评价Cerebroprotective类黄酮效果Dalbergia Latifolia对抗脑缺血Re-Perfusion BCCAO诱发脑梗塞大鼠的方法。

文摘

Dalbergialatifolia通常被称为“Beete sitsal”。在当下研究cerebroprotective methanolic提取效果的树皮Dalbergialatifolia (DL)是针对全球的缺血大鼠模型。动物与DL预处理的一段1周(500毫克/公斤)订单。这些动物麻醉thiopentone钠(45毫克/公斤)和梗死诱发了双边颈总动脉闭塞(BCCAO) 30分钟的帮助下缝合线程,结的帮助下被释放滑结。动物们被允许re-perfuse一段48小时。那么动物牺牲大脑被斩首。生化估计SOD,猫,MPO和MDA和组织学检查。

关键字

Dalbergialatifolia脑缺血,脑梗

介绍

中风是死亡和残疾的主要原因之一。世卫组织估计,1990年到2020年之间,世界将见证中风死亡率增加78%的女人和106%的男人(1]。中风是世界上的第二大死亡原因,每年造成大约6000000人死亡(2]。据估计,中风的终生风险在8%和10%之间(3]。那样,中风包括异质群体的过程。船遮挡(缺血性中风)占85%的中风,而颅内出血(出血性中风)占主要remainde [4]。缺血性中风占87%的中风。45到64岁的人当中,8%到12%的缺血性中风(30天内导致死亡5]。

黄酮类化合物具有高度活性羟基被氧化electron-donation,从而稳定自由基活性分子。反应的一种方法是直接清除自由基,例如超氧化物阴离子,singulet氧气和脂质过氧化氢自由基。结构重要特性定义类黄酮的减少可能是羟基化模式,α3’,4’二羟苯邻二酚b环的结构,分子的平面性和2,3-unsaturation在接合4-oxo c - r的函数。有相当多的证据表明,类黄酮有效减弱的有害影响自由基和活性氧和活性氮物种(ROS / RNS)。槲皮素和黄酮类化合物相关的一些结构,例如,显示明显cytoprotective效应在PC12细胞暴露于过氧化氢(6]。还在PC12细胞中,黄酮类化合物的加入或富含黄酮类提取物抑制ROS的hydroperoxideinduced增加,从而提高细胞存活率(7,8]。

铃木等(9]。administeredcatechin饮用水中提取为五天之前和期间大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)和再灌注检查他们的保护作用在中风后各种退化的过程。儿茶素显著改善神经赤字观察后再灌注诱导的抑制一氧化氮合酶(间接宾语)表达和嗜中性粒细胞的浸润。此外,过氧硝酸盐的形成是减少由于强大的自由基清除儿茶素的性质。

香港et al。10绿茶提取物用于饮用水的随意在沙鼠缺血前3周。这种治疗减少梗塞体积,凋亡细胞的数量,和脂质过氧化,抑制ischemia-induced多动症。

Dalbergia latifoliais大量无毛树与单个干和有一个特有的气味11]。分布在比哈尔邦,Bundelkhand和印度中部12]。它包含dalbinol新12α-hydroxyrotenoid [13),sisafolincoumarin从种子、β-谷甾醇,还含有dalbergichromene、羽扇豆醇,latifolin dalbergin从树的树皮,心材包含latinone, neoflavonoiddalcriodon [14,代替phenanthrene-1]和latinone 4-quinone Dalbergialatifolia[隔绝15]。Ethanomedicinally,阀杆叫含有单宁用于治疗麻风病,肥胖和蠕虫(12]。EtOH(50%)提取的树皮展品spasmogenic,和驱虫剂活动Ascaridiagalli [16]。Ethanomedicinally,阀杆树皮含有单宁用于治疗麻风病和蠕虫(17]。许多物种Dalbergiaare重要的木材树,价值通常的装饰和香木,富含芳烃油(18,19]。据报道,传统的各种物种作为春药,堕胎药,祛痰剂,anthelmentic,退热剂,开胃菜,平息了口渴,呕吐,烧灼感,治疗皮肤疾病,溃疡、血液疾病,减少肥胖,用于leucoderma、消化不良、痢疾、疾病的眼睛和鼻子,梅毒、胃病、麻风病、leucoderma、疥疮和癣(20.]。

材料和方法

收集的植物材料

树皮的一部分Dalbergialatifolia收集6月- 2012年从Tirupati森林,它是由K。识别和身份验证Madhavachetty,凭证标本被沉积在药理学、卡纳塔克邦药学院,班加罗尔。

准备的提取

获得的植物受到磨使用机械搅拌器大小一致的细粉。大约250的通用粉处理甲醇在索氏仪器2 h。液体提取从而获得受到溶剂的蒸发去除多余的树荫下,将固体药物的提取。extractwas收益率的计算和存储为进一步使用。固体methanolic药物进一步受到孤立的柱层析法提取类黄酮、类黄酮在药物的帮助下被确认为类黄酮化学测试。

实验动物

白化雄性wistar鼠(8 - 10周大)重250 - 280 g,用于实验。他们适应的前一个星期的实验。动物被关在笼子里的充分通风的房间里,十二12 h光明与黑暗中维护周期和被安置在温度25±2°C。他们可以免费获得一个标准的食物adlibitum饮食和水。上的所有实验动物是按照标准使用的实验动物使用和实验协议已批准IAEC(动物伦理委员会的机构)。

实验设计

大鼠随机分为5组,每组6动物。

•组1:缺血再灌注(I / R)

•组2:假(手术切口)

•小组3:车辆

•团队4:Dalbergia latifolia (DL)

•组织5:别嘌呤醇

诱导脑缺血

动物麻醉给thiopentone钠(45毫克/公斤)i.p。

阻塞:手术技术采用脑缺血诱导的早些时候AnshumanTrigunayat法2009年出版。在麻醉下中线切口。颈总动脉是从Vago-sympathetic仔细鉴定并分离出神经。缺血是引起颈总动脉阻塞bi为30分钟,再灌注(BCCAO)线程被删除线程允许48小时。颈部切口区域与线程使用缝合关闭。DL组动物给预处理7天p。o(500毫克/公斤),标准药物(别嘌呤醇,10毫克/公斤)给出了阻塞前10分钟。

后段re-perfusion动物牺牲,大脑被斩首,生物化学进行了估计。SOD活性测定的方法由Kakkaret半岛,1984年。(21),猫活动以Aebiet al的方法来衡量,197422),MDAactivity Okhawaet艾尔法测量,1979。23)和MPO活性测定的方法Mullaneet, 198524]。

组织病理学研究也和获得的结果进行比较。

结果与讨论

组织病理学

在虚假的组:大脑的SOD水平,猫,MPO和MDA没有神经赤字(图1 - 4)。组织病理学研究还显示没有神经变性的组织(公布)。

在I / R组:大脑的MDA和MPO水平显著增加,SOD水平下降和过氧化氢酶(图1 - 4)。组织病理学研究还显示有神经元变性,神经胶质细胞增生、充血、出血,淋巴细胞浸润和空泡状态显示大脑受损,(图6)。

汽车组:大脑的SOD水平,猫,MDA和MPO接近的值I / R组(图1 - 4)。组织病理学研究还显示神经元变性,拥堵胶质细胞增殖和vacuolationdepecting没有参与cerebroprotectivity的车辆。(图7)

DL集团:SOD和CAT的脑水平明显增加,MDA的水平,MPO显著降低相比,I / R组(图1 - 4)。神经变性的组织病理学研究显示最低,轻度vacuolationrelatively降低拥堵(以数字)。

别嘌呤醇组:SOD和CAT的脑水平显著增加,MDA和MPO水平降低与I / R组(相比图1 - 4)。组织病理学结果显示没有严重损害神经细胞只有轻微空泡形成,出血被认为(图9)。

氧化应激被认为是一个主要来源生成后的脑缺血性损伤。各种实验模型的脑缺血再灌注损伤时显示显著的神经保护治疗抗氧化剂(25]。

建立了脂质过氧化反应脑损伤的主要机制。的机制涉及到一个过程不饱和脂质氧化形成额外的激进的物种以及有毒副产品可以对主机系统(26]。Polysaturated脂质尤其容易受到这种类型的损伤在氧化环境中,他们可以反应形成脂质过氧化物(27]。脂质过氧化物本身不稳定,进行额外的分解成为一系列复杂的化合物包括活性羰基化合物(28]。

在目前的研究中我们观察到缺血组织MDA活动增加reperfused大脑相比,虚假的组织和结果与之前的研究结果相一致。治疗Dalbergialatifolia(500毫克/公斤订单)提供cerebroprotection与MDA活性观察到由于相比别嘌呤醇(10毫克/公斤)。

活性物种可以减少或消除由许多酶和非酶的抗氧化机制。草皮,催化歧化作用的超氧化物阴离子(0 2)过氧化氢和分子氧,是最重要的一个抗氧化的酶(29日]。

在目前的研究中,SOD和CAT活性降低缺血性reperfused组比较虚假的组和结果与之前的研究结果相一致29日]。这可能是由于过度超氧化物阴离子的形成。SOD活性下降可能导致减少清除超氧化物阴离子,可对大脑有害。酶水平的下降也可能被解释成事实,过度超氧化物阴离子可能灭活SOD,因此,导致过氧化氢清除酶的失活。降低SOD和CAT活性显著增加了DL管理相比,I / R组。

炎症是脑缺血的发病机制的一个重要组成部分。促炎的分子如没有synthase-2(2号),cyclooxygenase-2 (COX 2),趋化因子和粘附分子与脑缺血性损伤的发展。髓过氧化酶(MPO)是一种高阳离子glycosolatedheme酶激活吞噬细胞分泌的炎症。MPO是一种酶,这种酶是参与自由基的生产。事实上,MPO使用过氧化氢和NO2¯产生活性氮物种(30.]。

酶的活动MPO也增加缺血性reperfused组比较虚假的组。政府所示的DL抑制炎症介质相比,I / R组以及标准组。

结论

目前的研究是基于类黄酮和类黄酮进行包含部分的植物有良好的抗氧化性能的evedences先前的研究和methanolic提取ofDalbergialatifoliaconstitutes不同的类的类黄酮,它表现出显著的抗氧化活动导致Cerebroprotectivity相比,I / R组和标准药物别嘌呤醇组。证实了该活动的测量各种生化指标如猫,SOD, MDA和MPO的比较神经组织损伤的程度的帮助下组织病理学幻灯片。

引用

1. Popkin BM。营养过渡,全球营养变化的挑战。亚洲太平洋中国营养。2001;10 (S): S13-S18。
2. 全球Infobase谁。[https://apps.who.int/infobase/Mortality.aspx]。
3. 凯思瑟哈德里年代,Beiser, Kelly-Hayes M, CS,非盟R,有,et al。弗雷明汉的一生中患中风的风险——估计研究。中风。2006;37:345-50。
4. 比尔答:性别和中风症状:回顾当前的文学。J >护理。2010;42:80-7。
5. 罗莎蒙德W,弗莱戈K, K富里,心脏病和中风等。统计数据——2008更新:美国心脏协会的一份报告统计委员会和中风统计小组委员会。循环。2008;117:e25 - 146。
6. Dajas F, Rivera-Megret F, F Blasina et al .神经保护的类黄酮。布拉兹J地中海Res.2003;36:1613 - 1620。
7. 佐佐木N,户田拓夫T, T,金子巴巴N,松尾m细胞毒性保护作用的黄酮类化合物的氢过氧化亚油酸对大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。ChemBiol Interact.2003;145:101 - 116。
8. Horakova L,发亮,Sandig G et al。标准化提取黄酮类化合物的增加的可行性PC12细胞过氧化氢处理:对氧化损伤的影响。拱Toxicol.2003;77:22日。
9. 铃木M, Tabuchi M, Ikeda M, Umegaki K,获利,t .绿茶儿茶素的保护作用在脑缺血性损伤。地中海SciMonit.2004;10:BR166-BR174
10. 香港JT, Ryu SR, Kim HJ李JK,李SH, Yun YP, et al .保护作用的绿茶提取物在蒙古沙鼠缺血/ reperfusion-induced脑损伤。大脑Res.2001; 888:11-18。
11. 普拉萨德AGD,科Cahndra,任何Reddy。1993。起始的遗传改良计划Dalbergialatifoliain卡纳塔克邦,印度。论文发表在国际Dalbergiaworkshop。
12. Kirtikar KR和BD Basu。2005。印度的药用植物。国际图书分销商、乌、印度。页:824。
13. Shyam年代,KU Chibber。从Dalbergialatifoliaseeds Dalbinol-a新12 a-hydroxyrotenoid。Phytochem。1978; 17: 1442 - 1443。
14. Rastogi RP, BN Mehrotra。1993。印度药用植物的纲要。勒克瑙和新德里:中央药物研究所、出版物和信息部门。页:245。
15. 玛丽ThurloughO、MOS Criodain JM MXD Dervilla。phenanthrene-1 Latinone, 4 -从Dalbergialatifolia醌。Phytochem。1981; 20:1089 - 1092。
16. Khare CP。2007。印度药用植物一个说明字典,施普林格科学,BusinessMedia, LLC.New纽约,美国,页:200。
17. 基米-雷克南Kirtikar和BD巴苏,印度的药用植物。国际图书经销商,乌吉,印度,2005。
18. 印度丰富的原材料。2卷出版和信息委员会,CSIR,新德里,1972。
19. RN Chopra, SL奈,IC Chopra。补充印度药用植物的术语表,CSIR,新德里,1980。
20. 公里还。孟买,印度》,第三版流行书得宝,1954。
21. 女子M, Dwived联合国,Kakkar p .抑制氧化应激和pro炎性介质的柠檬酸cymbopogon d Stapf提取脂多糖刺激小鼠肺泡巨噬细胞。chemtoxicol食物。2010;48:2913 - 9。
22. 小松T,山崎H, M,只是横井T在人类肝脏过氧化氢酶的识别因素提高苯妥英二羟基代谢物形成由人类肝脏微粒体。BiochemPharmacol。2002;63:2081 - 90。
23. Kristofikova Z, Klaschka J, Hana t .衰老引起的脂质过氧化水平的影响L-glutamic酸和估计的硫代巴比土酸测试在老鼠大脑组织。Expgerontol。1995;30:645 - 57。
24. Shi-Jye C, Wann-Cherng P, Chin-Mao H, Deh-Ming C,林SH。各种lipopolysaccharide-induced后体温的影响在大鼠肺损伤。胸部。2005;128:327 - 36。
25. Thirumurugan G等人,行为评估研究双边颈动脉闭塞引起的脑缺血大鼠。安生物。2010;1(1):208 - 23所示。
26. Margaill我Plotkine M Lerouet d抗氧化治疗中风的策略。免费Rad医学杂志。2005;39 (4):429。
27. Adibhatla et al .磷脂酶A2,羟基自由基和脂质过氧化作用在瞬态terebral缺血。Antioxid氧化还原信号。2003;5 (5):647 - 54。
28. Kinuta Y,菊池H,石川M,木村,“系川”Y脂质过氧化在局灶性脑缺血。J Neurosurg。1989;71 (3):421 - 9。
29. Akondi RB, Kumar P,安纳普尔纳峰,Pujari m .防护芸香苷和柚皮苷对精子质量的影响在链脲霉素(STZ)引起1型糖尿病大鼠。IJPR。2011;(3):585 - 96。
30. 安萨里,侯赛因SK,希点,哥利·d·别嘌呤醇的神经保护效应和nimesulide脑缺血再灌注损伤在糖尿病大鼠。欧元牧师地中海Sci.1-9杂志》(新闻)