小酸浆的离体开花与快速繁殖。——一种药用植物

E.Sheeba¹, S.Palanivel²和S.Parvathi²

布林达文学院微生物学系，第二十字，R.M.V第二阶段，Bhoopasandra，印度班加罗尔
印度泰米尔纳德邦卡鲁市政府艺术学院植物系

摘要

通过对一年生草本植物小酸浆(Solanaceae)成熟植株的节段离体培养，建立了一种高效的离体开花和快速繁殖方法。在Murashige和Skoog (MS)培养基、3%蔗糖和0.8%琼脂中添加4.0mg/l BAP和0.25mg/l 2,4 - D、1.0mg/l KIN和0.25mg/l NAA，可发育出功能完全的花。在MS培养基中添加2.0mg/l BAP和0.25mg/l IAA，平均每个外植体可诱导出3个芽。IBA为2.0mg/l时，全强度MS培养基的离体生根效果最好。在温室和大田条件下，生根苗成活率达70%。

关键字

离体开花，小繁殖，药用植物，小酸浆，茄科。

介绍

小酸浆。茄属茄科重要药用植物之一。小酸浆属植物。苦，开胃，滋补，利尿，通便，对炎症，脾肿大和腹部疾病有用。这种水果被认为是一种滋补、利尿和泻药。叶子提取物具有抗菌活性。叶子的汁液，与芥末油和水混合，被用来治疗耳痛。马来人将涂有油并加热的叶子涂在溃疡、伤口和脓疱上。叶子也被用来缓解头痛。叶子和茎的糊状物被用来治疗头晕。

虽然这种植物有巨大的药用价值，但由于过度开发和环境污染，它正逐渐从大自然中消失。近年来，对不同植物种类的离体繁殖的大量研究表明，该技术可能是一种快速繁殖选择植物种类的解决方案。本文报道了一种能在小酸浆草中产生大量植株和离体开花的高效微繁殖系统。

材料和方法

A.Plant材料

植物采自喀拉拉邦(主要在Palakkad和Thrissur地区)。从田间生长的植物中，切除幼节区域，用于离体开花和超繁。收集的外植体在自来水中彻底清洗30'。然后用含6-8滴tween 20的1% savlon溶液冲洗外植体15'，再次用双重蒸馏水冲洗以去除洗涤剂溶液的痕迹。再次，在层流气流室内用高压水冲洗一次。然后用70%的酒精清洗外植体30秒。然后，用0.05%氯化汞溶液冲洗外植体5'，再用无菌蒸馏水冲洗6-8次。将外植体置于无菌培养皿中接种。以消毒后的节区为外植体源进行离体培养。

b .培养培养基和条件

基本培养基:用于初始芽增殖实验的基础培养基。MS培养基(Murashige, T和Skoog, F, 1962)由宏量营养素、微量营养素、铁源和维生素组成，并辅以蔗糖(3%)作为碳源和琼脂(1%)作为固化剂。在压力为15磅的高压灭菌前，将介质的pH值调整为5.8。在基础培养基中添加各种细胞分裂素[BAP(6 -苄基氨基嘌呤)和KIN(激动素)](Wang, S;Tan, L和Chen, F, 2001)和不同浓度和组合的生长素[NAA(α -萘乙酸)，IAA(吲哚- 3 -乙酸)，IBA(吲哚- 3 -丁酸)和2,4 - D(2,4 -二氯苯氧乙酸)](Nitsch和Nitsch,J,P, 1967;萨胡，Y和昌德，P,K,1998;李文杰，李文杰，J, 2000)。培养在25±2oC, 16小时光周期下培养。

c .生根、驯化和田间转移

在添加不同浓度生长素(IBA和NAA)的全强度MS固体培养基上诱导根(Vadawale et al, 2006)。通过温室内的喷雾装置，在保持湿度(~ 90%)的条件下，将根部发育良好的健康嫩枝转移到含有蚯蚓堆肥的小花盆中。

对其枝条数、茎长、根数、根形态、花蕾数、发育花进行了测定。

结果和讨论

在没有添加生长调节剂的MS培养基上，外植体完全不能生长。在添加不同浓度BAP和IAA的MS培养基上，可诱导出小芽(表- I)。在添加BAP和IAA的MS基础培养基上，节外植体平均诱导出3个芽(表- I;图- Ia)。以BAP (2.0mg/l)和IAA (0.25mg/l)诱导芽率最高。

体外开花

分离到含有不同浓度细胞分裂素(BAP或KIN)和生长素(2,4 - D或NAA)的新鲜MS培养基上，从节段外植体中分离出的发育完全的芽开始在节段发育。

植物生长调节剂对诱导花的影响

研究了细胞分裂素(BAP或KIN)和生长素(2,4 - D或NAA)对诱导花的影响(表- II)。含BAP (4.0mg/l)和2,4 - D (0.25mg/l)的MS培养基;KIN (1.0mg/l)和NAA (0.25mg/l)使开花均匀，每株花2 - 3朵(图Ib)。在添加不同浓度BAP和2,4 - D的MS培养基上诱导的花蕾开出了功能性花(图ic)，而在添加不同浓度KIN和NAA的MS培养基上诱导的花蕾开出了除4.0mg/l KIN + 0.25mg/l NAA和5.0mg/l KIN + 0.25mg/l NAA外的花(Sri Rama Murthy et al, 2006)。

生长素对离体生根的影响

结果表明，与NAA相比，IBA更适合诱导根(表- III)，将新梢转移到添加NAA的生根培养基上，可形成粗壮而短的根。再生芽在含2.0mg/l IBA的MS培养基上生根效果最好(图Id)。在施用IBA的培养基中，根较细，根毛多。在含IBA的培养基中孵育3周后，每枝平均生根5根，平均长度为5cm。IBA的缓慢降解有利于其在施用部位附近的定位，从而更好地诱导根。

生根的嫩枝直接转移到装满蚯蚓堆肥和苔藓的小盆中(1:1)。在转入土壤的植株中，70%存活下来，并表现出与田间生长的植株相似的形态特征(图Ie)。

结论

本文提出了一种诱导小酸浆离体开花的简便有效的方法。在我们的研究中，细胞分裂素(BAP或KIN)的浓度增加了离体开花，生长素(2,4 - D或NAA)的浓度减少了。该方案还描述了这种药用植物的快速繁殖。

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