研究与评论在药学和制药雷竞技苹果下载科学
菜单e-ISSN: 2320 - 1215 p-ISSN: 2322 - 0112
e-ISSN: 2320 - 1215 p-ISSN: 2322 - 0112
3生活和纳米医药科学,药学院,庆熙大学Hoegi-dong, Dongdaemun-gu,首尔130 - 701,韩国
5生物医学科学学院,查尔斯特大学,巴瑟斯特,2795年新南威尔士,澳大利亚
收到日期:22/07/2015接受日期:14/09/2015发表日期:21/09/2015
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炎症已涉及作为一个潜在的许多慢性疾病病理生理特征。在目前的研究中,我们调查了新配方的抗炎作用的中草药,DG1102,由五个不同的草药成分如Taraxaci草,Rhei根茎,Houttuynia cordata研究。Houttuyniae草,Eriobotryae叶被用于炎症性疾病,在LPS-stimulated生264.7巨噬细胞。DG1102抑制一氧化氮(NO)、肿瘤坏死factor-α(TNF-α)、白介素(IL) 1α,IL - 6、IL - 10和巨噬细胞炎性蛋白质生产的脂多糖(LPS)刺激生264.7巨噬细胞,以及诱导一氧化氮合酶和环氧合酶2的表达。此外,DG1102镇压p38的激活和c-Jun n端激酶(物)。我们的研究结果表明,DG1102具有免疫调节活性抑制促炎细胞因子和趋化因子通过抑制物和p38 MAPK LPS-stimulated生264.7中激活巨噬细胞。目前的研究提供了药用植物的生物有效性的证据治疗炎症性疾病。
中草药、肿瘤坏死factor-α白介素,一氧化氮合酶。
DPPH: 2, 2-Diphenyl-1 Picrylhydrazy;物:c-Jun Nterminalkinase;TNF-α:Tumornecrosisfactor-α;IL:白介素;号:一氧化氮合酶;有限合伙人:脂多糖;MIP:巨噬细胞炎性蛋白;COX2: Cyclooxygenase2
炎症已涉及作为一个潜在的许多慢性疾病病理生理特征。炎症反应和临床症状控制通过细胞因子、一氧化氮(NO)和脂质介质包括前列腺素和白三烯等由巨噬细胞,中性粒细胞等炎症细胞(1,2]。虽然不同的机制提出了占炎症、激活巨噬细胞发挥特别重要的作用的中介通过代肿瘤坏死炎症factor-α(TNF-α)、白细胞介素- 6 (il - 6),没有和前列腺素E2 (PGE2) [3,4]。巨噬细胞释放炎性介质中是必不可少的各种病原微生物在启动炎症级联反应。脂多糖(LPS),促炎症刺激的主要组件之一Gramnegative细菌外膜,抒发强烈的免疫反应。巨噬细胞被激活时,有限合伙人,toll样受体(TLR) 4信号通路,包括增殖的磷酸化蛋白激酶(MAPK)和激活转录因子核factor-kappa B (NF-κB),启动(5]。这诱发炎性介质的产生,如诱导一氧化氮合酶(间接宾语),不,il - 6, IL-1β,TNF-α,cyclooxygenase-2 (cox - 2),等等。6,7]。
尽管不同物种的成分、药理活性的差异,属已知含有抗氧化剂的蒲公英一直财产除了抗炎,抗致,抗过敏,anti-hyperglycemic anti-coagulatory、镇痛活动(8]。Taraxaci草(TH) (Tarazacum mongolicum)配伍及化学成分来源于干整个工厂和被发现有一个对单纯疱疹病毒的抗病毒效应增强免疫反应(9]。尤其是eudesmanolides富含的乙酸乙酯分数蒲公英mongolicum抑制生产的激活原始264.7巨噬细胞(10]。因为它的泻药,镇痛和anti-stroke活动,Rhei根茎(RR),其主要组成部分对称二苯代乙烯polyprescriptions历来用作因素。Rhaponticin粉末中发现Rhei根茎的对称二苯代乙烯是证明有广泛的抗过敏和抗血栓特性11]。Houttuynia cordata研究。(三白草科;HC)被用于传统医学治疗的脓,慢性支气管炎,肺炎、耳炎和膀胱炎(12]。鱼腥草具有多种药理作用包括ant-ioxidant、抗炎和antiallergy效果由于酚醛组件的数量13- - - - - -15]。尽管整个鱼腥草的植物通常是用作草药,更多的抗氧化活动以及总酚和类黄酮含量观察比根和茎叶和花16]。Houttuyniae草(HH),鱼腥草地上部分,据报道有神经保护作用[17]。Eriobotryae叶(EF)的干叶子Eriobotryae粳稻(枇杷),已被用于慢性支气管炎与已知的抗氧化剂和抗炎活动。最近发现枇杷茶提取物抑制炎性因子的生产通过下调MAPK和NF-κB通路(18]。蛇葡萄属基数(AR)的根蛇葡萄属粳稻(研究)。牧野,被用作传统医学治疗疼痛和发烧与白藜芦醇作为一种主要的化合物(19]。提取蛇葡萄属的基数保护多巴胺神经元通过抗氧化机制在帕金森病模型20.]。
在目前的研究中,我们调查了新配方的抗炎作用的中草药(命名为DG1102),由五个不同的草药成分如TH, RR, HH, EF和AR LPS-stimulated生264.7巨噬细胞。
准备草药提取物
使用的所有草药买来泛光灯草(首尔,韩国)和验证博士d - i。金姆。每个凭证标本被美国博士d公园(美国草药配方,韩国传统医学学院,东国大学),并将其存入草药配方。准备DG1102的提取,总共有115 g的混合物草等五个不同的草药成分Tarazacum mongolicum Hand.-Mazz。(Taraxaci草TH 40 g),粉末的大黄Baillon (Rhei根茎,RR, 20 g),草的Houttuynia cordata研究。(Houttuyniae草,HH, 20 g),枇杷叶(研究)。采用。(Eriobotryae叶EF 20 g)和基数蛇葡萄属粳稻(研究)。牧野(蛇葡萄属基数AR 15 g)是粉和提取两次8体积的蒸馏水在100°C与回流冷凝器3 h,然后用50μm过滤过滤和真空蒸发浓缩的60°C。最终的收益率从整个过程大约是19.88克干混合物(平均收益率是17.29%)。 The dried material was stored at -80°C until use. For cell culture works, each herbal plant was extracted separately with 30% ethanol and concentrated by vacuum evaporation at 60°C.
在当前的研究中,一个ultraperformance液相色谱加上电喷雾电离质谱(UPLC-ESI-MS)方法是申请调查DG1102的药物化学。众所周知,中药效果表达通过与多目标多组分。甲醇和甲酸是高效液相色谱法(HPLC)年级和从Duksan购买纯化学品有限公司(韩国)的鞍山市提供电力。高纯度氮气由Shinyang提供氧气有限公司(韩国首尔)。其他化学物质的分析级。30毫克的DG1102水提取物溶解在1毫升蒸馏水产量最终浓度30毫克/毫升,透过0.2μm醋酸纤维素注射器过滤器(美国加州Advantec)在被注入UPLC-ESI-MS分析。DG1102的色谱分离的组件上执行一个水域ACQUITY UPLC h级系统(水Corp .,米尔福德,妈,美国)装有授权软件。PDA探测器被记录在195 ~ 500 nm之间。Brownlee SPP C18柱(3.0×100毫米,2.7厘米)被选为UPLC研究(美国PerkinElmer)。监控波长设置为280海里。 The mobile phase was comprised of acidified methyl alcohol with formic acid (0.1%, solvent A) and acidified water with formic acid (0.1%, solvent B). All solvents were filtered through a 0.2 um filter. The gradient program was 0-3 min, 1% of solvent A; 5 min, 10% of solvent A; 35 min, 40% of solvent A; 50-54 min, 100% of solvent A; 55 min, 1% solvent A, at a flow rate of 0.5 mL per min using a commercial splitter. The injection volume was 3 μL. AccuTOF® single-reflectron time-of-flight mass spectrometer was equipped with an ESI source (Electrospray ionization, JEOL, USA) and was operated with Mass Centersystem version 1.3.7b (JEOL, USA). In the positive ion mode, the atmospheric pressure interface potentials were typically set to the following values: orifice 1=80 V and ring lens and orifice2=10, 5 V, respectively. The ion guide potential and detector voltage were set to 2000 V and 2300 V, respectively. ESI parameters were set as follows: needle electrode=2000 V, nitrogen gas was used as a nebulizer, desolvating and their flow rate were 1 and 3 L/ min, desolvating chamber temperature=250°C, orifice 1 temperature=80°C. Mass scale calibration was accomplished with YOKUDELNA calibration kit (JEOL, Japan) for accurate mass measurements and calculations of the elemental composition. MS acquisition was set with a scan range of m/z 50 to 1500.
老鼠巨噬细胞细胞系,来源于美国的264.7细胞类型文化集合(罗克维尔市,医学博士,美国)。细胞被维护在杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)补充10%的边后卫(Welgene,首尔,韩国),100 U /毫升青霉素和链霉素0.1毫克/毫升(Welgene,首尔,韩国)5%的大气二氧化碳湿润37°C。MTT比色细胞生存分析。264.7原始细胞被播种在24-well板1×10的密度5在37°C细胞/好,孵化24 h。进一步孵化与血清DMEM做是在37°C的12 h。饥饿细胞治疗各种草本提取物的浓度。孵化后24 h或48 h, 50μl(5毫克/毫升)MTT的解决方案是添加和孵化一个额外的4 h。然后甲瓒晶体溶解了的二甲基亚砜(DMSO)。摇晃孵化了30分钟后,可溶性甲瓒晶体的光学密度检查通过使用分光光度计(分子器件、钙、美国)在580海里。
细胞细胞溶解与抽样缓冲区(甘油2-mercaptoethanol SDS 2%, 5%, 10%, 0.1毫克/毫升Tris-HCl溴酚蓝,pH值6.8)和加热10分钟的100°C。二十μg细胞溶解产物被10% SDS - page电泳,转移到硝化纤维素膜。涂抹膜与anti-phospho-JNK孵化、anti-JNK antiphospho——p38 anti-p38, anti-TNF-α,anti-IL-6, anti-iNOS, anti-COX2和anti-β肌动蛋白(细胞信号技术,贝弗利,妈,美国),稀释TBS-T中含0.05% BSA,一夜之间在4°C。结合抗体的检测辣根peroxidaseconjugated anti-rabbit或anti-mouse免疫球蛋白和乐队使用ECL可视化系统(美国热费舍尔Scienctific)。带图像通过使用分子成像仪ChemiDoc XRS + (Bio-Rad、大力神、钙、美国),分析了带强度图像实验室™软件版本2.0.1 (Bio-Rad)。
草本提取物在不同浓度的1 - 1000μg /毫升和0.2毫米DPPH (2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)乙醇溶液(1:1)。孵化后在室温下在黑暗中30分钟,混合物的吸光度测定使用分光光度计在517海里(VersaMax标;分子器件,美国加州桑尼维尔)。此外,提取的DPPH自由基清除活性表达为一半最大抑制浓度(IC50)被定义为所需的浓度清除DPPH自由基的50%。IC50计算使用Calcusyn软件(Biosoft,剑桥,英国)。
培养基中的亚硝酸盐浓度的测量作为一个指标没有生产格里斯反应系统(美国WI Promega)。264.7原始细胞(5×104细胞/)在96 -孔板细胞培养24小时。然后接受上述样品+有限合伙人(1μg /毫升)或有限合伙人仅20 h。上层清液与相同体积的格里斯试剂混合,室温下孵化为5分钟,亚硝酸盐的浓度是决定通过测量吸光度通过使用分光光度计(分子器件、钙、美国)在540海里。
264.7原始细胞(5×105细胞/在six-well板块)服用草药提取物(25、50、100、200μg /毫升)+有限合伙人(1μg /毫升)16 h。评价细胞因子mRNA的表达水平,细胞总RNA提取与试剂盒(表达载体,生活技术,美国)根据制造商的指示。总RNA(1μg)混合与RNA cDNA EcoDry预混料(Clontech Laboatories, Inc . CA,美国)包含oligo-dT引物和水最后一卷20μL和孵化42°C 60分钟。实时PCR是由使用转子基因Q系统(试剂盒、希尔登,德国)和反应混合物,由SYBR绿色2×PCR反应混合液,互补脱氧核糖核酸模板,正向和反向引物。变性的PCR协议由40周期在95°C,持续15秒,紧随其后的是55°C为30秒,以便扩展和放大目标序列。每个细胞因子mRNA的表达水平是规范化的肌动蛋白通过2−ΔΔCT方法。在这项研究中使用的引物序列所示表1。完成实时PCR、PCR产物后在琼脂糖凝胶电泳和乐队被使用可视化SYBR®安全DNA凝胶染色(表达载体,生活技术,美国)。带图像通过使用分子成像仪ChemiDoc XRS + (Bio-Rad、大力神、钙、美国)。
表1:的引物序列。
所有与SPSS统计分析进行(版本。21日,萨默斯,美国纽约)。所有的值都表示为±SEM手段。单向方差分析的数据进行了分析,然后差异意味着分析使用Dunnett的测试或图基-克莱默的多重比较检验。差异被认为是显著P < 0.05。
为了建立的标准色谱DG1102,我们采用UPLC系统。梯度洗脱系统选择的是最好的方法来获取整个色谱的植物化学物质从自然资源。识别的主要色谱峰是由UPLC-ESI-MS研究。
保留时间,观测质量,质量差异并提出化合物6个山峰中列出表2。从质谱、质子化了的分子是最丰富的离子峰2,3,峰值和峰值4 (图1和图2)。钠离子与钠加合物二聚体离子加合物最丰富的离子峰1,峰6和峰5 (图2)。六种主要植物化学物质在DG1102如下:trans-caftaric酸和chicoric酸从TH, resveratroloside和大黄酸8-glucoside从RR(+)儿茶素从RR HH和3-O-caffeoylquinic酸或从EF 4-O-caffeoylquinic酸。这六个化合物由DG1102被确定通过比较紫外线和MS谱(图1和图2)。
表2:UPLC山峰的观察和计算质量数字DG1102水提取物。
图1:UPLC DG1102水提取物的色谱和紫外可见吸收光谱六峰。
图2:六峰的质谱DG1102水提取物。
检查DG1102提取物的抗氧化能力及其单一成分,我们执行DPPH自由基清除活性测定。DG1102及其单一成分表现出剂量依赖性增加活动。其中,DG1102 100 ug /毫升展出清除活性最高(78.81±0.52%)比其他单一组件在DPPH (图3一)。半最大抑制浓度(IC50)计算并与积极的控制,抗坏血酸。DPPH DG1102 IC50, TH, RR, HH, EF和AR是37.4,52.3,23.4,125.5,27.5和75.6μg /毫升,分别为(图3 b)。
图3:自由基清除活性DPPH-radicals草药提取物。(A)的反应混合物包含60μM DPPH和6.2,12.5,25日,50或100μg /毫升的草药提取物。(B) IC50草药提取物的自由基清除活性。
水提物的浓度DG1102和单个组件的计算为1毫克/毫升。检查每个提取物的抗菌活性,s . epidermidis菌株,报告为一个皮肤病原体,筛选对提取的敏感性。
初步筛选的提取进行了抗菌活性在美国epidermidis通过Kirby-Bauer纸片扩散试验(表3)。
表3:结果每个草药提取物的抗菌活性的琼脂扩散法。
所有的提取是敏感(抑制区> 10毫米)与最大抑制区获得草药混合物,DG1102(13.5毫米)。
图4一细胞毒性测试的结果显示每个草本提取物原料264.7巨噬细胞通过MTT试验。DG1102及其组件没有细胞毒性影响细胞100μg /毫升(图4一)。因此,DG1102及其组件使用的剂量25或50μg /毫升在随后的实验。图4 b展示了细胞生存能力在50μg /毫升的草药提取物和co-treatment 20 h。有限合伙人的有限合伙人有细胞毒性的浓度0.5μg /毫升显示68.64±3.3%细胞生存能力与控制。Co-treatment 0.5μg /毫升有限合伙人中含有草本提取物改善DG1102细胞生存能力和RR。草药提取物的影响LPS-induced没有形成在原始264.7巨噬细胞决心和结果所示图4 c。培养的细胞与DG1102 TH, RR和EF导致抑制LPS-induced没有生产150.00±1.6%,202.27±6.2%,分别为179.19±5.1%和179.19±5.1%,。
图4:抗炎作用的草药提取物264.7原始细胞。264.7 (A)巨噬细胞细胞,生被暴露于不同浓度的草药提取物。细胞生存能力是衡量MTT测定草药提取物治疗后24小时。数据,表示成比例的控制”(体质)、“均值±SEM的三个独立的实验。(B)细胞被播种在24孔板和刺激了0.5 ug /毫升的有限合伙人+草本提取物用于24小时血清中减少了媒体。之后,细胞生存能力是衡量MTT测定草药提取物治疗后24小时。数据表示为百分比控制均值±SEM的三个独立的实验。+ + p < 0.01与控制;* p < 0.05与有限合伙人;* * p < 0.01与有限合伙人。 (C) Cells were seeded in 24 well plates and were stimulated with 0.5 ug/ml of LPS plus herbal extracts for 48 hour in serum reduced media. After that, supernatant of cells were mixed with Griess reagent. Data, expressed as percentage of control are the mean ± SEM of three separate experiments. ++p<0.01 vs. control; *p<0.05 vs. LPS; **p<0.01 vs. LPS.
图5演示了草药提取物的作用LPS-challenged TNF-α生产巨噬细胞细胞的影响。所有草药提取物用于此分析抑制LPS-induced TNF-αLPS曝光后24小时生产。其中,DG1102显示最高抑制TNF-α的生产。检查的剂量依赖性DG1102 25或50微克/毫升DG1102 co-treated在LPS-challenged巨噬细胞细胞24小时。所示图6,DG1102显著抑制TNF-α和il - 6的分泌剂量依赖性。
图5:草药提取物的影响LPS-induced TNF-α生264.7细胞。(一)细胞被播种在6孔板和刺激与0.5 ug /毫升的有限合伙人和草药提取24小时。之后,整个细胞溶解产物在sds - page电泳和免疫印迹分析anti-TNF-α或β-actin抗体。(B)的强度TNF-α和β-actin乐队被光密度分析、量化和大量TNF-α规范化和β-actin。数据代表三个独立实验的±SEM手段。C:如果细胞。+ + p < 0.01与控制;* * p < 0.01与有限合伙人。
图6:DG1102的影响LPS-induced TNF-α,il - 6,进气阀打开,COX2在264.7原始细胞。细胞被播种在6孔板和刺激与0.5 ug /毫升的有限合伙人和25或50微克/毫升DG1102 24小时。(一)之后,细胞上清液在sds - page电泳和免疫印迹分析了anti-TNF-α,il - 6或β-actin抗体。TNF-α强度、il - 6和β-actin乐队被微密度分析,量化TNF-α和il - 6与β-actin正常化。(B)总细胞溶解产物在sds - page电泳和免疫印迹分析与anti-iNOS COX2或β-actin抗体。伊诺的强度,COX2和β-actin乐队是由微密度分析、量化和伊诺和COX2规范化和β-actin。数据代表三个独立实验的±SEM手段。C: nstimulated细胞。+ + p < 0.01与控制;* p < 0.05与有限合伙人; **p<0.01 vs. LPS.
接下来,我们检查的抑制作用是否DG1102伊诺和COX2的感应与无生产。图6 b表明0.5μg /毫升有限合伙人显著诱导伊诺和COX2的表达。Co-treatment DG1102显著降低这两个蛋白的表达在LPS-induced巨噬细胞细胞。这些数据表明,DG1102抑制LPS-induced生产通过抑制伊诺和COX2的表达在原始264.7巨噬细胞细胞。
为了确定精确的草本提取物治疗机制操作,我们测量两个MAPK的磷酸化蛋白质如物和p38使用免疫印迹分析所示图7。
图7:草药提取物的影响LPS-induced物或原始264.7中p38磷酸化细胞。(一)细胞被播种在6孔板和刺激了0.5 ug /毫升的有限合伙人和草药提取物1小时。之后,整个细胞溶解产物在sds - page电泳和免疫印迹分析anti-JNK或anti-phospho-JNK抗体。每个乐队的强度是由微密度分析、量化和大量的磷酸化物归一化和物。(B)细胞被播种在6孔板和刺激与0.5 ug /毫升的有限合伙人和草药提取物1小时。之后,整个细胞溶解产物在sds - page电泳和免疫印迹分析anti-p38或anti-phospho-p38抗体。每个乐队的强度是由微密度分析、量化和大量的磷酸化p38规范化和p38。数据代表三个独立实验的±SEM手段。C:如果细胞。+ + p < 0.01与控制; *p<0.05 vs. LPS; **p<0.01 vs. LPS.
图8:草药提取物的影响在原始264.7 LPS-induced细胞因子诱导细胞。(一)细胞被播种在6孔板和刺激与0.5 ug /毫升的有限合伙人和草药提取24小时。之后,总RNA提取和cDNA反转录多聚腺苷酸底漆。中使用的互补脱氧核糖核酸是与每个引物PCR反应。完成实时PCR、PCR产物后在琼脂糖凝胶电泳和禁止可视化(B)定量实时PCR产物进行了分析和每个产品的数量是规范化和肌动蛋白。数据代表三个独立实验的±SEM手段。C:如果细胞。* p < 0.05与控制,# p < 0.05与有限合伙人。
0.5μg /毫升有限合伙人显著增加物和p38的磷酸化。Co-treatment磷酸化的草药提取物显著降低物和p38 LPS-induced巨噬细胞细胞。这些数据表明,草本提取物抑制LPS-induced没有和TNF-α生产通过抑制物和p38磷酸化在原始264.7巨噬细胞细胞。
众所周知,细胞因子是由活化巨噬细胞,我们下一个检查DG1102是否影响
0.5μg /毫升有限合伙人TNF-αmRNA表达明显增加,il - 10、il - 6, IL-1α,MIP-1αMIP-2。Co-treatment TNF-αDG1102显著降低mRNA表达,il - 10、il - 6, IL-1αMIP-1α。然而,减少MIP-2 mRNA表达被抑制DG1102治疗LPS-induced生264.7巨噬细胞细胞。
目前的研究表明草药混合物的抗炎,DG1102 LPS-stimulated生264.7细胞和分子机制TNF-α而言,il - 6,进气阀打开,cox - 2,没有生产。这些结果表明,DG1102比其他单一组件更有效抑制LPS-induced没有和TNF-α的释放。此外,DG1102 LPS-induced磷酸化的抑制物和p38 264.7原始细胞。
在目前的研究中,我们调查了新配方的抗炎作用的中草药,DG1102由五个不同的草药成分和我们相比的功效DG1102 DG1102与单一组件。五个成分DG1102已被用来作为传统医学的许多炎症性疾病的治疗,因为他们的抗氧化潜力。在这项研究中,我们还研究了单一的氧化效果或混合物提取利用DPPH自由基清除活性(图3)。虽然DG1102和它的单一成分表现出剂量依赖性增加活动,DG1102 100 ug /毫升表现出最高的清除DPPH活动比其他单一组件。此外,LPS-induced巨噬细胞,DG1102显示TNF-α生产的最高抑制效应,表明复合中草药的影响可能会比一个好。
在目前的研究中,我们发现六种主要植物化学物质在DG1102: trans-caftaric酸和chicoric酸从TH, resveratroloside和大黄酸8-glucoside从RR(+)儿茶素从RR HH和3-O-caffeoylquinic酸或从EF 4-O-caffeoylquinic酸(表2)。其中,三个植物化学物质已报告显示抗炎效果;(+)儿茶素可以减少没有生产264.7 LPS-stimulated原始细胞,chicoric酸加强木樨草素的抗炎活动通过NF -κB衰减在LPS刺激生264.7细胞和3-O-caffeoylquinic防止NF-κB核积累,由有限合伙人,N9细胞(21- - - - - -23]。虽然在这项研究中,我们没有检查NF-κB激活LPS-induced生264.7 DG1102治疗的细胞,这表明这些组件DG1102可能没有有效的协同,通过抑制NF-κB TNF-α生产264.7 LPS刺激的原始细胞。
许多促炎症基因的表达由有限合伙人由MAPK通路(24]。物和p38 MAPK主要MAPK亚科成员LPS-stimulated生264.7中被激活细胞(图7)。
DG1102及其组件显著抑制LPS-induced磷酸化物或p38 MAPK。先前的研究已经报道,物活动参与伊诺表达LPS-stimulated RAW264.7巨噬细胞和细胞外刺激p38激酶途径包括地图的多种细胞因子(IL-1α,2、IL-7 IL-17,地震,TGF-β,和TNF-α)(25,26]。DG1102显著抑制LPS-induced伊诺表达和后续生产264.7原始细胞。此外,DG1102抑制促炎细胞因子的表达,如TNF-αIL-1β和il - 6,在LPS-stimulated生264.7细胞。总的来说,这些结果表明,压制LPS-induced伊诺表达和细胞因子的生产减少了DG1102介导的抑制物和p38激活。
LPS-stimulated巨噬细胞让各种炎性介质,如细胞因子/趋化因子,不,和PGE227]。提供生产促炎症介质导致许多病理状态,包括癌症和糖尿病(28,29日]。因此,调制的炎性介质,如进气阀打开,COX2和不,提供可能的目标对各种炎性疾病疗法的发展。我们发现DG1102显著抑制LPS-induced伊诺COX2的表达和在生264.7细胞(图6 b)。这些结果表明,DG1102调节活动对炎症过程。
MIP-1α促炎属性和已经被证明能够激活肥大细胞和嗜碱粒细胞,为T细胞和单核细胞趋化因子,诱导中性粒细胞的氧化破裂(30.]。MIP-1α和相关趋化因子,作为信号传感器在炎症损伤,并执行重要的监管职能(31日]。在目前的研究中,DG1102显著抑制LPS-stimulated MIP-1α感应但不是MIP2,表明DG1102可能通过不同的途径调节巨噬细胞失活。事实上,在ethanol-fed老鼠,MIP-1α增加血清中但不是MIP-2 [32),这表明两种趋化因子可能监管不同的途径
总之,我们提供一个分子基础,DG1102拥有更多强大的免疫调节活性抑制促炎细胞因子和趋化因子通过抑制物和p38 MAPK在LPS-stimulated生264.7巨噬细胞激活比单一组件。虽然需要更多的数据来解释的确切机制和体内DG1102炎症系统的影响,我们的研究仍然提供了协同功效的植物的生物学证据混合物治疗炎性疾病。
这项工作被授予朝鲜支持卫生技术研发项目,卫生和福利,大韩民国(没有。HN12C0062)。
没有利益冲突声明。