体外酶抑制研究抗糖尿病的活动的成熟和温柔的叶子Mangifera籼稻Totapuri var

文摘

糖尿病是一种慢性疾病,其特征是高血糖水平,其关键管理缓解多种并发症。管理不善糖尿病往往先于dyslipidaemia和心脏疾病的发病率。Mangifera籼稻L (Anacardiaceae)是一种流行的印度园艺树也用于医药。那些和/或治疗糖尿病药叶一直在研究各种模型的活动;然而比较的那些潜在的成熟和温柔的叶子不是报道;叶子对碳水化合物的消化酶类的影响也不是报道。目前的研究是一个初步的报告比较水的那些属性methanolic提取的成熟和温柔的叶子M籼稻L var。Totapuri葡萄糖加载纯种白化病老鼠和体外我¡€葡糖苷酶和我¡淀粉酶抑制生物。重要的那些活动是在口服葡萄糖耐量试验观察与提取b.wt 500毫克/公斤。口服葡萄糖负荷之前一个小时。的提取物也表现出抑制大鼠肠道α-葡糖苷酶,以及猪胰α淀粉酶IC50: 21.03和35.73为成熟叶和嫩树叶提取物分别为27.16和22.01。 Thus the hypoglycaemic potential of mango leaves may be due to inhibition of carbohydrate digesting enzymes. Polyphenols, flavonoids and saponins identified in the extracts may be responsible for their hypoglycaemic activity.

关键字

Mangifera籼稻L,那些α葡糖苷酶、α淀粉酶、口服葡萄糖耐量试验

介绍

糖尿病是一种慢性疾病,其特征是控制血糖水平的增加超出自我平衡的范围由于胰岛素分泌不足或减少组织分泌胰岛素的反应。抗糖尿病的治疗的目的是实现normoglycaemia避免糖尿病相关并发症如肾病、神经病变,微/ macroangiopathy,视网膜病变,白内障[1]。餐后高血糖症是最早的疯狂的葡萄糖代谢指标。控制餐后高血糖症可导致视网膜病变的发病率下降了45%和其他微观和宏观血管并发症。一个重要的策略来降低餐后高血糖症是延缓葡萄糖的吸收利用碳水化合物消化的酶抑制剂如α葡糖苷酶和α淀粉酶[2,3]。

Mangifera籼稻绝壁。(Anacardiaceae)芒果是热带树生长在印度最受欢迎的水果。几个品种的树明显不同的芒果水果品种可用在印度和其他国家。这棵树的叶子被用作反刍动物饲料。ethnomedicinal用途包括治疗脓肿、中耳炎绞痛,腹泻、肝脏疾病、蛀牙、咳嗽和哮喘。热水提取口服糖尿病在尼日利亚医学。这棵树的叶子提取物已经报道了反nematodal和抗病毒活性。芒果苷,xanthone-C-glucoside芒果叶中主要化合物(4、5)。植物成份,如indicineαthujene 3 -蒈烯ocimene,萜品烯、莰烯、桧烯识别从蒸汽蒸馏叶油。从埃及芒果叶挥发油含有甲基、乙基、丙酯、正丁基、n-amyl和异丁基醇。 Triterpene alcohol: indecinol; taraxerone, taraxerol, friedelin, lupeol, galloyl p-hydroxybenzoyl esters of maclurin 3C-glucosides I-IV; galloyl esters of iriflophenone 3C glucosidesV,VI;(-) epicatechin-3-O-gallate, isomangiferin and a new xanthone C-glucoside gallate(VII) along with β-sitosterol have been isolated from leaf[6].

试图比较和研究成熟的抗糖尿病的活动和嫩的叶子Mangifera籼稻var。Totapuri口服葡萄糖耐量测试的叶提取物在大鼠和α葡糖苷酶和α淀粉酶抑制体外的活动。

材料和方法

收集的植物材料

米的温柔和成熟的叶子。研究籼l .品种Totapuri收集从健康树木的种植林GKVK,班加罗尔。成熟叶手动释放的尘埃和坚持收集材料。Mal-formed叶子,叶子象鼻虫和那些女孩被丢弃。排序的叶子在阴凉干燥室温大约十天垫在室内直到他们脆干。所以干叶子包装和储存在聚乙烯袋和被发现不受微生物污染。温柔的叶子被收集在二月和室温阴凉干燥室内。

来源的α葡糖苷酶和α淀粉酶

Microvillarα-葡糖苷酶与健康成年雄性大鼠体重200 - 250 g的方法描述Dalquist等[7];猪胰α淀粉酶从西格玛化学品采购;阿卡波糖是一个礼物样本Ajantha制药有限公司

植物提取物的制备

粉状药物材料的叶子都被refluxation与石油醚脱脂8小时。脱脂马克然后用70%甲醇水溶液回流了8小时。提取过滤,干燥使用旋转式真空蒸发器,储存在冰箱前使用。

筛查那些活动normoglycaemic口服葡萄糖耐量试验的老鼠

口服葡萄糖耐量试验(OGTT) normoglycaemic老鼠作为初步筛选试验评价antihyperglycaemic活动[8]。%抑制葡萄糖诱导高血糖在15分钟后在治疗动物相比,未经处理的动物口服葡萄糖政府(1克/公斤体重)是作为一个参数用于显示血糖过低的产权的m .籼稻提取物的筛选。

纯种白化大鼠的体重200 - 250克被分成三组,每组六个动物。这些动物禁食过夜。一小时葡萄糖加载之前,使用声望glucometer空腹血糖水平决定。第二和第三组的动物然后用500毫克/公斤b.wt管理。分别投标和成熟叶提取物。我担任控制。动物被装满glucose-1g /公斤体重1小时后用50%葡萄糖溶液提取管理。血液收集在15分钟,30分钟,1小时、2小时、3小时和4小时后葡萄糖加载和使用声望glucometer-strips血糖水平测定。总结了组织和结果的细节表1。结果分析的统计显著性方差分析的一种方式。

%减少葡萄糖诱导高血糖症是计算使用公式:

Gc =平均血糖水平的控制小组时间15分钟;Gt =平均血糖水平的治疗小组时间' t ';G0 =平均空腹血糖水平%减少葡萄糖诱导葡萄糖负荷后高血糖症在不同时间间隔记录表2。

动物的处理遵循协议经动物试验机构伦理委员会批准。

筛查体外α-葡糖苷酶抑制活性

分离大鼠肠道α葡糖苷酶稀释适当使用80毫米磷酸盐缓冲剂(pH值7.0)的蛋白质含量约为0.5 g / dl [9];所以稀释酶是蔗糖酶和麦芽糖酶活动被测试。麦芽糖酶抑制活性的提取物进行体外使用隔离大鼠肠道α-葡糖苷酶[10]。短暂地鼠肠道α葡糖苷酶与不同浓度的提取/阿卡波糖/车辆缓冲高达350年µl磷酸盐缓冲剂的pH值7.0摄于eppendorff管和孵化37°C为30分钟。500µl 28毫米麦芽糖的添加到每个管和孵化为20分钟37°C。酶促反应被将停止在沸水浴eppendorff管了两分钟,冷却。50αpippeted到反应混合物的分离井microtitre板,250µl葡萄糖氧化酶过氧化物酶试剂添加到每个井和孵化10分钟37°C。红色的强度为505 nm。抑制α葡糖苷酶定量降低葡萄糖形成红色的强度降低。

筛查体外α-淀粉酶抑制活性

体外猪胰α淀粉酶抑制活动是由一个方法使用Chloro-4-nitrophenolα-D-maltotrioside (CNP-G3)作为底物[11]。胰α-淀粉酶水解2-chloro-4-nitrophenolα-D-maltotrioside (CNP-G3)裂开终端葡萄糖释放2-chloro-4-nitrophenolα- d maltobioside (CNP-G2)给出了一个黄颜色的强度以405海里。任何抑制黄颜色的强度降低。生物测定,猪胰α淀粉酶与不同浓度的提取/阿卡波糖/车辆缓冲了高达90µl磷酸盐缓冲剂pH值6.9摄于井microtitre板块和孵化370 c 10分钟。125µl衬底的添加到每个和孵化370 c 8分钟。黄颜色的强度是衡量立即使用micro-plate读者。

抑制百分比(% I)为α葡糖苷酶和α淀粉酶是使用公式计算:

的决定进行了一式三份,平均%用于测定IC50。

IC50,标准测试提取或阿卡波糖的浓度显示50%抑制活动决心使用沼泽的基于对数概率元分析的计算机程序。测试的结果记录表3

植物化学的研究

定性化学测试,量化的淀粉、皂甙、茶多酚、皂素含量和总黄酮含量是评价的定性和定量差异的成熟和温柔的叶子。籼稻var . .Totapuri。植物化学的筛选提取由refluxation,受到化学测试。量化的总碳水化合物、皂素、多酚和服用富含内容也完成了。淀粉含量采用蒽酮法[12],皂素拉西普所描述的内容是由重量法等[13],多酚含量测定鞣酸等价物使用比色氧化/还原法[14],所有酚类化合物使用Folin Ciocalteau试剂。类黄酮含量的粉状药物决心使用氯化铝colourimetric方法利用芦丁标准[15]。

定性化学测试的结果所示表4淀粉、皂素、多酚和服用富含成熟的内容,反映在嫩的叶子表5

结果与讨论

口服葡萄糖耐量试验,口服葡萄糖负荷后血糖水平峰值处理和未经处理的大鼠观察15分钟(见表1)锥形高峰。提取治疗动物然而削弱在峰值血糖水平在15分钟后观察葡萄糖负荷比未经处理的动物。峰的削弱是略高于对温柔的叶提取相比,成熟叶提取。%抑制葡萄糖诱导高血糖在不同的时间间隔在对待动物相比,口服葡萄糖负荷后未经处理的动物了表2温柔叶提取物显示重要的那些潜在的OGTT四小时期间。成熟叶提取的不一样。在4小时血糖水平升高是正常招标叶、成熟叶然而降低血糖水平低于正常4小时起,葡萄糖负荷。

发现两个成熟以及招标叶提取物表现出α-葡糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性。成熟叶显示低IC50值α-葡糖苷酶,而温柔的叶子显示低IC50值α淀粉酶。成熟和温柔的叶提取物还显示在葡萄糖诱导高血糖症大鼠口服那些活动。调查揭示,早些时候ethanolic提取M。籼稻树皮作为αglucosidae和α淀粉酶活性的有效抑制剂体外(16、17);然而,冷水提取芒果叶没有任何明显的抑制猪胰淀粉酶[18]。refluxation我们的研究结果显示,使用水甲醇可能会影响提取的原则有效地抑制α-葡糖苷酶和α-淀粉酶芒果树叶。据报道,芒果叶提取物增加外围利用葡萄糖,增加肝脏和肌肉胰高血糖素含量,促进B细胞修复和再生,提高C -肽水平。其具有抗氧化作用和保护B细胞免受氧化应激。它产生胰岛素样作用降低糖化血红蛋白水平正常,调节血脂和规范STZ诱导microalbuminurea。 It therefore reduces long term diabetic complications[19]. Our findings strengthen the antidiabetic potential of mango leaf whose mechanism of hypoglycaemic activity may also be due to inhibition of carbohydrate digesting enzymes.

化学测试显示存在的酚类化合物,类黄酮、皂甙、碳水化合物和还原糖温柔和成熟的叶子。酚类化合物、皂苷和黄酮类化合物是抗糖尿病的报道/那些活动[20]。量化的淀粉、皂素、多酚和黄酮类药物粉末材料的内容显示更高的皂素、多酚、类黄酮含量在招标叶;然而成熟叶的淀粉含量较高。因此植物化学的成熟和温柔的叶之间的差异只是对植物成份的数量。叶子的M。籼稻也报道含有芒果苷(4、5),还发现了一些多酚在树叶[6]。Oxidative 压力 中 扮演 着 重要 角色 在 胰岛素 抵抗 和 -cell function[20].芒果苷和多酚表现出很强的抗氧化和自由基清除活性[20];除了芒果苷分离的根源Salacia网状根抑制蔗糖酶,isomaltase和大鼠晶状体醛糖redductase [23]。 Thus secondary constituents in mango leaves may mediate hypoglycaemic activity of the leaf extracts and also confer additional benefits of protection against hyperglycaemia induced oxidative stress .

结论

M.indicaleaves have been investigated earlier for hypoglycaemic activity[8, 18, 20], however a comparative study of mature and tender leaf is not reported; besides the effect of leaf extracts on carbohydrate digesting enzymes also is not reported. Our findings show hat both mature and tender leaves show hypoglycaemic activity in glucose induced hyperglycaemic rats; the extracts also inhibit rat intestinal alpha glucosidase and porcine pancreatic alpha amylase activities in-vitro. Thus M.indica var. Totapuri mature and tender leaf extracts may be potential agents for normoglycaemic control in patients with genetic risk of diabetes or marginal type II diabetes and/or obesity.

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