力退化对替米沙坦和氢氯噻嗪的研究和开发验证稳定性指示方法。

Moin Shakeb^1*,某人Puranik²和偶像Sreenivasa³

¹研究学者,研究指南Bundelkhand大学佳斯、中央邦、印度

²研究学者,研究指南Bundelkhand大学佳斯、中央邦、印度

³c . n . Rao教授先进材料中心化学系,Tumkur大学Tumkur 103年- 572年,印度卡纳塔克邦

*通讯作者:: Moin Shakeb
研究学者,研究指南Bundelkhand大学佳斯、中央邦、印度

收到日期:09/08/2014;接受日期:17/09/2014;发表日期:22/09/2014

文摘

替米沙坦和氢氯噻嗪受到不同我规定压力条件下酸性、碱性、氧化、还原、照片、热稳定性条件和发现退化的峰值不干扰下药物研究的高峰。稳定显示开发的高效液相色谱法(HPLC)分析药物的降解产物的存在使C-18 G列250 x 4.6毫米,5μm。20μl注入体积和组成的流动相乙腈:磷酸二氢钾(pH3.5)的比率60:40v / v泵通过列在权力平等主义的模式在1.0毫升/分钟的流量。检测是在282海里。方法验证了线性、范围、精度、准确性、特异性、选择性和中间的精度。

关键字

高效液相色谱法、替米沙坦氢氯噻嗪、强迫降解研究

介绍

父药物稳定性试验指导原则Q1QA (R2)发行的国际协调会议(我)1]表明,应力的研究应该进行药物建立其固有稳定性特征,导致降解产物的识别,因此,支持提出的分析方法的适用性。它还要求稳定性样品的分析测试过程应该是稳定指示,他们应该完全验证。

因此,本研究的目的是建立固有稳定性的替米沙坦和氢氯噻嗪通过压力研究在各种各样的我推荐的测试条件下(2)和开发稳定性指示分析。

药物简介(3 - 6)

材料与方法[7 - 9]

稳定显示同步估计的高效液相色谱方法替米沙坦和氢氯噻嗪的开发和验证。化学物质是乙腈,高效液相色谱级采购(Sd Fine-Chem有限公司),甲醇,高效液相色谱级(Sd Fine-Chem有限公司)、磷酸二氢钾(热费希尔科学印度分公司,孟买),微孔水,替米沙坦(杂制药),氢氯噻嗪(Aurobindo制药公司)和Telma - H平板电脑是由Glenmark制药有限公司Baddi,印度,从当地市场购买。

退化的研究(9 - 12)

所有压力分解研究进行的初始药物浓度1毫克/毫升在乙腈:磷酸氢二钾(pH3.5) 60:40v / v的比率。

降解研究替米沙坦和氢氯噻嗪在酸性条件

替米沙坦和氢氯噻嗪受到强制降解酸性介质中存在0.1 n盐酸和加热60°C一段4小时。在不同时间间隔的示例整除撤回在2和4小时,然后用2毫升0.1 n氢氧化钠中和。2毫升每个生成的解决方案(100μg /毫升)和混合在一个单独的瓶。20μl退化的解决方案被注入色谱仪的控制。峰面积和色谱获得替米沙坦,氢氯噻嗪和退化的产品记录。

降解研究替米沙坦和氢氯噻嗪在碱性条件

替米沙坦和氢氯噻嗪受到强制降解碱性介质中存在0.1 n氢氧化钠和加热60°C一段4小时。在不同时间间隔的示例整除撤回在2和4小时,然后中和2毫升盐酸0.1 n。20μl退化的解决方案被注入色谱仪的控制。峰面积和色谱获得替米沙坦,氢氯噻嗪和退化的产品记录。

替米沙坦和氢氯噻嗪的氧化降解研究条件

替米沙坦和氢氯噻嗪受到力退化3% v / v的过氧化氢(氧化介质)。接受的解决方案是注射没有热量(0,2和4人力资源,才发现退化。进一步去加热60°C一段4小时。在不同的时间间隔样品整除撤回在2和4人力资源。2毫升每个生成的解决方案(100μg /毫升)和混合在一个单独的瓶。20μl退化的解决方案被注入色谱仪的控制。峰面积和色谱获得替米沙坦,氢氯噻嗪和退化的产品记录。

替米沙坦和氢氯噻嗪的热降解研究条件

热降解研究标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪在干燥热风烤箱60°C 2天通过公开的标准药物1毫米厚度在培养皿中。20μl退化的解决方案被注入色谱仪的控制。峰面积和色谱获得替米沙坦,氢氯噻嗪和退化的产品记录。

降解研究替米沙坦和氢氯噻嗪的照片稳定条件(紫外线)

照片稳定退化研究标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪进行了稳定腔通过公开照片紫外线在培养皿中(1毫米厚度)。在不同时间间隔24小时和48小时,20μl退化的解决方案被注入色谱仪的控制。峰面积和色谱获得替米沙坦,氢氯噻嗪和退化的产品记录。

分离的研究

高效液相色谱法研究进行了首先反应在单独的解决方案,这些解决方案的混合分解观察。分离是通过权力平等主义的洗脱使用仪表系统,日本岛津公司uflc - 2000 Prominance LC-20AD SPDM 20一个二进制梯度系统启用C-18克列250×4.6毫米,5μm,探测器是PDA检测波长282 nm,组成的流动相乙腈:磷酸二氢钾(pH3.5)的比率60:40v / v 1.0毫升/分钟的流量。

方法的验证

线性和范围

股票的解决方案的药物准备在1毫克/毫升的力量。这是包含稀释获得一个解决方案。体积与流动相组成,浓度从4—μg /毫升。我一式三份注入高效液相色谱检测解决方案列,保持注入体积不变(20μl)。

精度

准确性是评价强化退化的混合解决方案有三个已知的药物浓度。经济复苏添加药物的决心。精度是决定通过恢复研究的药物标准药物在三个不同的水平80%,飙升100%,120%的化验样本已知的浓度。

精度

注射6次,三个不同的浓度在同一天注射和相对标准偏差(RSD)的值计算当天确定精度。这些研究也反复在不同的日子来确定inter-day精度。

系统精度

系统精度检查通过使用标准物质,以确保分析系统的正常运行。六峰面积决定测量和%相对标准偏差。

方法精度(重复性)

方法精度表示方法是否给单个批处理一致的结果,通常应用于标准化methodology.的

中间精密度(强度)

中间精密度表达变化不同的日子和不同的分析师。中间精密度方法不同的日子像国米天(天)之间和盘中(一天都会冷不防地)确定。

特异性

特异性是明确的能力评估,分析物的组件可能会出现;通常,这些可能包括杂质、降解产物和矩阵组件。

结果与讨论

高效液相色谱法研究替米沙坦和氢氯噻嗪在不同压力条件下提出以下退化行为:

验证开发stability-indicating方法(13 - 15)

精度

精度决定通过恢复研究药物的飙升的标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪在三个不同的水平80%,100%和120%,此前化验样本已知的固定浓度。

恢复被发现98.81%到102.75%的比例对替米沙坦和氢氯噻嗪99.83%到103.85%表示没有辅料的干扰在发达高效液相色谱法测定替米沙坦和氢氯噻嗪,复苏比例总协议中95 - 105%的验收标准。

精度

方法和系统的精度是决定研究数据的一致性之间的一系列的测量。

在系统精度%峰面积的相对标准偏差值被发现为替米沙坦和氢氯噻嗪为0.461% 0.340%。

在方法精度%峰面积的相对标准偏差值被发现为替米沙坦和氢氯噻嗪为0.607% 0.388%。

中间方法的精度取决于执行分析在两个不同的日子(国米,盘中)检查再现性。在盘中%峰面积的相对标准偏差值被发现为替米沙坦和氢氯噻嗪为0.306% 1.17%。%国米天峰面积的相对标准偏差值被发现0.17%为替米沙坦和氢氯噻嗪为0.527%。

的所有值% RSD为精密研究获得在NMT 2%的验收标准。因此该方法被发现提供高度的准确性和重现性。

特异性

该方法的特异性是由辅料的影响,研究杂质的保留时间等替米沙坦和氢氯噻嗪。因此没有干扰稀释剂、赋形剂和杂质峰的替米沙坦和氢氯噻嗪,表示高度的特异性方法。

LOD和定量限

LOD和可视化方法是确定定量限。LOD决心找出最低数量的替米沙坦和氢氯噻嗪能被探测到,它被发现分别0.99 ng / mL和1.55 ng / mL。决心找到最低定量限的替米沙坦和氢氯噻嗪,可量化,它被发现3 ng / mL, 4.7 ng / mL替米沙坦和氢氯噻嗪分别表明小浓度在微克水平可以确定可接受的准确度和精密度。

线性和范围

药物通过该方法的线性决心研究引起的能力测试结果直接与样品中分析物的浓度成正比。

浓度范围的标准解决方案4 - 20μg /毫升的替米沙坦和氢氯噻嗪的流动相乙腈:磷酸氢二钾(pH值:3.0)的比例比例流量1.0 mL / min, PDA检测在波长282纳米的注入色谱仪。从山顶地区获得标准的校准曲线。

该方法是发现线性浓度范围的4—μg /毫升分别替米沙坦和氢氯噻嗪。曲线配件被发现99.9%为替米沙坦和氢氯噻嗪为99.8%。

鲁棒性

方法的鲁棒性是由执行执行故意改变后的分析,流量和波长的变化。

流量略改变从1.0毫升/分钟到0.8毫升/分钟和1.2毫升/分钟的%化验替米沙坦和氢氯噻嗪是100.19%,101.45%,分别为101.54%和101.98%。

波长是故意改变了从282纳米到280纳米,284 nm %试验对替米沙坦和氢氯噻嗪被发现的范围从101.06%,分别为100.56%和100.07%,100.55%。

所有的健壮性结果表明,开发的新方法是健壮和变化不显著故意流动相流速和波长的变化表明缺乏对测试结果的影响该方法操作变量。

在酸性条件下的标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪被发现6.24%和8.98%退化4小时60°C的热量。

在碱性条件下的标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪被发现11.69%和4.39%退化4小时60°C的热量。

在氧化条件下的标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪被发现14.51%和36.13%退化4小时60°C的热量。

在热的研究标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪是14.9%和14.21%退化为48小时60°C。

在照片稳定研究标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪是退化的48小时14.77%和13.48%。

从退化的研究数据,发现替米沙坦和氢氯噻嗪被发现在所有压力条件下退化。

替米沙坦和氢氯噻嗪为4小时被发现Non-degraded菌数和在加热条件下被发现退化为4小时。

因此压力测试应给予药物和量化的重要性等组合降解产品的药物帮助我们维护质量、安全性和疗效的药物配方。在酸性条件下的标准药物替米沙坦和氢氯噻嗪被发现6.24%和8.98%退化4小时60°C的热量。