不定芽再生的Corchorus acutangulus林。(椴树科)。

文摘

草,Corchorus acutangulus是一种重要的药用植物属于家庭椴树科。本研究描述了有效的体外再生协议标准化这个物种通过叶片外植体。叶片外植体培养在Murashige &斯(MS)中补充了2,4 - d (1.5 mgl-1)和NAA (0.2 mgl-1)愈伤组织诱导效率(84.43%)。开发了多个芽(83%)中富含IBA (2.0 mgl-1)女士和TDZ (0.2 mgl-1)。更好的观察反应(74%)加油一半力量中包含女士IBA (2.0 mgl-1)和Kn (0.2 mgl-1)。再生植株被成功适应和硬文化的房间内,然后转移到温室存活率为81%。

关键字

Corchorus acutangulus药用植物,在体外再生。

介绍

微体繁殖保护提供了巨大的潜力和大规模乘法有用的药用植物物种和随后的剥削。此外,在体外文化技术要求开发遗传转化和建立生产次生代谢产物的细胞悬液。在这方面,营养繁殖利用组织培养技术是值得特别注意的有限的成功作为一个可能的替代方法来克服传统技术[1,2]。的物种,Corchorus acutangulus分布在河岸的小气候地区沙质土壤也可用在遮荫条件下安静的地区[3]。此处描述所需的优化培养条件和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,拍摄再生和生根的植株不成熟的传单Corchorus acutangulus。

材料和方法

叶段年轻和健康的分支c . acutangulus作为外植体。他们收集从罐培养个人维护一个雾室。表面消毒,收集到的不成熟的叶子被两次用自来水洗净,然后接受5% tween-20解决方案5分钟之后,在自来水冲洗。消除真菌污染,外植体进一步以5%的抗生素治疗(氨苄西林和利福平)30分钟紧随其后3在无菌双蒸馏水冲洗。此外,表面灭菌是由浸3分钟后的外植体在0.1% HgCl2 3 - 4在无菌双蒸馏水冲洗。

媒体和文化条件

Murashige和斯[4](MS)中含3%蔗糖与1%琼脂凝固(组织文化品位、Himedia、印度)使用。介质的pH值调整到5.6 -5.8前添加琼脂在高压灭菌法1210 C之前15分钟。所有的瓶子被保存在文化室25±20 C 16/8人力资源(光/暗)光周期的光强度2000勒克斯由白色的日光灯,有60 - 65%的相对湿度。

愈伤组织诱导培养基

外植体被转移到文化包含25毫升的瓶子中补充女士与不同浓度的组合2,4 - d和NAA对愈伤组织诱导。

拍摄感应介质

MS培养基含有不同浓度和IBA组合(0.5,1.0,1.5,2.0,2.5和3.0 mg / l)和TDZ 0.2 mg / l是用于射击属性。

细长的芽和适应环境的支持

适当的拍摄感应后,植株从介质中删除很仔细,用消毒洗净双蒸馏水正确,以避免任何的痕迹中根。在体外再生芽(长5 - 6厘米)切除和支持媒体转移到含有一半力量中补充了IBA和女士Kn加油。适当的根形成后,这些根植植株被转移到淬火介质由花园土壤、沙子和vermicompost在不同比例和维护在温室条件知道生存能力。

统计分析

所有的实验都做至少两次使用一式三份。数据统计处理和手段比较使用邓肯的多个测试范围(P < 0.05)。

结果与讨论

优化微体繁殖协议取决于各种因素即。,媒体、外植体、生长因子和文化条件。因此在目前的研究中不同阶段的微体繁殖被筛选不同因素标准化。不同的生长调节剂组合和浓度的影响从叶片外植体的愈伤组织开始c . acutangulus所示表1。一个有效的观察叶片外植体愈伤组织的形成(84%)的生长调节剂MS培养基上的强化,2,4 - d(1.5球型投手¹乙酰天冬氨酸(0.2)和球型投手¹)。结果表明,生长素,2,4 - d,或结合乙酰天冬氨酸生产效率愈伤组织经过30天的文化与三次文化。Ganesan和Paulsamy[5]报道,物种,半边莲nicotianaefolia愈伤组织形成更大的女士中含有较高含量的2,4 - D的比例较低。不同外植体愈伤组织形成的响应可能是由于各种因素即。,外植体的性质、生长因子和程度的全能性。先前的报道还描述了类似的模式高度的愈伤组织诱导的较高含量的2 - d在女士中[6、7]。叶片外植体的更明显反应可能是由于内生的观察到的植物生长调节剂,柴胡属fruticosum[8],柴胡属kaoi[9],Anaphalis eliptica[10]。

细胞分裂素的结合,TDZ (2.0 mgl-1)连同IBA (0.2 mgl-1)被发现表现出最高频率的拍摄乘法(83%)、最大芽数(13.56芽/愈伤组织)和拍摄长度(6.3厘米),接种叶中愈伤组织(表2)。支持这一事实Arya和Shekhawat [11], Cobman恩斯特[12]和政府高级官员等[13]报道,细胞分裂素作为义务的一部分媒体拍摄在许多植物物种分化。感应的根,在体外长芽被转移到MS培养基补充不同的组合和浓度的生长调节剂。有效的支持(74%)更多的根(10.37根/拍摄)和大根长度(6.9厘米)是通过接种的体外发达芽中强化与生长调节剂IBA和女士在2.0和0.2 Kn球型投手¹分别为(表3)。类似的发现更大的支持性能更高浓度的生长素在MS培养基在几种药用植物已报告Catharanthus roseus也叫[14],Leptadenia网状[15]。生长素浓度更高的存在促进了更好的生根。细胞分裂素的要求(TDZ)更好的支持在许多物种由不同的工人(16、17、18、19、20)。

五胞胎等[21]报道,支持响应生长素包含一个初始细胞快速增长通过改变pH值和钙,和基因表达在茁长素更有效,IBA和NAA组合而不是任何其他植物生长激素的组合这两种植物生长激素的国米转换更多可能的和成功的,这一过程需要有效的支持。

根的发展后,植株被从文化瓶子,用无菌蒸馏水清洗去除秉承琼脂培养基,这样可以停止污染的机会。那么这些幼年植株被转移到淬火介质包含花园土壤、沙子和vermicompost(体积比比率)派生植株叶片愈伤组织的生存能力率高81% (表4)。掺合料的所有这三个组件可能提供condusive环境通过提供适当的营养,充足的曝气和植株分别所需的矿物质。本文描述了一个大规模生产的主要和易于使用的协议的植株Corchorus acutangulus。

引用

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