和评论:化学》杂志上的雷竞技苹果下载研究表明
菜单e-ISSN: 2319 - 9849
e-ISSN: 2319 - 9849
大学理学院化学系,科伦坡,斯里兰卡
收到日期:07/09/2015;接受日期:23/09/2015;发表日期:25/09/2015
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多耐药starins和菌株的数量减少suceptibility抗生素continuoesly增加。因此寻找代抗生素药用植物是至关重要的。一个人种药用调查在两个不同的地区在斯里兰卡,尤其是部落社区显示,大量使用运用evecta (Forst)。Hoffm治愈各种疾病。本研究进行体外研究抗菌活性a . evecta蕨类植物,对大肠杆菌的菌株(写明ATCC 35218),金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928),肺炎克雷伯氏菌(写明ATCC 13883)和粪链球菌(写明ATCC 9790)琼脂纸片扩散试验和真菌Aspegillus尼日尔的污渍,Fusaium oxisforum Curvularia sp和食物中毒的技术。的粗提取物a evecta准备在二氯甲烷、丙酮、甲醇、氯仿和乙醇的叶子,根和根状茎选择最好的溶剂用于试验。在所有的提取试验,丙酮粗提物准备从叶子,根状茎和根显示最高的活动对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌(写明ATCC 35218)(写明ATCC 25928)。与他们相比,k .肺炎(写明ATCC 13883)和美国粪(写明ATCC 9790)显示非常低水平的活动。因此,丙酮提取被用来确定的最低抑制浓度(MIC)金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928)和大肠杆菌(写明ATCC 35218)和麦克风的值被确定为290年分别μg /盘和195μg /盘。真菌毒性的评估进行的在五个不同浓度比例的菌丝体生长抑制(500、400、300、200和100μg /毫升)的乙醇、甲醇、二氯甲烷、丙酮、叶、根状茎和根。乙醇和甲醇提取物的叶,根和根状茎显示最高的活动对所有真菌菌株进行测试。然而,a尼日尔显示最高的活动显示100%增长的抑制300μg /毫升乙醇和甲醇提取物。在一起,我们的结果表明a evecta是一个潜在来源孤立新颖的抗菌化合物。
答:evecta、抗菌活性、麦克风、食物中毒技术,琼脂纸片扩散法。
工厂已经使用的药物自古以来。大部分的药用植物代表的丰富来源抗菌药物。药用植物与人类生活的价值是无限的。因此植物提取物的筛选抗菌活性是有益的和活跃的化合物可能是有用的草药或改善的准备吗药物制剂。与高等植物相比,已考虑对药用蕨类植物的应用程序。然而,人类已知的蕨类植物的药用价值是2000多年和部落社区民族和民间传说在许多国家已经利用他们的部分像植物的根状茎,茎,长、根和孢子以不同的方式治疗各种疾病自古以来[1]。泰奥弗拉斯托斯(公元前327 - 287)和不一样(公元100年)已将某些蕨类植物的药用归因。古老的药用作用如Sushruta和查拉卡(公元100年)提到了药用的用途Marsilea munata林和铁线蕨发veneris林恩在samhita [2]。
由斯里兰卡的羊齿类植物343种分布在包括属于26科118属58种流行[3]。斯里兰卡羊齿类植物具有重要的科学价值,因为它有最原始的维管植物Psilotum、木贼属韭属,卷柏和石松属植物(4]。然而他们治疗潜在的调查是至关重要的13从斯里兰卡蕨类植物物种已经灭绝,90种蕨类植物和蕨类植物的盟友一直被列为濒危物种5]。
原住民知识证明了一个强大的和更有效的策略来发现临床上有用的化合物,一个人种药用调查探索用药物当地治疗师所使用的羊齿类植物的重要性,当地居民和部落居民选择在两个地区,Bulathsinhala Kaluthara区和Mahiyanganaya Badulla区在斯里兰卡。结果显示,27个物种人种药用的使用治疗13疾病和a . evecta用于治疗最大数量的疾病包括伤口,便秘,痔疮、痢疾、肌肉疼痛、发烧、沸腾等。6]。a . evecta是陆生蕨类植物属于家庭Maratiaceae和通常称为巨大的蕨类植物或国王蕨类植物。本研究进行调查。a . evecta的抗菌活性的菌株大肠杆菌(写明ATCC 35218),金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928),k .肺炎(写明ATCC 13883)和美国粪(写明ATCC 9790)和真菌的污渍答:尼日尔,f . oxisforum和Curvularia sp。根据我们的结果,a evecta展示了最高的抗菌活性大肠杆菌(写明ATCC 35218),金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928)和对真菌的活动答:尼日尔。
新鲜的植物部分;根、根状茎和叶子答:evecta洗2 - 3次,其次是蒸馏水和植物的部分被切成小块(5毫米)和阴影在室温下干燥一段时间2周。一个大约100克的样品冷冻乾和用于溶剂萃取。
粗提物的制备冷冻干燥的样品的叶子,根和根状茎的evecta与氯仿混合,二氯甲烷、丙酮、乙醇和甲醇在1:10的比例(w / v)分别对粗提物制备和保存在一个超声发生器45分钟。每个混合透过绘画纸没有:1滤纸和提取过程做了两次完整的提取生物活性化合物。所得滤液被组合在一起,集中在35°C使用旋转蒸发器和串行详尽的提取方法之后获得的分数溶剂(7]。集中提取完全是通过干干氮和每个残留的重量被记录。每个残留溶剂溶解在各自的准备100毫克/毫升的浓度股票的解决方案,他们保存在冰箱里。
测试生物细菌和真菌菌株选择本研究从植物科学系的收集,斯里兰卡科伦坡大学。总共四个菌株即大肠杆菌(写明ATCC 35218),金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928), k .肺炎(写明ATCC 13883),美国粪(写明ATCC 9790)和三个真菌菌株,答:尼日尔,oxisporum和一个curvulariasp.被用于目前的调查。菌株的鉴定和确认,维护股票文化、量化和增长的微生物都是根据Jayathissa中描述的方法等。8]。
抗菌试验细菌培养都保持在营养琼脂偏4ºC和每一个微生物被激活之前敏测试通过转移到一个单独的试管中含有营养肉汤和孵化一夜之间在37ºC。他们悬浮在盐溶液0.85%氯化钠和调整收益率大约1.0×108-1.0×109通过使用分光光度计在600 nm CFU /毫升。抗菌试验是由阀瓣扩散法和测试的抗菌活性生物测定通过测量直径的抑制区使用陪审员召集令卡尺和用毫米表示(9]。实验进行了三次,结果三个复制的均值。菌株金黄色葡萄球菌(写明ATCC 9790)和大肠杆菌(写明ATCC 35218)被用来确定这些菌株显示麦克风值比别人重要的抑制作用。
最低抑制浓度(MIC)测定植物提取物的麦克风a evecta对菌株进行了单独使用标准纸片扩散法。测试材料的浓度系列800,600,400,200,100μg /盘准备利用股票的解决方案和实验中执行三个复制每个浓度水平和抗菌活性的意思表示的抑制区直径(毫米)的潜伏期。孵化后,MIC值计算根据自由扩散和耗散扩散模型作为描述Bonev et al。10]。
自由扩散模型自由扩散模型是基于这样一个假设:抗生素在固体营养培养基36自由扩散和麦克风的价值是决定使用一个阴谋,平方抑菌圈的大小(x)策划的自然对数抗生素浓度(c)。
扩散系数D,理应独立的浓度,而且抗生素扩散的时间。
根据耗散扩散模型,麦克风的价值决定使用一个阴谋,抑菌圈的大小(x)策划的自然对数抗生素浓度(c)。
扩散系数D,假定是独立的浓度,和V是一个系数描述耗散率。的选择模型可以用回归系数的值R2这是接近1
真菌文化保持在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)偏在4°C。几单菌的真菌从股票获得文化的尼日尔,f . oxisporum curvularia sp和分别接种在消毒PDA盘子。板是在室温下培养5 - 7天前重新激活敏试验(11]。抗真菌活性由有毒食品技术(11]。中提到的所有原油提取抗菌试验(乙醇、甲醇、二氯甲烷和丙酮提取物的叶子,根和根状茎)被用于抗真菌鉴定。干残留准备从每个提取和溶解在2.5%二甲亚砜(DMSO)准备储备溶液100毫克/毫升的浓度。其余的浓度(100、200、300、400和500μg /毫升)是由股票的适量混合溶液10毫升的熔融PDA 45°C和倒消毒板块(直径7厘米)12]。7毫米圆形真菌文化光盘被积极的利润增长7天古老文化的真菌通过使用无菌软木钻孔机和保存在每个新鲜的中心板试验。接种板在室温下孵化了4天,a . f . oxisporum尼日尔和7天,Curvularia sp。菌丝生长的抑制百分比计算使用以下方程通过比较菌落直径样板(植物提取物)和参考板(DMSO)。实验进行了三次,结果三个复制的均值。
收集的信息从一个人种药用与部落社会调查显示,不同部分的a . evecta被用于治疗各种类型的疾病。因此,抗菌分析a evecta进行长、根状茎和根分别提取原油提取准备在二氯甲烷、丙酮、甲醇、氯仿和乙醇选择分析的最佳溶剂。每个提取测试四菌株大肠杆菌(写明ATCC 35218),金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928),k .肺炎(写明ATCC 13883)和美国粪(写明ATCC 9790)和真菌污渍的尼日尔,F . oxisforum Curvularia sp。收集的数据从所有实验进行统计分析和方差齐性检验结果表明,植物之间有显著差异部分测试和不同溶剂测试抗菌活性在95%置信水平。除了氯仿提取,对所有其他提取显示高活动金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性)大肠杆菌(革兰氏阴性),它显示低活动),k .肺炎和美国粪。然而,根状茎的最高活动被发现丙酮提取物对金黄色葡萄球菌12.26±0.32毫米(图1一个)和大肠杆菌10.05±0.60毫米(图1 b)。类似于统计数据结果,我们可以观察到清晰的植物部分测试之间的差异和粉末在丙酮提取显示最高的活动产生的大的抑制区(表1)。抗菌分析a evecta粗提物表明,它可能是一个潜在来源开发广谱抗生素。
| 丙酮提取物的抑菌圈直径800μg /盘(毫米) | |||||
|---|---|---|---|---|---|
| 金黄色葡萄球菌 | 大肠杆菌 | ||||
| 的叶子 | 根 | 粉末 | 的叶子 | 根 | 粉末 |
| 8.09±0.28 | 8.62±0.32 | 12.26±0.32 | 7.88±0.60 | 10.05±0.60 | |
表1。抑制区展出金黄色葡萄球菌和大肠杆菌800μg /盘丙酮提取的运用evecta。
图1:丙酮提取物的抗菌活性运用evecta。):800μg /盘:金黄色葡萄球菌活动积极控制,B:根,C:的叶子,D:根状茎,E:消极的控制。b): E。杆菌活动800μg /盘:积极控制,B:根状茎,C:根,D:建成,E:消极的控制。
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌株人类的病原体,它可以引起许多疾病在人类包括心内膜炎,骨髓炎,毒性休克综合征,肺炎、食物中毒、痈等。13]。金黄色葡萄球菌是一种菌株,对快速增长的抵抗力抗生素。超过90%的金黄色葡萄球菌菌株含有质粒编码β内酰胺酶,酶,降低很多,但并非所有的青霉素。有些菌株对β内酰胺酶耐青霉素、甲氧西林和萘夫西林等进化与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和萘夫西林耐药金黄色葡萄球菌(NRSA) (8]。在这种情况下,使用现有的抗生素是不确定的,有必要寻找新的抗生素活性。有强烈的a . evecta活动对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌进行了进一步的分析与丙酮提取物a . evecta的根状茎。金黄色葡萄球菌的麦克风进行了分析(图2一个使用纸片扩散试验)和大肠杆菌。解读的结果从磁盘扩散方法实现模型依赖分析(10]。灵敏度测试的结果是很重要的在选择抗生素通常报告为麦克风,它被定义为最低浓度的药物,抑制微生物的生长。在大多数情况下,假设自由扩散的抗生素可能是不正确的,它会导致严重背离的预测行为实验细菌对抗生素的敏感性(10]。因此,阀瓣扩散法的结果进行了分析使用自由扩散模型和耗散扩散模型为了找到麦克风为每个应变值。模型描述了琼脂扩散试验期间的损失考虑抗生素扩散并提供更高精度的麦克风从试验确定。被选中的值使用的价值回归系数R2这是接近1。根据模型,结果显示麦克风的金黄色葡萄球菌(图2)和大肠杆菌290μg /阀瓣和195分别μg /盘。
图2:麦克风测定不同浓度的丙酮的粉末在金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25928)(800μg /盘,B: 600μg /盘,C: 400μg /盘,D: 200μg /盘,E: 100μg /盘,F:消极的控制)。
图2 b:耗散扩散模型的丙酮提取的粉末金黄色葡萄球菌。
答:evecta抗真菌活性的检测答:尼日尔,f . oxisforum Curvulariasp的食物中毒技术。所述抗菌试验a . evecta的叶子,根状茎和根中提取准备在二氯甲烷、丙酮、甲醇、氯仿和乙醇。中提取,乙醇和甲醇提取物的叶子,根和根状茎明显显示出明显的抗真菌活性答:尼日尔,oxisforum和Curvulariasp。
Curvulariasp,是家庭的重要成员之一,暗色孢科(棕色色素真菌),是一个大的和异质群体是相对常见的病原体的动物和人类在这两种情况下导致慢性非特异性过敏性鼻窦炎和创伤性皮肤感染(14]。乙醇和甲醇提取物的叶子和根茎显示超过60%的抑制Curvulariasp浓度时300μg /毫升(图3 c和图4)。然而,500年μg /毫升乙醇和甲醇提取物的叶子,根和根状茎足以导致抑制Curvularia增长100% (图3和图4)。
图3:抗真菌活性的乙醇提取物的根源运用evecta(弗斯特)。Hoffm反对Curvulariasp(- 500μg /毫升,B - 400μg / ml, C - 300μg /毫升,D - 200μg /毫升,E - 100μg /毫升,F-control)
图4:抗真菌活性的不同浓度的甲醇和乙醇提取物的叶子运用evecta对Curvulariasp。
总增长抑制f . oxisporum观察与根的乙醇提取500μg /毫升浓度和50%抑制观察到200μg /毫升。然而,乙醇提取的叶子和根茎显示,50%抑制浓度时300μg /毫升和400年分别μg /毫升。这些结果清楚地显示最好的抗菌活性与运用f . oxisporum evecta根,相比的叶子和根茎。
在所有真菌a尼日尔显示的最高抑制菌丝的生长和抑制100%在300μg /毫升的甲醇和乙醇提取根(图5)。不仅与甲醇和乙醇提取物,a尼日尔可能显示50%抑制增长与500μg /毫升二氯甲烷与丙酮根提取物(图5)。答:尼日尔是一种人类致病性真菌引起的疾病称为曲霉病。它产生致癌的真菌毒素在谷类、花生、辣椒等和消费的食品污染曲霉属真菌导致肾脏和肝脏损害。
图5:抗真菌活性的不同浓度乙醇、甲醇、二氯甲烷、丙酮提取物的根源运用evecta对答:niger.A
三个真菌菌株的所有收集的数据进行方差齐性检验,结果表明,没有显著差异的植物部分生长抑制真菌和经济增长之间有显著差异的真菌抑制原油与不同溶剂提取准备在95%置信水平。类似于我们的观察,统计分析数据显示,甲醇和乙醇提取物的响应率高于二氯甲烷与丙酮提取物的叶子根和根状茎的运用evecta在0.05水平的意义。指出抗真菌活动a尼日尔显著高于f . oxisforum Curvularia sp。叶的甲醇和乙醇粗提取物,根和根茎的evecta完全抑制a尼日尔增长300μg /毫升的浓度。答:evecta透露我们的显著的抗菌活性,是一个潜在来源分离和净化的新型抗菌药物。
a . evecta丙酮粗提取物的根,根状茎和叶子显示对金黄色葡萄球菌的抗菌活性(写明ATCC 25928)和大肠杆菌(写明ATCC 35218)。然而,最高的活动显示了丙酮提取准备从根状茎evecta。麦克风化验结果显示,最低浓度丙酮,根茎提取物需要抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别290μg /盘和195μg /盘。
抗真菌鉴定的结果表明,a。尼日尔是最敏感菌乙醇和甲醇提取准备从a evecta根显示100%抑制300μg /毫升。然而,f . oxisforum和Curvulariasp还显示100%的增长抑制500μg /毫升表明a evecta是开发抗真菌药物的潜在来源。
