黄酮在可可防御疫霉megakarya

文摘

异花授粉的合适的基因型和选择早些时候精英后代使用足够了plants-associated国防标记在植株的叶子是决定性的发展t .可可基因型宽容黑色豆荚疾病(桶)。t .可可植株从人工异花授粉的™€SNK64×一™‚UPA143分析对桶使用叶盘测试。随后,叶子(+健康、受伤和伤口感染)选择E9(宽容)、E13(中度敏感)和E32(最易感)年轻的混合基因型从™€SNK64×一™‚UPA143被用于黄酮使用高效液相色谱/ LC / MS分析系统。叶瓣测试显示,62.5%的后代疾病评分利率低于双亲的平均值。大约79.17%和20.83%的后代比最敏感的小敏感父(UPA143)和宽容的父母分别(SNK64)。非生物和生物stressesdependant黄酮总内容。感染下,宽容的混合基因型(E9)显示黄酮含量最高,这可能控制公差桶。个人微分模式根据黄酮、黄酮分析显示治疗和混合基因型。毛地黄黄酮rutinoside异构体(tR = 12.5), isoorientin (tR = 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (tR = 10.9)似乎是宽容的特征混合基因型(E9)感染。相对地,高含量Apigenin-hexoside (tR = 10.1)和Apigenin-hexoside (tR = 11.6)可能敏感相关混合基因型(E13)和(E32)。因此,™€SNK64×一™‚UPA143可以用来开发混合基因型宽容的桶。池以上黄酮,报道首次在t .可可辩护,可能是有用的标记开发t .可可混合基因型宽容的桶。

关键字

育种、Apigeninglycosides Isovitexin,毛地黄黄酮、可可

介绍

病(黑圆荚体病)和病虫害发生率是最绊倒石头可可生产力和盈利能力在许多非洲可可生产国(1- - - - - -4]。高产品种的宽容疾病人失踪;有挑战性的发展这些基因型结合的特性。几十年来,农民试图处理的有害影响p megakarya(黑色圆荚体疾病的因果代理)由常数t .可可合成中的应用农药(5,6]。然而,这种方法不是成本效益;它也有对农民的健康和环境有害的影响(7]。出于这个原因,开发环境友好的可持续发展实践的疾病管理可可种植园正在取得进展。这些实践的发展通常包括t .可可基因型基因宽容黑色豆荚疾病(8、9)。遗传改良(繁殖和生产力病原体耐药性)可可通过生殖策略主要是使用[10,11]。这种策略是基于给定的父母的能力(基因型或克隆)产生后代的性状。不幸的是,许多夫妻可可克隆还没有测试这个目的,如一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143。SNK64据报道不太敏感,黑色圆荚体疾病,工作效率较低;虽然UPA143黑荚是温和敏感疾病和高效12]

后代的选择(从给定的夫妇)早些时候与宽容的特征可以通过分析监控代谢物宽容在年轻的植物叶片的标志。植物抗毒素池,即一般黄酮类化合物被报道公差标记在植物防御生物压力(13]。然而,已经有超过6000类黄酮与广泛的生物学功能:保护紫外线辐射和植物病原体,信号在有节,男性生育能力,生长素运输,以及花的颜色(14,15]。

黄酮、黄酮的亚群体,一大群高等植物的代谢产物具有不同的生物功能。这些化合物被认为是内源性抗生素(抗生素)在植物抵御病原体:线虫、软体动物、真菌、卵菌,细菌(16]。

研究论文报告的含义中苯酚化合物t .可可防御p megakarya一般来说,但别提黄酮或类型的黄酮尤其是t .可可防御机制针对p megakarya感染。对黄酮的含义与黑色t .可可宽容pod oomycete p . megakarya所造成的疾病。

目前研究的目的是评估的含义在t .黄酮可可防御p megakarya他们潜在的使用作为t .可可早些时候选择标记基因型宽容的黑色圆荚体疾病。首先,研究评价t .可可黑豆荚疾病易感性的后代(从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143)使用叶瓣测试根据Nyasse改编方法等。[12]。随后,进行了定量和定性分析黄酮对健康(治疗),受伤和受伤+感染(p . Megakarya与菌丝)从幼苗叶片的三种类型的混合基因型(从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143)不同的黑色圆荚体疾病的易感性(少,中度和高度敏感的黑色圆荚体病)。

材料和方法

t .可可植物材料

t .可可种子成熟的豆荚的一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143通过人工授粉在Barombi康(西南地区,喀麦隆)播种农场被用来建立一个托儿所。四个月大的植物叶子的完整的sib后代从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143(上面的托儿所)被用于叶片盘测试,和个人黄酮家庭的分析。

p . megakarya隔离用于测试的易感性¢A™€Snk64×一个¢™‚Upa143后代

的敏感性测试完整的sib后代从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143,中间积极隔离对我们是免费提供的植物病理学实验室IRAD(法国农业研究所de矫揉造作的银行倒勒开发)的Nkolbisson(喀麦隆雅温得)。在我们的实验室(生物化学实验室,科学教师,Douala-Cameroon大学),这个p . megakarya隔离已经保存在实验室经常亚文化在1.5% (w / v) pea-based琼脂培养基。维持毒性隔离是定期接种到可可豆荚。

游动孢子产量

游动(或培养液)是根据获得的调整方法。从l0-days-old文化游动了。文化与孢子囊诱导解放游动孢子通过增加无菌蒸馏水在4°C。1小时后在室温下,游动孢子浓度调整到3×10⁵游动孢子/毫升MALASSEZ hemati-meter。

筛查的敏感性的一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143 p . Megakarya后代

叶圆盘测试用于检查调整方法Nyasse et al。12]。三个复制的实验设计是和完全随机7块叶光盘(Ø= 1.5厘米)/混合基因型。因此,总共有28个光盘/混合使用。对于每一个杂交的后代,叶光盘获得稍木质化的嫩叶(2.5 - 3个月)。叶圆盘被放置在托盘和pre-incubated 24小时25±1°C在接种之前在黑暗中。24小时后,叶光盘被沉淀接种10μL (3×10⁵游动孢子/毫升)的延长悬架两侧的每片叶子在黑暗中阀瓣和孵化(25±1°C)。评分(从0:宽容5:高度敏感)的易感性(通过坏死大小)的每片叶子光盘(每个混合)已经登记在4日,5日,6日,7日,接种后8天。

接种整个叶黄酮池的分析

整个叶子从E9(2.5 - 3个月),E13 E32混合基因型不同的疾病评分(易感性)是收获的清晨。收获后,叶子用自来水和蒸馏消毒清水先后pre-incubation前24小时在黑暗中(25±1°C)在托盘上。每个混合后24小时(基因型)的叶子被分为三组:健康(治疗)树叶,树叶+受伤感染,受伤。受伤+感病叶片与菌丝体接种盘(Ø= 0.5厘米)从5-days-old文化。未经处理的和受伤的叶组织收到了盘(Ø= 0.5厘米)的琼脂没有菌丝体。树叶的三组的三个混合基因型在黑暗培养3天25±1°C。孵化后,叶子冻干和用于黄酮的分析。

黄酮的提取和分析

黄酮的提取和分析被进行三组的叶子(未经治疗,受伤和受伤+感染)收获从三个t .可可混合基因型(E9、E13和E32)易感性的差异(p . megakarya疾病分数)。E9(疾病得分= 0)是宽容的混合基因型、E13(疾病得分= 2.6)中度敏感混合基因型和E32(疾病得分= 4.8)最敏感混合基因型。

化学物质

毛地黄黄酮6-C-glucoside (isorientin)和apigenin-6-C-glucoside (isovitexin)从LGC购买标准。甲醇和甲酸从默克公司获得。高效液相色谱级的所有溶剂,Milli-Q质量的水。

提取制备

冻干t .可可叶在磨床和粉末(60毫克)被放置在离心管。每个管,1毫升的甲醇添加和样本用30分钟。样本离心机(3000 rpm, 15分钟)和明确的上层清液收集。提取过程是重复用一个新的溶剂(1毫升)的一部分。从两个重复拔牙是浮在表面的结合给2毫升的最终提取。

LC-DAD-ESI-MS分析

methanolic叶提取物的酚类化合物的特征使用安捷伦1200系列高效液相色谱系统和爸爸探测器和ESI接口和质谱(MS)(安捷伦6130四极LC / MS)。色谱分离进行了使用Phenomenex Kinetex XB-C18 100列(150×4.6毫米,5μm粒子大小)。解决植物化学物质进行了用流动相组成的0.1%的甲酸水(溶剂)和0.1%的甲酸甲醇溶剂(B)在0.8毫升/分钟的流量;10μL注入体积的样品。使用的洗脱梯度剖面在15分钟30 - 50% B, B 50 - 100%在5分钟10分钟100% B列被允许注射5分钟之间的平衡流动相的初始浓度。吸光度光谱被记录在190年和700海里每2 s的带宽4海里,而色谱监测在270和335海里。女士参数如下:毛细管电压3000 V;fragmentor, 120 V;干燥气体温度、350°C;气体流量(N2), 12 L / min; nebulizer pressure, 35 psig. The instrument was operated both in positive and negative ion modes, scanning from m/z 100 to 1000. Individual phenolic compounds were identified by comparing their retention times with those for standards or on the basis of available literature data and UV and mass spectra. Since reference compounds were not available for most of the detected phenolics, luteolin glycosides were quantified as isoorientin and apigenin glycosides as isovitexin (at 335 nm). Total and individual flavones contents are expressed in mg per gram of dry weight of cocoa leaves (mg/g of dw).

数据分析

数据表示为平均值±标准偏差(SD)至少有三个独立的实验。所有的使用SPSS 20.0软件进行统计分析(IL SPSS, Inc .,芝加哥,美国)。单向方差分析(方差分析)与Student-Newman-Keuls测试是用来比较的差异意味着当重要的F值观察p < 0.05。

结果

叶瓣测试的后代一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143

疾病的分析分数从0(宽容)到5(高敏感)的后代一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143显示7天的叶光盘孵化最好歧视混合基因型比其他日期(4日,5日,6日和8天)。在这个日期,13子组的混合基因型得到使用学生纽曼和Keuls测试为5%。后代的疾病分数介于0 (E9, J5和C31) 4.8±0.07 (E32)。观察中间疾病评分与E13 (2.6±0.1)。大约79.17%的后代比最敏感的父母不敏感(UPA143)。大约62.5%的后代比疾病平均得分(2.05)宽容的父母(一个¢™€SNK64和一个¢™‚UPA143)。此外,20.83%的后代表现出疾病的分数低于父(SNK64)越敏感。此外,我们观察到12.5%的后代疾病得分低于最宽容的基因型(SCA6)报告(表1)。

黄酮的分析

总黄酮含量

总黄酮含量在未经处理的(U),估计受伤(W), +受伤感染(W + I)叶三种混合基因型(E9、E13和E32)的t .可可。

E9,显著降低总黄酮含量时观察到的未经处理的叶片受伤。受伤的叶含铅的感染显著增加黄酮总内容在这个混合基因型(E9)。在E13之间总黄酮含量没有显著差异治疗,留下受伤。然而,感染受伤的叶子E13展出总黄酮含量明显低于未经处理的,叶子受伤。模式类似于E13 E32黄酮总显示内容。

在未经处理的叶子,黄酮的含量最高是E9观察。但是,黄酮含量没有显著区别E13和E32未经处理的树叶。受伤后,总在E9黄酮含量显著减少(减少易感基因型),而在E13和E32(最易感基因型)黄酮中的内容保持准恒定。在受伤和被感染的叶子,黄酮含量显著减少总从E9 E13和E32 (图1)。

对比治疗的个体黄酮概要文件为每个t .可可混合基因型检测

总共有13个黄酮治疗中发现,受伤和受伤+感病叶片的三个t .可可混合基因型(E9、E13和E32)测试。对于每一个混合基因型,个人的内容黄酮在未经处理的监控(U)受伤(W), +受伤感染(W + I)树叶。

混合基因型E9

在未经处理的树叶,最丰富的黄酮apigenin-pentosyl-hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.7)_Risovitexin (t = 10.9)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)。伤口是相关内容的显著减少个人黄酮。黄酮如apigenin-pentosyl-dehexoside (t_R= 10.7)存在于健康的叶子没有受伤的叶子。当受伤离开被感染,显著增加个人的黄酮。Isoorientin (t_R= 12)在未经处理的,叶子出现受伤缺席时受伤的叶子被感染。毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_R= 12.5)没有受伤的叶子重新出现的感染。感染似乎引起附加在这个混合基因型(黄酮的合成图2)。

混合基因型E13

Apigenin-hexoside (t_Rapigenin-hexoside (t = 10.1)_Risovitexin (t = 11.6)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)是最丰富的黄酮在基因型E13未经处理的树叶。伤口没有显著影响个体黄酮的内容除了芹黄素rutinoside ism (t_R= 14.8),内容与伤口显著增加。当叶子受伤感染,有明显降低apigenin-diglucoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 10.1)_Rapigenin-hexoside (t = 10.9)_R= 11.6),毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risovitexin (t = 12.5)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)。此外,apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)和木樨草素rutinoside异构体(t_R= 12.5)与感染消失了。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7),在未经处理的,叶子受伤缺席,感应感染;虽然isoorientin (t_R= 12.0)依然缺席E13 (图3)。

混合基因型E32

Apigenin-hexoside (t_Rapigenin-hexoside (t = 10.1)_R= 11.6)和isovitexin (t_R= 14.4)是最丰富的黄酮E32基因型。与E13一样,伤口没有显著改变个体黄酮的含量。但当受伤的叶子被感染,apigenin-diglucoside (t的单独的内容_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 10.1)_Rapigenin-hexoside (t = 10.9)_Risoorientin (t = 11.6)_Risovitexin (t = 12.0)_R= 14.4),芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)和apigenin-glucoronide (t_R= 15.3)显著降低。与E13 apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)在未经处理的,叶子是受伤缺席引起感染;虽然isoorientin (t_R= 12.0)依然缺席(图4)。

比较三种混合基因型之间的个体黄酮简介为每个治疗

未经处理的树叶

在未经处理的树叶的三个基因型(E9 E13和E3)测试,13个人保留时间(t黄酮歧视_R)发现:apigenin-diglucoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-hexoside (t = 8.7)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 10.1)_Rapigenin-pentosylhexoside (t = 10.7)_Rapigenin-hexoside (t = 10.9)_Risoorientin (t = 11.6)_R= 12.0),毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risovitexin (t = 12.5)_R= 14.4),芹黄素rutinoside异构体(t_Rapigenin-glucoronide (t = 14.8)_R= 15.3)。黄酮是变量的分布的13个家庭(数量和浓度)的三个基因型(图5)。

黄酮含量的比较这三个t .可可混合基因型表明,apigenin-di葡萄糖苷(t_R= 6.4)出现在三个基因型:E9(0.485±0.033毫克/克dw)、E13 dw(0.386±0.025毫克/克)和E32(0.380±0.024毫克/克dw)。次生代谢物的含量显著减少E9基因型(宽容)E13和E32(易感基因型)。看来,这群黄酮含量降低而基因型的易感性增加。Apigenin-glucoronide (t_R= 15.3)显示一个模式类似于apigenin-diglucoside (t_R= 6.4)之间E9、E13 E32。毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_R= 12.5)中发现E9 dw(0.061±0.004毫克/克)和E13(0.018±0.003毫克/克dw)没有在E32(最易感基因型检测)。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)中观察到的E9(0.027±0.008毫克/克dw)没有E13 E32。相对地apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)模式,isoorientin似乎是特定于最易感基因型,E32 (图6)。

相对地提出了一个通用的先前提到的黄酮减少模式的内容少敏感(E9)最敏感(E32) apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)显示模式从E9 E32显著增加内容。此外,单独的内容价值在一个给定的基因型没有明显不同。这似乎表明两种黄酮含量之间的正相关给定t .可可混合基因型(图7)。

Apigenin-pentosyl-hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_R= 8.7),apigeninpentosyl hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 10.7)_R= 10.9)和芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)提出了减少从E9 E32模式。内容在apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 7.8)显著低E13 dw(0.391±0.030毫克/克)和E32(0.166±0.012毫克/克dw)相比E9(1.275±0.100毫克/克dw)。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_R= 8.7)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)提供了一个模式类似于apigenin-pentosylhexoside (t_R= 7.8)。即黄酮含量相当高的E9和显著低E13 E32。此外,这些前面提到的黄酮的内容似乎明显高宽容的基因型(E9)和低敏感基因型(E13和E32);E32最敏感混合基因型(E9不敏感),黑色的圆荚体疾病。芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)显示一个准线性模式(-0.7245 y = x + 2.7173 R²= 0.9984) E9 E32。Isovitexin (t_R= 14.4)显著高E32(2.268±0.123毫克/克dw)相比E9 dw(1.654±0.111毫克/克)和E13(1.213±0.072毫克/克dw) (图5和图8所示)。

受伤的叶子

在受伤的叶子,没有一个基因型有13个黄酮。在13个黄酮检测,isoorientin (t_R= 12.0)是唯一缺席的黄酮在E9和E13(但在E32)。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)出现在E9 E13和E32缺席。毛地黄黄酮rutinoside异构体在E9和E13不在E32 (图9)。

个人黄酮的内容(如函数的混合基因型对桶)显示变量的模式。Apigenin-diglucoside (t_R= 6.4)提供了一个相反的形状比未经处理的树叶。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)似乎没有受伤留下的三个基因型(黄酮只是出现在E9在未经处理的树叶)。Isoorientin (t_R= 12.0)也有类似的形状,在未经处理的树叶。毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_R= 12.5)和apigeninglucoronide t_R= 15.3)有类似形状E13内容(峰值)受伤的树叶(图10)。在未经处理的树叶,他们提出了一个减少从E9 E32形状。

与未经处理的树叶一样,apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)呈现正相关,增加从E9 E32在受伤的叶子形状(图11)。

在受伤的叶子,apigenin-pentosyl-hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.7)_R= 10.7),apigenin-and pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)守恒的形状类似的减少(从宽容到易感基因型)中观察到的未经处理的树叶(图12)。

受伤和被感染的叶子

在受伤和感染(W + I)树叶,apigenin-pentosyl-hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_R= 8.1),apigeninpentosyl hexoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.7)_Risovitexin (t = 10.9)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R高= 14.8)是最宽容的基因型相比E9的易感基因型E13 E32。同时,apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)明显高于在E13比E9 E32。Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)目前在E9 E13和E32缺席。此外,apigenin-glucoronide (t_R= 15.3)没有在最易感基因型(E32)存在于E13和E9 (图13)。

个人黄酮含量的分析函数的混合基因型对桶表明apigenindiglucoside (t_R= 6.4),减少形状(从E9 E32)而不是增加形状观察到受伤的叶子。Apigeninhexoside (t_R= 10.7),没有受伤的叶子,重新出现在受伤+感染树叶。E13基因型apigenin-hexoside最高的内容(t_R= 10.7)E32和E9紧随其后。Apigenin-glucuronide (t_R= 15.3)提出了一个类似的形状-hexoside (t_R= 10.7)在受伤+感染树叶。Isoorientin (t_R= 12.0)和木樨草素rutinoside异构体(t_R= 12.5)似乎相关易感混合基因型E9减少受伤+感病叶片(图14)。

在受伤+感染(W + I)树叶,apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)守恒的相似和增加相关模式(从E9 E32)与未经治疗的观察,叶子受伤。在t .可可叶黄酮的含量高(如果不治疗,受伤或受伤+感染)似乎是同义词的t .可可混合基因型对p megakarya (图15)。

在受伤+感染叶,Apigenin-pentosyl-hexoside (t_RApigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_RApigenin-pentosylhexoside (t = 8.1)_R= 8.7)和Apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9),提出了减少模式(从E9 E32)与未经治疗的观察,叶子受伤。这些黄酮含量的降低可以减少公差相关的t . p . megakarya可可混合基因型(图16)。

讨论

发展中t .可可基因型耐药/宽容黑色豆荚疾病(桶)是可持续可可文化。这可以通过目标亲本基因型的异花受精和早期选择后代的性状使用可靠的测试和标记的宽容。不幸的是,许多未经考验的异花受精(比如¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143)。发达在喀麦隆,SNK64报道有一个最宽容的克隆桶,但效率低。相对地,UPA143生产但敏感桶(17]。我们研究了对桶的t .可可后代(从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143)使用树叶盘测试的适应方法(12]。混合基因型是通过监测疾病的易感性的分数。因此,一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143后代表现出疾病分数在0到4.8之间虽然父母克隆的一个¢™€SNK64和一个¢™‚UPA143显示疾病得分分别为0.3和3.8。混合基因型与疾病的存在分数较低的3.8 t .可可可能表明,宽容的桶是一种添加剂特性(2,3]。此外,数据分析的叶瓣测试了13疾病表型组得分的混合基因型(从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143)。这种异质性疾病的分数可能会证实这一事实宽容桶疾病在t .可可multigenic层层叠加的字符和基因型杂合子是用于这个角色(18]。然而,很高比例的混合基因型从¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143敏感桶而最敏感的父母(UPA143)。此外,大多数混合基因型呈现一种疾病得分低于父母双方的平均得分疾病(一个¢™€SNK64和一个¢™‚UPA143)。混合基因型表现出疾病的一个重要的比例分数低于最好的父母(SNK64)或克隆(SCA6)的引用。这些结果表明,cross-fertilizationA¢A™€SNK64×一个¢™‚UPA143可以用来开发t .可可混合基因型或宽容或少容易桶。

在生物或非生物胁迫植物的动员防御机制取消或减少压力的发病率。植物防御机制包括各种生物分子。有效的分子在植物防御称为国防制造商。黄酮是一群植物中类黄酮代谢产物的各种生物功能(19]。

相对,不知道黄酮和黄酮的家庭t .可可防御megakarya页。植物黄酮是次生代谢产物,包括几类结构多样的天然产物生物起源于shikimate-phenylpropanoids-flavonoids通路。植物需要黄酮抗病原体和其他生物功能。因此,黄酮代表适应性特征。植物黄酮的合成更大的数组,因为他们不能依赖物质流动性逃避捕食者(病原体),因此发展这样的化学防御捕食者(20.]。

在这个调查中,我们分析了黄酮池在健康(治疗),受伤和受伤+从年轻的植株感病叶片(上面的后代)在其他升值的潜在使用标记的早期选择t .可可基因型耐药/宽容的桶。

从数据疾病的分数,E9(不敏感),E13(中度敏感)和E32(最高(敏感)混合基因型用于叶黄酮分析(未经治疗,受伤和受伤+感染)。

从三个混合基因型在未经处理的树叶,似乎,总黄酮含量高的宽容的基因型(E9)混合基因型E32比较敏感。在受伤的叶子,黄酮更丰富敏感的混合比中间的敏感(E13)和更丰富的宽容,E9。相对地,在树木繁茂的和被感染的条件下,黄酮更丰富的E9 E32然后从E13逐渐减少。这组的结果可能表明,黄酮简介池在健康、非生物和生物强调t .可可叶不能匹敌的。因此,黄酮可能动员在t .可可根据给定的状态(健康、受伤或感染)。事实上,黄酮是类黄酮的子组,属于植物抗毒素,低分子量抗菌化合物的动员下,植物响应非生物或生物压力(21]。

在感染期间,宽容的混合基因型(E9)显示黄酮含量最高,这可能是宽容的骨干/桶阻力。因此,减少总黄酮含量敏感混合动力车在感染可能对桶的有关基因型。这个发现可能确认影响黄酮在植物防御病原体(卵菌纲)如p . megakarya [16,22]。

随后,黄酮含量,我们调查资料的个人黄酮(在不同的树叶的律例)了解t .如果所有的黄酮可可叶相关电阻/公差混合基因型桶(这是一个悬而未决的问题)。

在t .可可混合测试,大多数黄酮不同概要文件显示离开状态和混合基因型。在最高和中度敏感混合基因型(分别E32和E13),相关的感染减少黄酮:apigenindiglucoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-hexoside (t = 7.8)_Risovitexin (t = 11.6)_R= 14.4),芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)。此外,有失踪isoorientin (t_R= 12.0),但光感应apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.7)E13由于感染。,在宽容的混合基因型E9,感染铅显著增加apigenindiglucoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.7)_Risovitexin (t = 10.9)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R= 14.8)和apigenin-glucoronide (t_R= 15.3)。这一发现揭示了微分黄酮混合基因型桶池之间的宽容和敏感。这可能强调这一事实,在感染期间,生产和足够的池(定性和定量)这些黄酮带来宽容桶不敏感的混合基因型。事实上,据报道,类黄酮(包括黄酮)的摘要效果取决于它们的结构(23]。

个人黄酮家庭档案和灵敏度的分析这三个混合动力车(E9、E13和E32),显示的内容减少模式apigenin-diglucoside (t_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 6.4)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 7.8)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.1)_Rapigenin-pentosyl-hexoside (t = 8.7)_Risoorientin (t = 10.9)_R= 12.0),毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risovitexin (t = 12.5)_R= 14.4)和芹黄素rutinoside异构体(t_R从E9 = 14.8), E13 E32。贝利斯等植物perennis L。,Adinandra nitida and Portulaca oleracea L. Nayaka et al. [23和V et al。24报道芹黄素的抗菌性能。在交互影响炭疽菌sublineolum /高粱,尼科尔森和哈默施密特21]报道中木樨草素的积累高粱抗比敏感品种。

这些作者表明,毛地黄黄酮以及芹黄素能够抑制孢子萌发的Sublineolum。看来,这些黄酮可能使用耐药机制指特征抑制或限制攻击的p . megakarya可可。或者,上面的黄酮也可以使用宽容策略减少或抵消影响t .可可健身通过调节其生理缓冲的效果疾病(18]。一方面,这些抵抗策略,可能包括物理和/或化学屏障,机制,快速明确的感染和过程,限制损害的传播在t .可可(如局部细胞死亡)。在另一方面,公差通常涉及某种程度的疾病损害赔偿。因此,t .可可可能容忍感染由于桶通过增加叶子中的叶绿素浓度,延缓衰老受感染的组织,和增加营养吸收24]。

这可能表明,上述提及黄酮可以视为标记公差在t .可可桶。这些黄酮组的刺激可以是由于激活茉莉酸途径的开发过程中不同的反应对p . megakarya可可(25]。事实上,在高粱抗炭疽病,尼科尔森和哈默施密特21)确定木樨草素和芹黄素黄酮类植物抗毒素。此外,在感染状况,毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risoorientin (t = 12.5)_R= 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)似乎是在宽容的混合基因型(E9),但完全没有适度(E13)和高混合基因型(E32)敏感。在亚麻属植物保护作用对病原体isoorientin usitatissimum报道(26]。Antipathogenic毛地黄黄酮的性质rutinoside异构体(t_Risoorientin (t = 12.5)_R= 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)可能的结果,在某种程度上,类黄酮的抗氧化性能。他们可能淬火ROS(活性氧)生成的病原体和植物由于感染(26]。他们也可能直接参与抑制病原体的酶,尤其是消化植物细胞壁,通过螯合金属所需的活动。这些小的次生代谢产物也可能抑制孢子发育和菌丝体菌丝伸长(26]。Makoi和Ndakidemi27)表明,类黄酮抑制根病原体,尤其是真菌。一般来说,异黄酮,黄烷和黄烷酮类被承认为有效的抗菌药物27]。

Antipathogenic毛地黄黄酮的性质rutinoside异构体(t_Risoorientin (t = 12.5)_R= 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)可以宽容t .可可混合基因型在感染的特征。相对地高含量apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)似乎对桶的特点。其内容增加从E9 E13 E32未经治疗,受伤和受伤+从年轻的t .可可混合基因型植株感病叶片。

结论

异花受精的一个¢™€SNK64和一个¢™‚UPA143生成一个重要比例的混合基因型宽容或少容易桶。在桶感染,t .可可混合基因型动员黄酮的敏感性取决于混合基因型。在感染期间,毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risoorientin (t = 12.5)_R= 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)似乎是宽容的混合基因型(E9)的特征。高池apigenin-hexoside (t_R= 10.1)和apigenin-hexoside (t_R= 11.6)似乎易感性混合基因型的特征。因此,一个¢™€SNK64×一个¢™‚UPA143可以用来产生宽容的混合基因型。毛地黄黄酮rutinoside异构体(t_Risoorientin (t = 12.5)_R= 12.0)和apigenin-pentosyl-hexoside (t_R= 10.9)是有用的宽容在p . megakarya可可。这些黄酮也可能是有用的在标记辅助选择t .可可。

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