ISSN: 2322 - 0066
1Maliankara Sree Narayana Mangalam学院Ernakulam,喀拉拉邦
收到:12/09/2015接受:16/12/2015发表:21/12/2015
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methanolic提取石榴水果皮具有体外抗氧化和抗炎活动意义。所需的浓度50%抑制超氧化物自由基,氢氧自由基生成,一氧化氮自由基的形成和脂质过氧化作用分别为183.3,94.0,53.0和88.5μg ml-1分别。提取物的抗炎活性是评价在卡拉胶,BSA(牛血清白蛋白)和葡聚糖诱导急性和福尔马林诱导慢性炎症在balb / c小鼠模型。提取显示显著的抗炎活性与对照组的模型。
石榴、水果皮、抗氧化、抗炎
炎症是直接防御机制或受伤的反应,这可能是由于感染、化学或物理因素(1]。它包括疼痛,红肿和热肿胀影响和损失函数的部分。在某些情况下,炎症可能导致慢性炎症等疾病的发展类风湿性关节炎炎症性肠病,牛皮癣等活性氧(ROS)和自由基被认为直接作用细胞信使,引起炎症反应。活性氧和自由基也激活一系列的酶系统包括蛋白激酶、蛋白质磷酸酶、转录因子和热休克蛋白,增加炎症的扩展。补充的无毒的抗氧化剂在这些条件可能有保护作用。从远古时代药用植物已经被证明是强大的治疗药物治疗癌症、溃疡、炎症等。大约60%的世界人口几乎完全依赖植物药(2)和一些药用植物已被证明是有用的治疗药物,其他几个工厂还在等待发现。
石榴l .(石榴科)通常被称为“石榴”是一棵小树在欧洲药用,毛里塔尼亚,印度支那,西印度群岛,属圭亚那、巴西和团聚和南非(3]。这种植物在民间医学用于治疗各种疾病如肝损伤,蛇咬、溃疡、关节炎等(4]。这种植物还显示了一个有效的在活的有机体内抗氧化剂和gastro-protective活动对阿司匹林和乙醇诱发胃溃疡模型(5]。本研究旨在调查自由基清除和抗炎(急性和慢性模型)的活动methanolic提取的p . granatum水果皮。
植物材料和药物准备:p . granatum水果是从场景在当地采购,喀拉拉邦。水果皮风干和粉状材料提取70%甲醇为24小时在室温下搅拌。提取是过滤、浓缩和蒸发干燥。干提取是悬浮在蒸馏水和用于进一步的研究。
动物:的在活的有机体内水果皮的抗炎作用p . granatum评估使用Balb / c小鼠(22日至26日克体重)提供的小动物育种站喀拉拉邦的农业大学,Mannuthy,场景,喀拉拉邦。通风的笼子里的动物分组和保持在22 - 280 c, 60 - 70%的相对湿度和12小时光明与黑暗周期。标准的动物喂养老鼠食物(立顿、印度)和水随意。
在体外抗氧化活动
超氧化物自由基清除活动:对超氧化物自由基的影响生产检查使用氮蓝四唑(电视台)还原法6]。反应混合物中含有:EDTA(6毫米;3毫克NaCN)、核黄素(2毫米),电视台(50毫米)植物提取物(从1到100μg毫升1)和磷酸盐缓冲剂(67 mm, pH = 7.8)在最后一卷3毫升。管是均匀照明白炽灯15分钟,光密度测量在530 nm之前和之后的照明。
氢氧自由基清除活动:氢氧自由基清除测量通过研究脱氧核糖和测试之间的竞争铁产生的羟基自由基的化合物3 +/抗坏血酸盐/ EDTA / H2O2系统。反应混合物中含有:脱氧核糖(2.8毫米),FeCl3(0.1毫米),EDTA(0.1毫米),H2O2(1毫米),抗坏血酸盐(0.1毫米),KH2阿宝4 -- KOH缓冲区(20毫米,pH = 7.4)和提取(从1到100μg毫升1)在最后一卷1毫升。孵化后1小时在370 c,脱氧核糖退化的方法测量Ohkawa et al。7]。
一氧化氮自由基抑制活动:一氧化氮生成硝普酸钠在生理溶液pH值,与氧产生亚硝酸盐离子测量的格里斯反应(8,9]。反应混合物(3毫升)含有硝普酸钠(10毫米)在磷酸缓冲盐(PBS)和复合(从1到100μg毫升1在250 c 150分钟)孵化。孵化后,0.5毫升的反应混合物被移除和0.5毫升的格里斯试剂(1%对氨基苯磺酰胺,2% H3阿宝4和0.1%二氯萘乙二胺)补充道。吸光度的色素细胞形成了546海里。
抑制脂质过氧化物的形成(感应价/抗坏血酸盐系统):反应混合物大鼠肝匀浆(0.1毫升,25% w / v) Tris-HCl(30毫米),硫酸亚铁铵(0.16毫米),抗坏血酸(0.06毫米)和不同浓度的化合物(从1到100μg毫升10.5毫升)在最后一卷是孵化1小时在370 c和结果硫代巴比土酸反应物质(TBARS)衡量的方法Ohkawa et al。7]。0.4毫升整除的反应混合物处理钠十二烷基硫酸盐(SDS)(0.2毫升,8.1%),硫代巴比土酸(1.5毫升,0.8%)和醋酸(1.5毫升,20%;pH = 3.5),由总卷4毫升通过添加蒸馏水,并保持在950 c水浴1小时。冷却后,蒸馏水(1毫升)和5毫升的正丁醇/吡啶15:1 (v / v)补充道。震动和离心后,有机层分离,吸光度测量在532海里。
在活的有机体内抗炎活动
急性和慢性抗炎活动评估。前者是由角叉菜胶的方法,BSA和葡聚糖诱导小鼠爪子水肿,后来被福尔马林诱导水肿在小鼠体内后爪。
急性模型:对于每个模型,动物们被分成三组,每组五个动物。在所有组中,急性炎症(卡拉胶、右旋糖酐和BSA)是引起subplantar注入0.02毫升的刚做好暂停卡拉胶15%,葡聚糖和BSA在生理盐水分别后爪的老鼠。在每个急性模型中,一组作为控制,第二组接受250毫克公斤1,第三组500毫克公斤1methanolic提取的p . granatum口服1小时前子足底注射。每个模型的爪子厚度用游标卡尺测量初始和子足底注射后三个小时。
慢性模型:动物被分成三组每组五个动物。在所有组,炎症是引起子足底注射0.02毫升的2%福尔马林在正确的后爪的老鼠。一组保持控制,而第二组接受250毫克公斤1,第三组500毫克公斤1methanolic提取口服前一小时注射福尔马林和政府的提取连续持续了6天。程度的炎症用游标卡尺测量之前和六天后福尔马林的挑战。
统计分析:数据统计分析使用学生的t检验和P值小于0.05被认为是重要的。所有数据都表示为平均数±标准差。
在体外抗氧化活动
抑制超氧化物自由基产量
methanolic提取的p . granatum水果皮扫气生成的过氧化物核黄素照片还原法。提取所需的50%的浓度(IC50)抑制超氧化物自由基被发现μg 61.1毫升1(表1)。已知的抗氧化剂如姜黄素的浓度需要同样的效果为6.5μg毫升1这表明抗氧化活性的吗p . granatum水果提取是相当有效的。
氢氧自由基抑制生产:脱氧核糖的羟基自由基降解生成的铁3 +/抗坏血酸盐/ EDTA / H2O2系统发现94μg毫升的浓度1提取需要的50%抑制而姜黄素的浓度需要同样的效果为2.8μg毫升1(表1)。
抑制一氧化氮自由基的生产:一氧化氮自由基生成硝普酸钠在生理pH值被发现methanolic提取物的抑制p . granatum水果皮。提取所需的50%的浓度被发现53μg毫升1(表1)。
抗炎活动:卡拉胶的结果,右旋糖酐、BSA和福尔马林诱导的小鼠水肿,表明酒精萃取物的抗炎活性p . granatum水果皮的(表2)。发现提取显著地抑制水肿形成剂量相关的方式。的剂量500毫克公斤1体重显示抑制作用(70.7,39.2,79.7和87.8%角叉菜胶,右旋糖酐,BSA和福尔马林诱导模型分别)水肿的形成。
本研究首次报道methanolic提取物的抗氧化和抗炎活性p . granatum水果皮。研究表明,提取可能抑制角叉菜胶,右旋糖酐、BSA和福尔马林诱导急性和慢性炎症以剂量依赖的方式。提取的管理明显下降(P < 0.05)在卡拉胶,BSA和福尔马林诱导炎症模型而提取显示,葡聚糖诱导小鼠爪子水肿影响不大(P > 0.05)。
自由基被证明参与等疾病的引发动脉粥样硬化、癌症、溃疡、炎症性疾病(10]。超氧化物自由基调节代谢产物的能力信号和沟通重要信息的细胞遗传机器。在生产超氧化物自由基发生各种慢性炎症情况下,引起药物毒素,压力、组织损伤和大量的练习。羟基自由基也参与炎症过程。氧自由基可能释放细胞外地来自白细胞在暴露于趋化因子、免疫复合物或吞噬的挑战。细胞外释放低水平的这些强大的介质可以增加趋化因子的表达(例如,引发),细胞因子和内皮细胞白细胞粘附分子,级联放大,引发炎症反应(11]。
炎症主要是由于自由基的生成。因此,政府在这些条件下的抗氧化剂可能有保护作用。大部分的抗炎药物作为抗氧化和清除自由基的生成在炎症过程。也报道,政府超氧化物歧化酶或其他拾荒者的自由基被观察到减少炎症的一些动物模型(12]。目前的研究显示,methanolic提取的p . granatum水果皮在清除超氧化物显示有效的活动,羟基和一氧化氮在体外。我们还报道,methanolic提取的管理p . granatum增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽水平阿司匹林和乙醇诱导溃疡(5]。
p . granatum据报道,包含生物碱如pelletriene pseudopelletriene和植物的植物化学的初步筛选显示类黄酮和萜烯(13]。这些化合物有几个生物属性包括通过几种机制保护作用,如抗氧化效果(13]。因此,目前的研究证实的抗炎活性p . granatum水果皮可能是由于其强大的抗氧化性能。总之,我们的研究结果提供了一些科学依据传统的使用p . granatum水果皮管理炎性疼痛。然而,进一步的实验是必要的孤立活动原则和正确理解的作用机制的化合物。