所有提交的电磁系统将被重定向到在线手稿提交系统。作者请直接提交文章在线手稿提交系统各自的杂志。

Flash色谱及其不同的可溶解的框架:一个回顾

Dinesh Kumar G*

药物分析和质量保证,CMR药学院,印度

*通讯作者:
Dinesh Kumar G
药品分析和质量保证
建邦者CMR药学院、Medchal纳,印度
电话:+ 919963330488
电子邮件: (电子邮件保护)

收到日期:26-06-2016;接受日期:20-07-2016;发表日期:26-07-2016

访问更多的相关文章dota2雷竞技

文摘

闪光色谱法是制备列chromatography-preparative液相色谱快速的形式根据气压驱动的混合介质和短柱层析法优化的快速分离的有机化合物。随着技术的发展提供指南的正常阶段闪光色谱已经变得不那么重要了。多年的经验进行色谱用一次性列被浓缩成简单的准则用于薄层色谱结果翻译成权力平等主义的——或者gradient-flash色谱法。描述研究应向研究人员提供的一种手段选择适当的列和指导方针来减少浪费溶剂、二氧化硅、时间,和金钱。现代flash色谱系统作为打包出售塑料墨盒和溶剂泵筒。这些系统也可能与探测器和馏分收集器提供自动化。引入梯度泵导致更快的分离,减少溶剂的使用。

关键字

硅胶、闪光色谱法、薄层色谱、高效液相色谱法。

介绍

硅胶连续色谱已经普遍在自然科学和自1978年正式演讲(1]。每一个除了TLC色谱技术使用分区程序部分。部分色谱已经发现在众多的研究中心用于制备和反应控制在自然融合。的意义段色谱主要是因为元素下面给出我。基本的紧迫的战略,二世。工作重量低,三世。低成本的设备(2]。

闪光色谱法从根本上是一种气动力量驱动的一半,一半的中等重量和短段色谱已增强特别是快速分区。连续色谱是一种策略用于分离混合原子到他们的个人成分,尽可能经常用作药物披露过程的一部分。闪光色谱不同习惯过程在两个方面:首先,有点小硅胶粒子利用250 - 400年的横截面,其次,因为有限流带来的可溶解的凝胶颗粒,加压气体ca。10 - 15ψ是用来驱动可溶解的部分的固定阶段(3]。最终的结果是一个快速“在一线”和高色谱法测定。一些制造商创造了计算机连续色谱框架。

它的特征为两类2:

1。LPLC——低重量液体色谱LPLC框架,解决50 - 75 psi

2。MPLC以上工作介质重量液体色谱MPLC框架150 psi。机械化大火色谱框架结合段通常发现在更昂贵的高效液相色谱法的框架,例如,斜坡泵,测试注入端口,一个紫外线指标和采集者收集洗脱液的一部分。通常这些机械化框架单独的例子从几毫克到机械公斤规模和提供更少的昂贵和快速的回答做不同的注入prep-HPLC框架。产品控制机械化框架组织部分,允许客户端只是收集包含他们的目标化合物的团体接受他们的框架的发现者,帮助客户发现后续净化材料内部的分裂采集者。产品同样的备件导致色谱过程的真实和/或之后复习的目的。

原则

准则是洗脱液,在气体重量定期氮或压缩空气快速推动短玻璃部分大量内部宽度。玻璃部分塞满了吸附剂的分子特征尺寸。最利用硅胶40 - 63μm静止阶段,但显然迫切与其他分子大小也可以利用。粒子比25μm应该利用较低的一致性的阶段,因为一般流率很低。通常凝胶床高约15厘米,体重1.5 - -2.0酒吧工作。最初只是修改的硅是利用静止阶段,这样孤独的典型阶段色谱是可能的。同时,尽管如此,平行于高效液相色谱,切换阶段材料是利用更经常作为线色谱法的一部分。

理论

色谱误用多才多艺的阶段之间的分配行为的差别和静止阶段隔离段混合。混合的混合界面平稳阶段的费用,相对偿付能力或吸附。维护是一个测量速度的一种物质在色谱框架。在一个不断进步的框架(如高效液相色谱法和GC的混合与洗脱液,筛选了维护通常是测量维修时间rt,注入和发现之间的时间。与改进框架un-interfered TLC、维修维护元素射频测量,运行长度的复合分区运行长度的洗脱液。

射频=距离过去了可溶解的前面(4,5]。

闪光色谱系统的不同部分

•有效的分区的基本的决定最好的吸附剂。最基本的静止阶段段色谱是二氧化硅。

•硅胶SiO2和氧化铝2O3两种吸附剂通常利用部分色谱的自然科学家。这些吸附剂在不同截面尺寸,所显示的数字在壶马克:“硅胶60”或“硅胶230 - 400”是两个或三个插图。

•这个数字逃避的晶格筛用于估计二氧化硅,特别是数量的开口截面或过滤器通过未经提炼的二氧化硅分子混合装配过程中的传递。吸附剂的分子大小的影响如何通过部分可溶解的课程。的小颗粒截面高品质线使用的是色谱法;更大的粒子降低网络品质是利用重力色谱法。

•为例,利用70 - 230年硅凝胶重力段和230 - 400年格线段。硅胶依赖的测量混合的射频的区别是孤立的,在测量的测试。n g的测试,你应该利用30 - 100 n克硅胶。

•少要求分歧,比例更像30:1是强大的,麻烦的分区,更经常需要硅胶。在任何情况下,利用更多的硅胶,所需的时间跨度色谱法是扩大。硅胶粉的厚度大约是0.75克每毫升。

•这是一些吸附剂本质上是利用火焰的一部分色谱法(6]。

•二氧化硅:微酸性介质。最适合正常的混合,完成伟大的分区。

•硅酸镁载体:温和,无党派的媒介。200年截面可以令人信服的简单的分歧。在200工作最好由过滤清洁。几贴在硅酸镁载体混合,先测试。

•氧化铝:基本或公正的媒介。可以为简单的分区,引人注目和胺的卫生处理。

•反向石英阶段:最极混合洗提最快、最极性的慢。可分解的系统。

•连续段色谱通常是完成两个溶剂的混合,极性和非极性段图1(7]。

chemistry-Instrumentation-Flash-Chromatography

图1:仪表的闪光色谱法。

涂可溶解的框架

1。碳氢化合物:戊烷、石油醚、己烷

2。乙醚和二氯甲烷从根本上肢体一样

3所示。乙酸乙酯推导

两部分可溶解的框架

我。醚/石油醚、乙醚、己烷、乙醚/戊烷:选择冒泡烃部分依赖于可访问性和先决条件。戊烷是昂贵和low-bubbling,石油醚可以low-bubbling,己烷立即访问。

二世。乙酸乙酯/己烷:标准,对于传统的混合和最好的部门。

三世。/二氯甲烷:甲醇的极性混合。

四、10%甲醇溶液中氨/二氯甲烷:有时移动持久胺基准。

诉基础即含氮混合,有时包括贵重或重要的测量三乙胺或吡啶可分解的混合0.1%左右。

vi。酸性加剧,有时有点酸性腐蚀的措施是有价值的。在这种情况下,是非常警惕的集中跟踪措施的可溶解的酸可以集中在一个项目时非常危险的。在这些情况下,酸性腐蚀经常可以安全地旋转蒸发仪被包括甲苯和集中几毫升卷和再处理这几次。低酸性腐蚀泡沫比甲苯英国石油公司,这将排除腐蚀性没有发现完美的化合物。经常利用线溶剂的性质。感兴趣的化合物应该TLC射频≈0.15到0.20的可溶解的框架你选择。双两段可溶解的框架和一个可溶解的尽头有一个高于其他通常是最好的,因为他们考虑的简单修改正常肢体的洗脱液。溶剂的比例决定的肢体可溶解的框架,从而混合的洗脱率被孤立。更高的可溶解的极端扩张洗脱率混合。如果你的射频≈0.2,你将需要一个卷的可溶解的≈5 x的体积干硅胶以便运行您的部分表1

溶剂 密度g / ml 洗脱强度 溶剂组 沸点°C 紫外截止纳米 电磁阀ppm
正己烷 0.66 0.01 1 69年 195年 One hundred.
2 2 4-Trimethylpentane 0.69 0.02 1 99年 210年 300年
环己烷 0.77 0.03 1 81年 200年 One hundred.
1 2-Trichloromethane 1.48 0.31 8 61年 245年 50
甲苯 0.87 0.22 7 110年 285年 One hundred.
二氯甲烷 1.33 0.3 5 40 232年 One hundred.
乙酸乙酯 0.9 0.45 6 77年 256年 400年
Methyl-t-butyl醚 0.74 0.48 2 55 210年 40
丙酮 0.79 0.53 6 56 330年 750年
四氢呋喃 0.89 0.35 4 66年 212年 200年
乙腈 0.78 0.5 6 82年 190年 40
异丙醇 0.79 0.6 3 82年 205年 400年
乙醇 0.79 0.88 3 78年 210年 1000年
甲醇 0.79 0.7 3 65年 205年 200年
1 0.073 8 One hundred. 180年 - - - - - -

表1:不同溶剂的参数。

部分选择

选择一个部分是10,20、40毫米ID基于制备必需品。事实上,教授仍然等提供这种选择表2:单步Flash列保护和创造性在色谱又向前迈进了一步。连续色谱法是一种快速和廉价的方法清洗的自然混合。汤森条纹细分到各种各样的大小从4 g - 300 g为简单的生产适应性反应。汤姆森另外提供其他紧迫的材料,如胺和C18条纹部分授权终端客户机使用这些火焰部分宽范围的响应。

列Diametermm 洗脱液的体积毫升 示例加载毫克 分数大小毫升
射频< 0.2 射频> 0.1
10 One hundred. One hundred. 40 5
20. 200年 400年 160年 10
30. 400年 900年 360年 20.
40 600年 1600年 600年 30.
50 1000年 2500年 1000年 50

表2:典型的包装和所需的洗脱液洗脱体积。

可溶解的选择性

可溶解的特点是选择性的可分解的具体影响维护一种化合物混合对其他人,因此影响ΔRf和简历。溶剂选择性应该适应给ΔRf > 0.20。多样化的可分解的混合得到幻想TLC分离在很大程度上揭示了拟合成功的火焰色谱条件分区。多样化的可分解的混合甚至可以转化洗脱请求的一部分片段的例子。段体积对比ΔCV预测部分限制或材料的测量,可以可行地隔离在一个孤独的段叠加。ΔCV越引人注目,更引人注目的成功限制部分。

方法

按列

色谱段停止用一点棉羊毛,只足够填补开关打开。包括砂,约2厘米的距离在沙滩上大致相同的部分图2。包括硅胶干燥。往往是理想的如果硅不是很长,大约6到10英寸是最好的时间。加入房子真空的基础部分通过活塞。打开真空和活塞;这将包装后的硅胶和抱紧它的进步。加砂的最高点部分,约1 - 2厘米就足够了。与真空仍然连接,将可分解的预拌,即4:1己烷/乙酸乙酯推导。然而允许可溶解的流段,直到它实际上是洗脱。现在,关上水龙头和驱逐真空线。 Ensure enough dissolvable is in the segment for 5-6 segment volumes worth to stream however, to guarantee complete pressing. Presently elute the greater part of the dissolvable with pneumatic force, taking consideration not the let the section run dry. Stop with the dissolvable level parallel with the sand. An all-around stuffed segment ought not to have any splits or fixes. The dissolvable escaping from the stopcock ought not be warm or hot [8]。

chemistry-Pressing-cloumn

图2:按cloumn。

堆积的列

建立一个回答你的反应或复合融入二氯甲烷可以想象的无关紧要的措施。利用吸管,将这个刻意添加到二氧化硅的最高点,洗玻璃水瓶与二氯甲烷或色谱可溶解的3 - 4倍。后每一个选项,允许可溶解的水平陷入极度沙子底下的硅胶。小心翼翼地包括2 - 3吸量管色谱可分解的,把这个部分重复3-4x。现在,故意填满剩下的部分空间与色谱可溶解的洗提利用空气包装。流率约2英寸/时刻是完美的。这是衡量如何快速可溶解的部分连续暴跌的块段,硅胶。最有利的判断和改变包括复合前的流率。在回应的情况下混合或复合不是在一个合理的可溶解的可溶解的叠加,它可以摄取到硅胶上。这是完成在CH32CO溶解的化合物,包括硅胶和刻意关注硅胶干燥警惕:敲门!。干硅然后添加到最高点的填充硅部分。 For this situation, sand ought not to be added to the section until after the silica-compound blend is included. This technique is suggested just if all else fails as partitions are frequently mediocre compared to arrangement stacking [3]。

chemistry-Stacking-Column

图3:堆积的列。

运行部分

段部分聚集在试管,一种大小适合的肢体。利用13毫米试管小尺度即5-50 mg和大试管更大的部分。提到的规则仍为挑选份量的论文。后立即开始收集部门包括你的化合物;不多久,非常非极性混合洗提列。堆放一段后,最好不要停止对任何一段时间。这是因为温和的传播上的混合硅胶带来贫困部门和减少产量。发现你的项目,检测每一部分在TLC板并检查哪些部分包含混合。部分包含相同的混合加入,试管用二氯甲烷或最有可能更好的自然,精制乙酸乙酯推导,可溶解的集中在减少体重。尽量不要让一段干涸或洗提可溶解的直到你一定的大多数混合已经筛选了9- - - - - -18]。

后整理部分

完成之后,洗提的大部分的可溶解的部分利用压缩空气。流动的空气通过段~ 2小时会给干,自由流硅胶。溢出的物质部分硅废物持有者。总的来说,用水洗段和CH32是足够的。至关重要的机会,可以利用测量液体清洁剂。试图放弃抓段与粗糙的刷子或清洁剂(19- - - - - -30.]。

利用Flash色谱法

正常混合越来越评估其他选择以这种方式建立的药物和分区的要求这样的复杂混合另外发展。连续色谱法是一个非常重要的系统领域的常规混合研究因为它给出了一个快速、温和的方法分离的基本段复杂植物分离。

定期连续色谱法是利用过滤装置后自然融合。“短指出伴随“大纲Sepacore框架的适应性增强的火焰净化反应混合不同的组合。监禁的4-Methoxyacetophenone粗糙响应混合,权力平等主义的洗脱,利用额外的极地为测试叠加可分解的,孤立的安息香从一个未经提炼的反应混合,隔离2,2-Furoin从一个未经提炼的反应混合,清理ααα-Methyl苯乙烯的火焰色谱,隔离3-Nitro-4-ethoxybenzaldehyde合并混合,隔离Benzylideneacetophenone从未经提炼的反应混合物31日- - - - - -60]。

结论

连续色谱法是一个基本的、快速、经济上精明的制备液相色谱方法。基于分区通常得到TLC结果本质上是推算出制备规模。连续色谱是特别有用的方法迅速隔离扩大数量的测试。到处是令人吃惊和简单的规模。今天仪表还是减少要求充分控制分离和系统继续快速增长61年- - - - - -99年]。

引用

全球技术峰会