的动物也表现出大鼠游泳耐力时间和小鼠缺氧耐受时间的增加。在两种应激模型中，BO的这种延长游泳时间和改善应激诱导变化的能力表明其具有适应性。

关键字

适应原性，耐缺氧胁迫，黄菖蒲，强迫游泳胁迫

简介

“适应原”一词是由俄罗斯人创造的，用来描述一组具有某些特殊性质的自然物质。它们是帮助人体适应内部和外部压力的物质，并抵抗通常会对其功能产生负面影响的压力情况。它们也帮助身体达到理想的内部能量平衡[1］．适应原的作用必须是非特异性的，也就是说，它能抵抗各种各样的有害因素的作用，无论是物理的、化学的还是生物的。2］．压力基本上是身心对内稳态变化的一种反应。有益的压力被称为良性压力，而有害的压力被称为窘迫。如果压力过大，机体的稳态机制就会出现缺陷，危及机体的生存。在这种情况下，压力会引发广泛的身体变化，称为一般适应综合症(GAS) [3.］．这种植物Borago officinalis（B.officinalisL.)科Boraginaceae，又称“星花”，是原产于叙利亚的一年生草本植物，但在整个地中海地区以及亚洲、欧洲、北非和南美洲都有种植。在乌纳尼医学体系中，该植物作为高扎班很受欢迎。自然疗法从业者使用琉璃苣调节新陈代谢和荷尔蒙系统[4］．在过去，它被用作神经补剂，用于治疗抑郁、焦虑和悲伤。叶子被用作肾上腺补剂来对抗类固醇治疗的影响。在病愈期间亦能恢复元气[5，6］．报道了脱脂乙醇提取物B.officinalis种子具有酚酸、抗氧化和清除自由基的活性[7，8］．

材料与方法

化学物质

所有使用的化学品都是分析级的。用于检测血清胆固醇、甘油三酯、尿素氮、皮质酮和葡萄糖的试剂盒购自SPAN Diagnostics Kits Ltd.。

提取物的制备

叶子B.officinalis从海得拉巴的Unani医药商店收集，并经海得拉巴S.U.C.P学院生药学专家鉴定。将叶片遮荫干燥，制成粉末，用95%乙醇在索氏仪中提取48小时。的extracts were filtered and concentrated in vacuum under reduced pressure using rotary flash evaporator. A suspension was prepared using distilled water containing 1% (w/v) carboxymethyl cellulose (CMC).

急性毒性研究

B.officinalis不同剂量的乙醇提取物(50-2000 mg/kg)通过连接聚乙烯管的特殊设计的口服针口服给小鼠和大鼠。根据CPCSEA指南，对动物进行了48小时的研究期(短期毒性)，观察任何死亡率，发现提取物在2000 mg/kg时是安全的。所选剂量为50和100 mg/kg。实验方案得到了机构动物伦理委员会的批准(IAEC/SUCP/05/2007)。

强迫游泳耐力测验(身体压力)

雌雄大鼠(200-250克)被用于强迫游泳耐力应激。I组大鼠给予0.1% CMC生理盐水;(车辆控制)。ⅱ组小鼠用0.1% CMC盐水和应激处理;(负控制)。III组大鼠给予Withania Somnifera(100 mg/kg)和应力;(积极的控制)。IV组和V组大鼠分别给予乙醇提取物50和100 mg/kg, p.o.和应激。将大鼠置于尺寸为37Χ37Χ30 cm的丙烯罐中，并注满高度为25 cm的水，对其进行游泳应激。提取物给予大鼠，每日1次，连续7天。第8天，允许大鼠游泳至完全精疲力竭，并在动物开始溺水时结束。计算各组平均游泳时间。然后处死动物，心脏穿刺采血，测定血清葡萄糖、甘油三酯、胆固醇、尿素氮、皮质醇等生化参数。用酒精清洗后记录肝脏、肾上腺、脾脏等器官重量[9-12］．

小鼠耐缺氧应激试验

将雌雄小鼠随机分为5组，每组6只。I组小鼠给予0.1% CMC生理盐水;(车辆控制)。ⅱ组小鼠给予Withania somnifera(100 mg/kg, p.o.);III组和IV组大鼠分别给予乙醇提取物50和100 mg/kg, p.o.和应激。每天进行药物治疗，连续7天。在药物治疗结束时，对动物进行缺氧应激，记录耐缺氧时间。采用容量为1升的密闭容器诱导缺氧应激。每只动物都被保存在密封的容器中，并记录下出现第一次抽搐迹象的时间，并在需要时立即从容器中取出并复苏[9，13］．

统计分析

所有数值均以均数±SEM表示，数据采用Graphpad INSTAT进行单因素方差分析。用Dunnet多重比较检验进行后抵押分析，以估计各组间差异的显著性。

结果与讨论

研究结果显示，提取物具有适应活性，显著(p<0.05)增加游泳时间(图1)．游泳耐力应激组肾上腺重量显著增加，脾脏重量显著增加，应激对照组恢复显著(p<0.05)B.officinalis预处理50和100 mg/kg (表1)．上述两种剂量的预处理(p<0.05)也显著恢复了动物血浆皮质醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮、胆固醇(表2)．不同剂量的提取物对大鼠缺氧应激变化有显著的保护作用。缺氧耐受试验以惊厥的出现为终点。的B.officinalis在剂量I (50 mg/kg/ b.w)和剂量II (100 mg/kg/ b.w)中均有显著性差异(p< 0.05)。001)与对照组相比，在第7天增加耐受应力时间(图2，表3)．

适应原是指使器官进入非特异性高度抵抗状态的物质，以更好地抵抗压力源，适应异常的挑战。它们使身体功能正常化，加强因压力而受损的系统和功能，并对各种环境和情绪压力具有保护作用。强制游动法是目前评价新型复合材料抗应力性能最广泛的方法。这种模式是基于这样一种观察:当动物被迫在水中游泳时，最终会呈现出一种典型的静止姿势，没有任何活动。因此，不动的外观反映了一种疲劳、疲劳、耐力下降的状态，终点是小鼠无法再游得更远，开始溺水。在小鼠身上观察到游泳时间的增加B.officinalis与未处理(对照组)组相比，增强的物理性能明显更长，从而证实了其适应原性。在应激反应中，ACTH被释放，它作用于肾上腺皮质，刺激皮质醇的合成和释放[14］．

游泳持续时间平均增加。^一个P <0.001，与对照组相比有显著性差异。Ns表示与对照组相比不显著。^b与压力控制相比P <0.001显著。统计学检验采用方差分析，dunnet 's t检验。

血浆皮质醇升高影响储存脂肪和碳水化合物储备的调动[15从而提高血糖水平。升高的皮质醇水平可被抗应激药物逆转[15］．B.officinalis显著降低压力引起的皮质醇和血糖水平升高。本研究中的参考药物，Withania somnifera的研究也得出了类似的结果。应激动物血清胆固醇、甘油三酯和尿素氮水平的显著升高是由于刺激下丘脑-垂体轴(HPA)和交感神经系统，释放儿茶酚胺和糖皮质激素，抑制肝脏、肾脏等多个部位的免疫系统[16］．B.officinalis也是标准药物Withania somnifera显著(p<0.05)降低血清胆固醇、尿素氮和甘油三酯，这可能是由于抑制了交感神经系统的刺激。应激动物肾上腺重量的增加是由于应激诱导的肾上腺髓质反应导致皮质营养激素的产生增加导致肾上腺重量的增加[17］．B.officinalis而且Withania somnifera肝脏、肾上腺重量显著降低(p<0.05)，这可能是由于应激诱导的肾上腺髓质反应逆转，从而减少促皮质激素的产生。脾脏重量的下降可能是由于脾脏的淋巴细胞向血液中募集，这是由于脾脏的挤压造成的[18］．预处理与B.officinalis参考标准Withania somnifera脾脏重量显著增加(p<0.05)。这可能是由于抑制了脾脏淋巴细胞向血液的募集。缺氧是一种非常严重的应激源。包括细胞呼吸在内的所有身体功能都依赖于氧气的供应。缺乏这种至关重要的元素会对所有身体机制造成严重破坏。任何药物在这种压力下增加适应能力都可以被认为是其主要的抗压力作用。研究结果表明B.officinalis显著延长了痉挛的时间，因此证实了其抗应激性。其抗氧化作用和清除自由基的活性可能导致惊厥时间延长。黄酮、单宁和酚苷类化合物具有多种生物活性，包括适应活性[18］．适应活性可能是由于这些成分，而标准药物Withania somnifera一种已建立的适应原药物也含有糖苷、类固醇和类黄酮[18］．植物化学成分，如植物甾醇，皂苷，酚，单宁和类黄酮已报道存在于乙醇叶提取物B.officinalis．的适应活性B.officinalis主要是由于这些成分具有公认的抗氧化活性。

注意到耐缺氧应激持续时间的平均增加。^一个P <0.05，与对照组比较差异有统计学意义。统计学检验采用方差分析，其次是Tukeys检验。

结论

综上所述，目前的研究结果表明B.officinalis能够增加实验动物对非特异性应激的耐受能力，这从不同类型应激期间研究的大量参数的恢复中可以看出，并作为一种适应因子。

参考文献

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