高效液相色谱分析

关键字

色谱，高效液相色谱，分析，柱

简介

高效液相色谱法，又称高压液相色谱法，是制药工业中最常用的分析方法。高效液相色谱法(HPLC)主要用于样品混合物中成分的分离、鉴定和定性定量分析。通常用于半挥发性或非挥发性有机化合物[1，2］．

它是一种柱层析，但与柱层析相比，它是高度敏感和高度自动化的。与柱层析中允许溶剂在重力作用下通过色谱柱不同，高效液相色谱技术利用高达400 atm的高压[3.-5］．它允许更快，更好的分离比柱层析，由于压力和更大的表面面积的填料材料在柱，这是由于容纳更小的颗粒尺寸。更大的表面积有利于填料(即固定相)与流经固定相的待分离分子之间更好的相互作用[6-9］．

高效液相色谱技术的操作有点混乱。它包括一个采样器，泵和一个探测器。高效液相色谱法利用流动相即溶剂和固定相之间的亲和性的概念[10，11］．泵用来注入连续流动的溶剂。将溶解的样品注入这种溶剂中。一旦样品进入溶剂中，它就会通过色谱柱[12-14］．样品中的组分根据它们与色谱柱中分子的亲和度进行分离。样品中的化合物被分离后，它们通过探测器。在高效液相色谱技术中使用用户软件进行数据分析[15-18］．

高效液相色谱技术可用于两种形式[19];

正相高效液相色谱

这是基本的柱层析。它是不常用的高效液相色谱形式

柱中填充二氧化硅分子，所用溶剂为非极性溶剂。

通过色谱柱的混合物中的极性组分将比非极性化合物粘附在极性二氧化硅颗粒上的时间更长。因此，非极性化合物将更快地通过色谱柱[20.，21］．

反相高效液相色谱法

反相高效液相色谱法是最常用的高效液相色谱法。

在这种情况下，二氧化硅通过将长碳氢链附着在其表面而成为非极性的。采用极性流动相[22］．

因此，通过的混合物中的极性溶剂和极性分子之间的粘附性将比附着在二氧化硅上的碳氢链和溶液中的极性分子之间的粘附性强[23］．

由于范德华色散力的作用，非极性化合物会与烃基形成吸引。它们不易溶于溶剂。因此，这将使它们在通过圆柱的过程中减速。现在，极性分子通过色谱柱的速度更快[24，25］．

参考文献

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