研究与评论:生药学与植雷竞技苹果下载物化学杂志
菜单e-ISSN: 2321-6182 p-ISSN: 2347-2332
e-ISSN: 2321-6182 p-ISSN: 2347-2332
收到日期:24/10/2017;接受日期:22/11/2017;发表日期:27/11/2017
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今天公众最关心的问题是癌症治疗。草药在这方面发挥着至关重要的作用。葫芦(CP，南瓜)，甜瓜(CM，甜瓜)和黄瓜(CS，黄瓜)种子作为营养零食食用。本研究筛选了CP、CM和CS的正己烷和石油醚种子粗提物对人前列腺癌DU-145和人前列腺癌DU-145的体外细胞毒活性乳腺癌Sulforhodamine B (SRB)法检测MCF7细胞株。将其与标准药物阿霉素进行比较，分析其生长抑制率为50% (GI50)。与不同浓度(μg/ml)的阿霉素相比，提取物对两株细胞均无明显活性。因此，作者试图通过对这一植物家族进行抗癌研究来说明其重要性。在未来，新的细胞系可能为这些物种提供相关性，它们可以实际发挥治疗作用
黄瓜，甜瓜，黄瓜， DU-145, MCF7, SRB检测
癌症的治疗已经成为全世界关注的主要问题之一。在印度常见的类型是肺，胃，结直肠，肝例如，乳腺癌。肺癌和乳腺癌分别是男性和女性最常见的癌症。许多国家可能会看到，到2020年，不同的癌症将达到顶峰，影响最多的几代人。尽管各国已经进行了最大程度的研究和努力，但癌症仍然被认为是主要的致命疾病之一。在过去的几十年里，新型合成化疗药物目前在临床上的使用结果并不令人满意[1-3.］．植物源性草本产品因其多种功效而受到越来越多的关注治疗甚至那些与许多救命疾病有关的角色。已经指出，植物来源的化合物是肿瘤发生和相关的各个阶段的潜在抑制剂炎症流程。据报道，50%以上的植物被用于治疗癌症。这类产品的使用频率在亚洲人口中已达50% [4-10］．
本研究植物属葫芦科。植物化学帮助我们从植物中鉴定出不同的植物成分，这些成分属于类黄酮、三萜、甾醇、类胡萝卜素和脂肪酸。据报道，它们在炎症、溃疡、蠕虫病、真菌、细菌、病毒、癌症和糖尿病等不同领域发挥着重要作用[11-15］．SRB检测被认为是快速、准确、可靠和廉价的理想癌症筛查方法之一。其比色终点在正常人眼下是稳定可见的。它的工作原理是SRB染色，染色细胞总蛋白质，从而估计细胞数量。它提供了一种敏感的药物诱导细胞毒性测量方法，可用于克隆性定量，适用于大批量自动化药物筛选技术[16，17］．
统计数据显示，6.9%的新发病例肺癌每年有9.3%与男性和女性的死亡有关[18］．在未来的几年里，我们将在大城市看到更多的肺癌患者，这一天已经不远了。19］．同样，我们在印度面临着乳腺癌的主要威胁。在大多数城市，该病已开始影响30至40岁的人口，在农村地区发病率第二高[20.］．因此，需要对人群进行每小时一次的癌症筛查，以便在正确的时间进行准确的治疗。因此，考虑到在进步的印度民族的临床情况，我们试图筛选这两种细胞系的植物。
本文采用SRB法对正己烷和石油醚种子提取物CP、CM和CS对人前列腺癌DU-145和人乳腺癌MCF7细胞株进行筛选。
收集、身份验证和提取
CP、CM和CS种子的采集、鉴定和提取如既往报道[21］．
提取后用Whatman 1号过滤器过滤，在蒸发盘上蒸发溶剂进行浓缩。获得的提取物储存在琥珀色的密封容器中，放在冰箱中4°C，以防止任何形式的腐烂。
SRB测定法
两种提取物都筛选针对特定选择的细胞系，即;人类前列腺癌DU-145和人类乳腺癌MCF7。细胞培养物、培养基和标准药物阿霉素(ADR)在孟买新哈尔的ACTREC采购并保存。
细胞系在含有10%胎牛血清和2 mM l -谷氨酰胺的RPMI 1640培养基中培养。在本实验中，根据单个细胞系的倍增时间，以100 μL的镀液密度将细胞接种到96孔微量滴度板中，镀液密度如上述研究细节所示。细胞接种后，微量滴度板在37°C, 5% CO孵育2加入CP、CS、CM提取物和标准药前，在95%空气和100%相对湿度下静置24 h。
CP、CS、CM种子提取物和标准药先用二甲基亚砜(DMSO) 100mg /ml溶解，用水稀释至1mg /ml，冷冻保存后使用。加药时，将冷冻浓缩液(1mg /ml)解冻稀释至100 μg/ml、200 μg/ml、400 μg/ml和800 μg/ml。将这些不同药物稀释液中的10 μl等分加入已含有90 μl培养基的适当微量滴度孔中，得到所需的最终药物浓度，即10 μg/ml、20 μg/ml、40 μg/ml、80 μg/ml。
CP、CS和CM种子提取物和标准药物成瘾板在标准条件下孵育48小时，加入冷TCA终止测定。细胞是固定的原位加入冷的30% (w/v) TCA 50 μl(终浓度为10% TCA)， 4℃孵育60分钟。丢弃上清液;这些盘子用自来水洗了五次，然后风干。在每孔中加入1%乙酸0.4% (w/v)的SRB溶液(50 μl)，室温孵育20分钟。染色后回收未结合的染料，用1%乙酸洗涤5次去除残留染料。盘子是风干的。随后用10 mM trizma底洗脱结合物，在540 nm波长(参考波长为690 nm)的平板阅读器上读取吸光度[16，17］．
在测试井与控制井的基础上，逐板计算了增长率。百分比增长表示为测试井的平均吸光度与控制井的平均吸光度之比* 100。使用六次吸光度测量[时间零点(Tz)，控制生长(C)，以及在四种浓度水平药物存在下的测试生长(Ti)]，计算每种药物浓度水平下的生长百分比。
生长抑制率由公式计算，
[Ti/C] x 100%
中所描述的提取物对这些研究中使用的人类前列腺癌DU-145和人类乳腺癌MCF7细胞系没有产生显著影响表1-4而且图1-4．植物可以用各种提取技术来筛选它们的潜力。
| 人乳腺癌细胞系MCF7 | ||||||||
| 控制生长和药物浓度(µg/ml) | ||||||||
| 细节 | 实验1 | 实验2 | ||||||
| 浓缩的。 | 10 | 20. | 40 | 80 | 10 | 20. | 40 | 80 |
| 己烷厘米 | 108.1 | 105.5 | 102.7 | 102.6 | 105.1 | 99.8 | 98.0 | 101.7 |
| 己烷CP | 100.7 | 102.2 | 100.3 | 99.9 | 102.7 | 96.3 | 90.5 | 96.2 |
| 己烷CS | 98.1 | 103.9 | 99.2 | 101.3 | 102.8 | 96.4 | 93.8 | 97.1 |
| 宠物醚CS | 101.0 | 99.9 | 96.1 | 103.1 | 102.0 | 98.5 | 93.8 | 98.4 |
| Pet醚CP | 103.0 | 104.4 | 98.3 | 102.8 | 97.8 | 97.1 | 90.3 | 100.7 |
| 美国存托凭证 | -64.8 | -71.3 | -75.6 | -64.4 | -70.1 | -70.6 | -75.9 | -69.1 |
| 细节 | 实验3 | 平均值 | ||||||
| 浓缩的。 | 10 | 20. | 40 | 80 | 10 | 20. | 40 | 80 |
| 己烷厘米 | 103.4 | 109.2 | 106.5 | 105.8 | 105.5 | 104.8 | 102.4 | 103.4 |
| 己烷CP | 100.9 | 107.4 | 110.6 | 104.6 | 101.4 | 102.0 | 100.5 | 100.2 |
| 己烷CS | 106.5 | 110.7 | 109.4 | 102.4 | 102.5 | 103.6 | 100.8 | 100.3 |
| 宠物醚CS | 109.4 | 111.4 | 110.6 | 111.2 | 104.1 | 103.2 | 100.2 | 104.2 |
| Pet醚CP | 109.6 | 109.1 | 102.6 | 104.1 | 103.5 | 103.5 | 97.1 | 102.5 |
| 美国存托凭证 | -66.3 | -73.4 | -71.2 | -55.7 | -67.1 | -71.8 | -74.3 | -63.1 |
表1。人乳腺癌细胞系MCF7的正己烷种子提取物CP, CM, CS和石油醚种子提取物CP和CS和ADR(阿霉素)。下表给出了CP、CM、CS的正己烷种子提取物和CP、CS的石油醚种子提取物以及ADR(阿霉素)的三次平均结果。
| 人乳腺癌细胞系MCF7 药物浓度(µg/ml)由图计算 |
|||
|---|---|---|---|
| MCF7 | LC50 | 家 | GI50 |
| n己烷厘米 | 不 | 不 | > 80 |
| n己烷CP | 不 | 不 | > 80 |
| n己烷CS | 不 | 不 | > 80 |
| 宠物醚CS | 不 | 不 | > 80 |
| Pet醚CP | 不 | 不 | > 80 |
| 美国存托凭证 | < 10 | < 10 | < 10 |
表2。CP、CM、CS的正己烷种子提取物和CP、CS的石油醚种子提取物及ADR(阿霉素)的人乳腺癌细胞株MCF7图谱计算药物浓度(μg/ml)。GI50值≤10μg/ml被认为是纯化合物的活性，而GI50值≤20μg/ml的提取物被认为是总生长抑制(TGI)。
| 人类前列腺癌细胞系DU-145 | ||||||||
| 控制生长和药物浓度(µg/ml) | ||||||||
| 细节 | 实验1 | 实验2 | ||||||
| 浓缩的。 | 10 | 20. | 40 | 80 | 10 | 20. | 40 | 80 |
| 己烷厘米 | 96.3 | 98.4 | 72.5 | 65.6 | 99.5 | 84.4 | 65.8 | 68.3 |
| 己烷CP | 101.0 | 100.8 | 87.1 | 87.1 | 99.5 | 93.5 | 82.6 | 98.1 |
| 己烷CS | 110.7 | 106.3 | 97.9 | 100.3 | 108.9 | 102.5 | 93.0 | 110.3 |
| 宠物醚CS | 113.7 | 117.8 | 112.8 | 117.6 | 109.2 | 102.6 | 105.7 | 115.2 |
| Pet醚CP | 108.4 | 107.7 | 100.8 | 103.7 | 103.0 | 88.3 | 89.0 | 96.3 |
| 美国存托凭证 | 4.３ | 2.8 | -6.0 | 7.1 | 1．2 | -9.0 | -16.4 | 2.6 |
| 细节 | 实验3 | 平均值 | ||||||
| 浓缩的。 | 10 | 20. | 40 | 80 | 10 | 20. | 40 | 80 |
| 己烷厘米 | 98.8 | 95.2 | 84.3 | 84.6 | 98.2 | 92.6 | 74.2 | 72.9 |
| 己烷CP | 101.9 | 103.5 | 96.8 | 98.8 | 100.8 | 99.3 | 88.8 | 94.7 |
| 己烷CS | 105.1 | 103.8 | 98.9 | 105.7 | 108.2 | 104.2 | 96.6 | 105.5 |
| 宠物醚CS | 109.7 | 109.1 | 107.2 | 113.8 | 110.9 | 109.8 | 108.6 | 115.5 |
| Pet醚CP | 103.4 | 98.6 | 86.5 | 91.2 | 104.9 | 98.2 | 92.1 | 97.1 |
| 美国存托凭证 | -4.0 | -1.7 | -16.6 | -7.6 | 0．5 | -2.6 | -13.0 | 0.7 |
表3。人前列腺癌细胞系DU-145的正己烷种子提取物的CP, CM, CS和石油醚种子提取物的CP和CS和ADR(阿霉素)。下表给出了CP、CM、CS的正己烷种子提取物和CP、CS的石油醚种子提取物以及ADR(阿霉素)的三次平均结果。
| 人类前列腺癌细胞系DU-145 药物浓度(µg/ml)由图计算 |
|||
| MCF7 | LC50 | 家 | GI50 |
| 己烷厘米 | 不 | 不 | > 80 |
| 己烷CP | 不 | 不 | > 80 |
| 己烷CS | 不 | 不 | > 80 |
| 宠物醚CS | 不 | 不 | > 80 |
| Pet醚CP | 不 | 不 | > 80 |
| 美国存托凭证 | 不 | < 10 | < 10 |
表4。CP、CM、CS的正己烷种子提取物和CP、CS的石油醚种子提取物及ADR(阿霉素)的DU-145图计算药物浓度(μg/ml)。GI50值≤10μg/ml被认为是纯化合物的活性，而GI50值≤20μg/ml的提取物被认为是总生长抑制(TGI)。
图1:生长曲线:正己烷CP、CM、CS种子提取物和石油醚CP、CS种子提取物及ADR(阿霉素)对人乳腺癌细胞株MCF7的影响。
图2:生长曲线:人前列腺癌细胞系DU-145的正己烷种子提取物CP, CM, CS和石油醚种子提取物CP和CS和ADR(阿霉素)。
图3:人类前列腺癌细胞系DU-145的图像。
图4:人乳腺癌细胞系MCF7的图像
引用这篇论文的研究人员应该尝试探索不同浓度下的不同细胞系。
目前的研究是试图探索的潜力葫芦，甜瓜而且Cucumis巨大成功治疗癌症。
我们要感谢学院管理层为我们提供了所有的设施来做这项工作，感谢Kharghar ACTREC的帮助在体外抗癌测试。
