含甘蓝提取物的草本发胶的促发活性

摘要

甘蓝(Brassica oleracea)，卷心菜的名字来自法语，caboche的意思是头部，在凉爽的气候条件下生长良好。它被用于沙拉，蔬菜。在标题研究宠物。首先对马齿苋醚和水提物进行了植物成分类型的初步测试，然后对提取物进行了标记化合物的标准化。在白化病大鼠的背部皮肤上应用标准化提取物进行动物研究。采用组织形态学分析方法研究毛囊周期的诱导。采用免疫组化方法检测毛囊中β-catenin和Sonic hedgehog (Shh)蛋白的表达水平，探讨提取物对毛囊休止期向生长期转变的影响。我们观察了那只宠物。马齿苋粗提物通过诱导毛发生长期促进毛发生长。具体而言，组织形态分析数据表明，与对照组和1%米诺地尔处理组相比，凝胶形式的提取物外用诱导了早期生长，延长了成熟生长期。 Results also exposed the increase in both the numbers and size of hair follicles of the extract treated group. Moreover, the immunohistochemical analysis reveals earlier induction of β-catenin and Shh proteins in hair follicles of the extract-treated group, compared to the control or 1% minoxidil-treated group.

关键字

生长期，休止期，毛囊，头发生长。

简介

脱发是一种脱发疾病，可能发生在生命的任何阶段。具体来说，斑秃是一种导致头发自发脱落的自身免疫性疾病。它的主要特征是头皮或身体其他部位出现秃斑，最终可导致全身秃顶。毛发是一种复杂的小器官，由终末分化和死亡的角质形成细胞组成，在身体保护、感觉、体温调节和性吸引力方面发挥着多种作用。毛发生长的周期过程分为以下3个阶段:生长期(生长期)、退行期(退行期)和休止期(休止期)[1］．毛发生长周期失调已被证明与某些疾病的发病机制有关，例如雄激素性脱发。已知毛囊生长的两个关键调节因子，Sonic hedgehog (Shh)和β-catenin参与了从休止期到生长期的诱导过渡，当其中任何一种蛋白质水平较低时，毛发生长就会严重受损[7，11］．脱发或脱发患者的数量急剧增加。药物，非那雄胺和米诺地尔，已被美国食品和药物管理局批准用于治疗脱发，由于不可预测的疗效和副作用，它们的疗效是有限和短暂的。因此，迫切需要开发更多更好的治疗方案[3.，4］．

甘蓝，英文名字卷心菜来自法语caboche，意思是头，指的是它的圆形。卷心菜的种植历史超过4000年，驯化历史超过2500年。虽然卷心菜经常与爱尔兰人联系在一起，但世界上大部分地区都在使用它。卷心菜在凉爽的气候条件下生长良好，产量大，并且在冬季储存良好。据报道，马齿苋中很少有植物成分可以作为5α-还原酶抑制剂。5α-还原酶是一种将睾酮转化为二氢睾酮的酶，已被认为可在基因易感的个体中引发雄激素性脱发[10，12］．一个遗传易感的人，其毛囊持续暴露于二氢睾酮，具有较短的毛发生长期(即毛发生长期)。DHT和5α-还原酶水平的增加导致头皮皮肤秃顶。本研究旨在探讨甘蓝热水提取物对毛发生长的促进作用及其潜在机制。

材料与方法

甘蓝溶剂及水提液的制备

经鉴定的马齿苋叶片凭证标本(CabHG-492)存放在学院植物标本室。用干磨机将叶片研磨成细粉，用热水提取4次，持续4小时。然后将热水提取液冷藏，通过滤纸过滤，并使其浓缩至干燥。在室温下再次用热水提取残留物并过滤。宠物。采用索氏提取法制备醚提取物。提取液在40°C的真空下在旋转蒸发器中干燥，随后在-4°C保存直到使用。将提取物溶解在水中进行动物实验。

发胶的制备

将石油醚和水提物以4% (w/w)的浓度掺入carbopol 934凝胶基中。采用1.2%的聚合物、5%的保湿剂、2%的组合表面活性剂和1%的苯甲醇防腐剂制备发胶。

动物

雌雄Wistar白化大鼠，体重200-250克，用于动物研究。将所有动物置于室温25±3°C的笼子中，黑暗周期为12h，光照周期为12h。老鼠被随意喂食老鼠丸和水。这些实验得到了机构动物伦理委员会的批准。

初级皮肤刺激试验

使用剪毛器和电动剃须刀从大鼠背侧12平方厘米的区域去除毛发(Roy et al.， 2007)。用手术精神清洗剃须区域，在涂抹后48小时内，用浓度高达10%的石油醚和水提取物涂抹动物，没有显示出任何毒性作用。因此，所制备的提取物被认为是安全的局部应用。

体内毛发生长活性的实验研究

24只大鼠被分为4组，每组6只。所有大鼠背部3*4平方厘米的毛发均使用电动剃须刀剃除，并使用市售脱毛剂完全脱毛。第1组为对照组，应用简单凝胶基质。2 ~ 3组分别外用配制的石油醚发胶和水提物发胶。第4组用1ml 2%米诺地尔涂抹在剃须区域。所有凝胶和标准药物每天使用2次。治疗持续21天，观察毛发生长模式并制成表格(Mithal和Shah, 2000;Tortora, 1996)。第10天、第20天、第30天取皮肤活检进行卵泡观察。在0、10、15、20、25和30天记录可见的毛发生长。

头发长度测定

在治疗的测试日，用无菌镊子从剃光的大鼠背侧随机拔下再生毛发。测量头发长度，结果记录为25根头发的平均长度±SEM。

定量组织形态学研究

治疗10、20、30天后，每组各取1只。从剃光的部分获得皮肤活检，并在10%的福尔马林中保存。将组织切片植入石蜡中，切片厚度为10 μm。切片组织用苏木精和伊红染色，在显微镜下用眼测微计检查毛发的滤泡相(Sawada et al.， 1987)。根据Chase的分类，个体毛囊被限制在特定的毛发周期阶段(静止期或生长期I-VI)。计算在10天、20天和30天每个特定周期阶段的毛囊百分比。

毛囊计数

数字显微照片取自载玻片的代表性区域，固定放大倍率为100倍。所有图像都被裁剪在一个宽度为1500 um的固定区域。然后人工计数深层皮下毛囊(n = 25/鼠)。

统计数据

白化病大鼠毛发生长长度数据以均值±SEM表示。采用Student 's t检验将上述参数的值与对照组进行比较。p<0.01、p<0.05、p<0.001为组间差异有统计学意义。

结果及讨论

含宠物发胶。在动物体内实验研究中，甘蓝粗提物对毛发生长有积极的促进作用，研究结果表明，毛发凝胶对宠物有较好的促进作用。比标准对照米诺地尔提取醚。研究结果报告于表1用于测试日测定头发长度。完成头发生长周期所需的时间也受到发胶处理的影响，发现石油醚凝胶为20天，其次是米诺地尔(20天)，然后是水(25天)，最后是对照(30天)。尽管米诺地尔和宠物之间的头发长度结果没有太大变化。乙醚处理动物组，但在定量组织学形态学研究宠物。乙醚凝胶处理动物在卵泡数和生长期间转化率上均表现出较好的反应。研究结果分为三个不同的部分，分别为标准组、对照组和发胶处理组动物毛囊开始和完全生长所需的时间(表1）.

最初剥落部位的皮肤颜色是粉红色，随着生长初期的开始而变暗。由于毛发生长初期毛囊生长活跃，并有黑色色素沉着，因此通过观察皮肤颜色来评价提取物型发胶的促毛发生长活性。与对照组或1%米诺地尔组相比，pet醚提取物处理组在10天观察到更多的皮肤黑色区域。水提液组和对照组每毫米皮肤有5 ~ 7个毛囊计数，组织学观察，治疗后第1、3、4组毛囊数量无差异，但第2组毛囊数量在。观察治疗组和对照组毛囊各周期的差异，如发育期和休止期，并将结果记录在表3．在第20天，我们观察了宠物。与1%米诺地尔处理组相比，乙醚提取物对毛发生长的促进作用更明显。在20天，经提取物处理的大鼠背部皮肤毛发完全恢复，而对照组只有50%的背部皮肤被毛发覆盖。这些结果表明，提取物可诱导毛囊的早期退生期向早生期转化。免疫组化分析显示，提取物处理组毛囊中β-catenin和Shh蛋白的诱导较早。定量分析中药凝胶对白化病大鼠毛发长度或毛发生长的影响表2．在治疗时间内，毛囊生长初期/休止期的百分比表3．结果表是不言自明的指示宠物。以乙醚浸膏为基础的中草药凝胶为有效的毛发生长促进活性，并能维持毛囊从无源到有源的转化

结论

本研究以白化病大鼠为研究对象，以白化病大鼠为研究对象。结果表明，石油醚提取物对毛囊的生长有较大的促进作用，并能诱导毛囊进入休止期。这种生长模式可能是由于毛囊过早地从休止期转移到生长期(Philpot et al.， 1992)。石油醚提取物处理组毛发生长致密，说明毛囊在生长初期诱导增加。Savin和Atton(1993)报道，治疗组毛囊从静止期转变为新生期可能是由于毛囊基部附近的上皮细胞增殖导致头皮血管扩张。然而，马齿苋的确切作用机制尚不清楚，因此从其提取物中鉴定和分离活性成分可能为治疗脱发开辟新的方向。需要进一步的研究来阐明结构和确定使用卷心菜作为明显的毛发生长促进剂的作用机制。

确认

作者非常感谢JNCET的信托基金和主要的药学研究所为研究工作提供所有的设施和财政支持。

参考文献

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