穆罕默德Derbali1*,Elaissi去寻找更多2,im Cheraief3和Mahjoub Aouni1
收到了31/03/2016;接受06/04/2016;发表14/04/2016
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摘要目的:本研究是关于洋葱(cepa)籽油提取、脂肪酸鉴定及其抗菌活性。方法:索氏提取方法使用甲醇(MetOH),脂肪酸的籽油使用色谱法和火焰离子化检测器(GC-FID)。阀瓣扩散和板微稀释抗菌活性的测定。结果:提取产量的24.86±0.98 V / W (%)。种子提取显示亚油酸(C18:2±70.8%),油酸(C18:1, 20.14%)和棕榈酸(C16±4.96%)占主导地位的a . cepa籽油脂肪酸。抗菌检测到潜在的对参考临床分离细菌和病原体。结论:这些结果表明,cepa a是一种很有前途的石油种子作物与高水平的不饱和脂肪酸和抗菌的潜力。一个二价的角色:营养和抗生素,cepa的籽油在食品和制药应用。证明它的重要性
葱属植物cepa、种子、脂肪酸、GC-FID抗菌活性,多耐药细菌。
植物种籽油有多个应用程序,用于各个领域从化妆品到烹饪。种子油是获得更多的重要性研究证明它们是天然维生素e的来源和多酚1- - - - - -3,antioixidant著称4)和抗炎能力(5]。已知籽油富含脂肪酸。多不饱和脂肪酸,如亚油酸是人体新陈代谢所必需的由于缺少酶负责他们的生物合成6]。PUFA发挥关键作用促进心血管健康,增强anti-tumoral活动(7,8和防止动脉粥样硬化9,10]。
洋葱:葱属植物cepa l是一种成分的食物在世界各地。研究表明,cepa是参与许多生物活性如抗氧化电位(11],王亚南[12和抗过敏药13)活动。a . cepa提取物是有效的逆转器官毒性(14),治疗人类白血病(15]。cepa的种子a . l .被用于由维吾尔民族民间医药在中国和提高内脏器官的功能,治疗腹泻、发热、中暑、浮肿的脸和眼睛,促进血液洪水(16]。在这份报告中,我们专注于a cepa籽油和有机溶剂萃取,脂肪酸概要的决心,主要的抗菌活性化合物鉴定和测试籽油对敏感和多重耐药细菌。
化学和材料
答:cepa的种子从我们当地recolted Jelma场,西迪布济德,突尼斯。在这项研究中使用的所有化学品均为分析纯(Sigma-Aldrich®90年,圣路易斯,密苏里州,美国)和使用的试剂是标准化。
石油开采
种子是细粉使用高速混合机。索氏提取器的油从种子中提取使用MetOH 4 h。固体溶剂使用的比例是1:10。石油又恢复了用旋转蒸发器蒸发掉溶剂。
脂肪酸甲基酯合成和GC-FID(饥饿)
饥饿是准备,以下描述的过程采用AOAC公认的(17]。整除的10毫克脂质溶剂提取后被酯化的内部标准(0.1毫升C17:0, 1毫克/毫升)和1毫升BF3-etherate,样本煮30分钟在70°C。饥饿是提取盐饱和与己烷混合物(1.0毫升)。干燥饥饿、酸酐Na2SO4添加和离心机(10分钟,3.56 g),然后倒在上部特定的细胞。饥饿的分析是根据欧盟委员会修改规定欧共体2568/91在惠普(hewlett - packard) GC(惠普,帕洛阿尔托,CA),配备一套FID split-splitless注射器,在270°C。载气是氮(1毫升/分钟)和洗脱了熔融石英安捷伦DB23毛细管柱(60米的长度、内径0.32毫米和0.25米薄膜厚度)。条件如下:喷油器温度、270°C;支撑材,280°C;喷射器分流比,1:50;初始柱温、130°C; step 1, 6.5°C/min to 170°C; step 2, 2.8°C/min to 215°C and maintained for 12 min; step 3, 40°C/min to 230°C and maintained for 20 min. FAMEs were identified by comparing their relative and absolute retention times to those of authentic cisfatty acid (CFA) and TFA standards [18]。
抗菌活性
微生物
使用的微生物菌株在生物分析中列出表1。不同的美式文化收集(写明ATCC)参考使用细菌以及从临床分离耐多药菌株。
| 应变 | 区抑制(毫米) | 麦克风(µg /毫升) | 庆大霉素 |
|---|---|---|---|
| 革兰氏阴性 | |||
| Enterobactercloacae耐多药 | 9日,33±0.57 | 500年 | R |
| 大肠杆菌ATCC25922 | 12.66±0.57 | 250年 | 24 |
| 大肠杆菌耐多药 | 12.33±0.57 | 250年 | 24 |
| Klebsiellapneumoniae耐多药 | 14±1 | 250年 | R |
| 变形杆菌耐多药 | 10日,33±0.57 | 500年 | 19 |
| Pseudomonasaeruginosa写明ATCC 27853 | 10.66±0.57 | 500年 | 20. |
| 铜绿假单胞菌耐多药 | 11±1 | 500年 | 20. |
| 革兰氏阳性 | |||
| 金黄色葡萄球菌写明ATCC 25923 | 18日,33±0.57 | 125年 | 26 |
| 金黄色葡萄球菌耐多药 | 18±1 | 125年 | 26 |
| 葡萄球菌epidermidisATCC12228 | 14日,33±0.57 | 250年 | 25 |
| Streptococcuspseudopneumonaie耐多药 | 14±1 | 250年 | 24 |
| 芽孢杆菌subtilus写明ATCC 6633 | 20.66±0.57 | 125年 | 28 |
| Enterococcusfaecalis写明ATCC 29212 | 16±1 | 125年 | 17 |
表1:区抑制和洋葱籽精华的麦克风。
磁盘扩散分析
抗菌活性进行了采用纸片扩散法(19]。佩特里盘子用20毫升无菌Mueller-Hinton琼脂(20.为细菌。测试文化擦洗顶部凝固的媒体和允许干10分钟。a . cepa籽油被稀释10%二甲亚砜(DMSO)和20μl加载在光盘(1毫克/盘)。光盘的庆大霉素(30μg)被用作积极控制。加载盘表面被放置在室温下30分钟的中、复合扩散。板块在孵化37°C。24小时后,区抑制被记录在毫米。
确定最低抑制浓度
最低抑制浓度(MIC)防止可见细菌生长是衡量肉汤稀释法(采用使用96孔酶标)21]。提取原液被溶解在10% DMSO溶液的准备。每个提取的麦克风被定义为抑制细菌生长的最低浓度,孵化后37°C在18岁和24小时。
统计分析
所有的实验进行了一式三份,由单向方差分析计算和统计意义(方差分析)。值为p < 0.05显示统计学意义使用邓肯的多个范围测试。
脂肪酸概要
结果所示表2表明,cepa是丰富MUFA和PUFA负责的脂质调节(22),他们对癫痫的保护作用,认知障碍和海马氧化DNA损伤(23尤其是油酸和亚油酸。MUFA和PUFA代表总脂肪酸的92%以上,提供ω- 3和ω- 6脂肪酸。应提供必需脂肪酸的食物摄入量以来人类缺乏酶的合成(24,25]。事实上,亚油酸是一个重要的脂肪酸,整个ω- 6脂肪酸的家庭。这些脂肪酸是细胞膜的重要组成部分,是其他物质的前体参与许多生理反应。相比之下,棕榈酸是一种硬化的化合物,当在大量消耗26]。
| 美国没有。 | 脂肪酸收益率(%) | |
|---|---|---|
| 国家林业局 | ||
| 1。 | Butyricacid C4: 0 | 0.004 |
| 2。 | Caproicacid C6: 0 | 0.003 |
| 3所示。 | Capricacid C10: 0 | 0.006 |
| 4所示。 | Lauricacid C12: 0 | 0.058 |
| 5。 | Tridecylicacid C13: 0 | 0.002 |
| 6。 | Myristicacid碳:0 | 0.052 |
| 7所示。 | Pentadecylicacid C15: 0 | 0.001 |
| 8。 | Palmiticacid C16: 0 | 4.968 |
| 9。 | Margaricacid C17: 0 | 0.040 |
| 10。 | Stearicacid C18: 0 | 1.772 |
| 11。 | Arachidicacid甜:0 | 0.213 |
| 12。 | Heneicosylicacid C21: 0 | 0.033 |
| 13。 | Behenicacid C 22: 0 | 0.135 |
| 14。 | Tricosylicacid C23: 0 | 0.001 |
| MUFA | ||
| 15。 | Myristoleicacid碳:1 | 0.022 |
| 16。 | Pentadecenoicacid C15: 1 | 0.005 |
| 18岁。 | Palmitoleicacid C16: 1 | 0.049 |
| 19所示。 | Heptadecenoicacid C17: 1 | 0.038 |
| 20. | Oleicacid C18: 1 | 20.14 |
| 21。 | Vaccenicacid C18: 1 | 0.914 |
| 22。 | Icosenoicacid甜:1 | 0.313 |
| 23。 | Erucicacid C22: 1 | 0.008 |
| PUFA | ||
| 24。 | Linoleicacid C18: 2 | 70.80 |
| 25。 | Alpha-linolenicacid C18: 3 | 0.080 |
| 26岁。 | Gamma-linolenicacid C18: 3 | 0.002 |
| 27。 | Eicosadienoicacid甜:2 | 0.054 |
| 28。 | Dihomo-gamma-linolenic酸C20:3 | 0.007 |
| 29。 | Eicosatrienoicacid甜:3 | 0.016 |
| 30. | Arachidonicacid甜:4 | 0.001 |
| 31日。 | Docosadienoicacid C22: 2 | 0.008 |
| 32。 | Docosatrienoicacid C22: 3 | 0.051 |
| 33。 | Docosatetraenoicacid C22: 4 | 0.003 |
| 34。 | Docosapentaenoicacid C22: 5 | 0.042 |
| 国家林业局总 | 7.29 | |
| 总MUFA | 21.50 | |
| 总PUFA | 71.21 | |
表2:脂肪酸组成洋葱种子提取脂肪酸总量的%概要文件。
抗菌活性
metOH种子提取物的体外抗菌活性从a cepa对测试多药物耐药性病原体微生物包括定性和定量评估的抑制区和最低抑制浓度测定使用串行采用技术。
根据表1所示的结果,籽油展出一个强有力的抑制作用与抑制区9 ~ 20毫米直径。MIC值变化从125年到500年μg /毫升ATTCC多药物耐药性病原体微生物。对革兰氏阴性菌株MetOH提取更有效。金黄色葡萄球菌写明ATCC 25923,金黄色葡萄球菌MDR,芽孢杆菌subtilus写明ATCC 6633和粪肠球菌写明ATCC 29212人受影响最严重的革兰氏阴性细菌的MetOH种子中提取的MIC值125μg /毫升。大肠杆菌ATCC25922,大肠杆菌耐多药和肺炎克雷伯菌MDR是受影响最严重的革兰氏阳性测试菌株与麦克风MetOH种子提取250μg /毫升的价值。
这些发现原来关于MetOH种子中提取的cepa,依照地上部分提取物的抗菌活性和精油的cepa [27- - - - - -30.]。这些结果采取了高度重要性对于抑制的影响尤其是对测试从突尼斯大学医院临床分离株耐药细菌有关他们的潜在危险和威胁人类健康。
这些发现原来关于MetOH种子中提取的cepa,依照地上部分提取物的抗菌活性和精油的cepa [27- - - - - -30.]。这些结果采取了高度重要性对于抑制的影响尤其是对测试从突尼斯大学医院临床分离株耐药细菌有关他们的潜在危险和威胁人类健康。
这份报告显示,a cepa籽油很丰富MUFA和PUFA占有一个重要的抗菌活性对ATTCC菌株和多重耐药病原体。总的来说a cepa籽油结合了营养及医药方面证明了它的高度实用程序从细菌病原体(食品添加剂和食品防腐剂图1和图2)。
图1:的脂肪酸chromatogramm洋葱种子中提取。
图2:的主要脂肪酸的化学结构葱属植物cepa种子中提取。
作者感谢微生物学实验室,大学医院Fattouma Bourguiba和tu - 5000拖拉,提供临床分离株多重耐药病原体。
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