研究和评论:食品和乳品雷竞技苹果下载技术杂志》上
菜单ISSN: 2321 - 6204
ISSN: 2321 - 6204
+ 1-845-458-6882Sankarankutty米*和Palav年代
PG食品科学与营养学系SNDT女子大学,珠湖,印度孟买- 400049
收到了日期12/05/2016;接受日期27/05/2016;发表日期30/05/2016
访问更多的相关文章研究和评论:食品和乳品雷竞技苹果下载技术杂志》上
乳酸菌(实验室)在多种益生菌作为发酵剂传统食物准备。他们拥有的能力产生抗菌化合物如过氧化氢、双乙酰、有机酸和细菌素。细菌素近年来获得了利益作为天然防腐剂生产食品提高保质期。本研究旨在分离乳酸菌细菌素生产能力,从总裁和aagal。10个样本总裁& 10 aagal样本来自不同地区和在孟买为乳酸菌的筛选。细菌素产生实验室总裁隔绝。隔离被发现是一个革兰氏阳性cocco杆菌、氧化酶积极和过氧化氢酶阴性。细胞分离的自由浮层显示对常见食源性病原体的抗菌活性。葡萄球菌,S。伤寒,E。杆菌、K。肺炎,C。坂,假单胞菌和L.plantarum。它显示出最高的活动食物病原体Cronobacter坂。细菌素是使用1 n盐酸沉淀。它被发现是稳定在100ºC 60分钟,活动在酸性条件下最高。这是影响蛋白水解酶(胰蛋白酶)。细菌素能够减少病原体的生长,当应用于食品(pedha)。细菌素的进一步研究可能进行探索的可能性,它的使用作为加强食品生物防腐剂食品的货架寿命。
乳酸菌细菌素,Aagal。
2013年、818年食源性疾病暴发的报告,导致13360人患病、1062人住院治疗,16例死亡,14食品召回。这些疫情的调查显示,原因包括食物病原体像沙门氏菌,志贺氏杆菌,大肠杆菌、霍乱弧菌、李斯特菌(1]。食物引起的感染是常见的公共卫生问题,从微生物的存在或结果微生物毒素或土著有毒物质,污染食物。各种各样的化学和物理保护技术已经被用来减少食品变质和增加食品的货架寿命。尽管这些方法的可用性,保存的食物是伟大的公众关注这些方法使得人类食用的食物不安全。
近年来有一个增加的趋势使用biopreservatives保护文化的形式或其代谢物,即。、酶和细菌素。Biopreservation指的是利用拮抗微生物或其代谢产物抑制或破坏不良食品中生物。实验室多年来一直利用发酵食品的生产由于其生产能力的变化口味,风味和质地以及抑制致病性腐败微生物(2]。他们广泛分布在不同的生态系统和食品中常见(发酵乳制品,肉类和蔬菜、酵母、饮料),污水,在植物和生殖器,人类与动物的肠道和呼吸道(3]。微生物实验室通常被认为是有益的,有些品种甚至认为促进健康(益生菌),和广泛的历史使用有助于他们验收作为肝(通常被认为是安全的)供人类食用4]。许多不同的因素已确定为实验室的抗菌活性。这些细菌产生不同的抗菌素等乳酸、过氧化氢、二氧化碳、醋酸和细菌素,它可以抑制致病性和腐败微生物提高保质期(2]。
细菌素是由细菌肽释放具有抑菌或杀菌活动对相关或不相关的生物。细菌素在食品行业的应用可以延长食品的保质期。它提供额外的保护在温度滥用条件,减少食源性致病菌的传播风险通过食物链,减少经济损失由于食物变质,减少化学防腐剂的应用程序,并允许应用程序不太严重的热处理在不影响食品安全。细菌素也提高食物的营养和维生素的保存,以及食物的感官特性和许可营销小说类型的食物。最突出的类细菌素,乳酸链球菌肽是唯一一个国际公认的食品biopreservative在某些工业应用。最近,pedocin也是另一个商用细菌素准备食品应用和目前的研究预测,这些准备的计数在不久的将来会大大增加(5]。
研究表明,乳酸菌具有产生细菌素的能力。细菌素可以用作食品防腐剂。实验室作为益生菌可以接种细菌素的食物。本研究将有助于隔离的实验室更强的抗菌活性,因此小说细菌素的生产。这项研究的结果将有利于食品工业领域的食品保存。因此这项研究的目的是分离实验室产生细菌素从总裁和Aagal (Kokum集中),自主使用马哈拉施特拉邦的食品。
系的研究进行了SNDT女子大学食品科学与营养Juhu.10总裁样本获得的孟买和10个样本来自不同地方Aagal收集来自不同位置在西部马哈拉施特拉邦。直到分析样本保存在冷藏温度。
文化习惯
所有的文化。金黄色葡萄球菌芽孢杆菌,大肠杆菌,克雷伯氏菌、伤寒杆菌、c .坂l .杆菌写明ATCC 8014年,用于项目工作标准菌株从NCIM,浦那。
样本连续稀释用无菌生理盐水,然后镀倾注平皿法各自的媒体。板总数的结果记录在孵化后的24小时37ºC,而实验室计数和酵母霉菌总数记录后48小时在室温下孵化。孤立的实验室将会生长在汤夫人在厌氧条件下(6]。
抗菌试验是利用扩散法(7]。在扩散试验,井准备在穆勒辛顿琼脂使用无菌软木钻孔机。测试生物体整个都是有好和抗菌试验。所使用的测试生物金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、芽孢杆菌、克雷伯氏菌、假单胞菌,Cronobacter坂和伤寒杆菌。井装满0.1毫升细胞自由浮层(CFS)。抗菌活性测定的抑制区(7]。抗菌试验的L。杆菌的写明ATCC 8014 spectrophotometerically决定在600海里(8]。
细菌素的浓度
硫酸铵沉淀
细胞自由浮在表面的生产处理固体硫酸铵饱和度为90%。混合搅拌2 h,保持在4ºC。然后是离心机在2500 rpm 15分钟。沉淀re-suspended在25毫升0.05磷酸盐缓冲剂(pH值7.0)。测定细菌素的活动进行沉淀和上层的知道哪个实际上包含了细菌素。
三氯乙酸沉淀
细胞自由上层清液混合和三氯乙酸沉淀。混合物在13000转离心10分钟后上层清液提供了。结果颗粒溶解在磷酸盐缓冲剂。
盐酸沉淀
细胞自由浮在表面的处理1 n HCl直到饱和,一夜之间保持在4°C。CFS当时在2000转离心20分钟和沉淀,上清液分离和检查抗菌活性。细菌素沉淀是通过使用1 n盐酸酸性降水。
测量区域的抑制
细胞自由上层清液添加到井在琼脂播种S.aureus,大肠杆菌,S.typhi,K.pneumoniae和抑制测量的区域(7)(表1)。
| 生物指标 | 抑制区(毫米) |
|---|---|
| S.aureus | 24 |
| 大肠杆菌 | 20. |
| S.typhi | 27 |
| K.pneumoniae | 17 |
| C.sakazakii | 29日 |
表1:孤立的细菌素抑制各种指标生物。
影响温度、pH值和酶在细菌素
热敏感的细菌素研究CFS在不同的温度下加热- 55ºC, 60ºC, 70ºC, 80ºC 90ºC, 100ºC和使用积极的抗菌试验进行了测试生物体。同样CFS治疗在100ºC 10, 20、30、40、50、60分钟。CFS在一系列调整pH值1,2,3,4,5、9、11使用1 n氢氧化钠和盐酸1 n。和抗菌试验进行了使用积极的测试生物体。细胞自由浮在表面的检查敏感性对胰蛋白酶在不同浓度和孵化37°C 2小时和加热在100°C为5分钟变性酶。控制和样本化验的抗菌活性(10]。
生物保护的牛奶产品(Pedha)
5 g Pedha接种在50毫升的缓冲蛋白胨水。这是接种106细胞/毫升金黄色葡萄球菌。然后测试细菌素添加到观察pedha细菌素对金黄色葡萄球菌的影响。这是连续稀释104稀释和镀在平皿计数琼脂和孵化24小时37ºC。菌落计数被记录下来,与控制(没有细菌素)(10]。
革兰氏染色法,过氧化氢酶和氧化酶试验进行了隔离。
筛查实验室
总裁和aagal样本筛查实验室。11隔离从10总裁皮样品& 6隔离的10个样本aagal孤立使用琼脂夫人。这些17隔离进行抗菌活性检测和隔离总裁显示最好的抗菌活性。这种积极的总裁样本(P8)获得Potoba餐厅,Mahim。
抗菌试验P8隔离的测试生物体
细胞分离的自由浮层显示抗菌活性S.aureus,大肠杆菌,S.typhi,K.pneumoniae除了芽孢杆菌(图1)。也观察抗菌活性假单胞菌,c .坂和L.plantarum写明ATCC 8014。
图1:抑制测试生物控制和测试隔离。(l .杆菌作为一个积极的控制,因为它是一个已知的细菌素生产商)。
测量区域的抑制
的抑制区c sakazaki当时视为最高的K。肺炎显示至少抑制区。
细菌素的浓度沉淀
细菌素沉淀是通过使用1 n盐酸酸性降水。浮层显示抗菌活性和沉淀不显示活动。这表明,孤立的细菌素在本质上是肽。
影响温度、pH值和孤立的细菌素酶
孤立的细菌素被发现稳定在100ºC 60分钟。它也观察到当CFS是加热超过40分钟;其活动对K.pneumoniae是降低了。孤立的细胞自由浮层被发现以来活跃在酸性条件下观察抑制在酸碱1到4,而不是在5、9岁和11岁。从隔离细菌素的抗菌活性是完全由蛋白水解酶抑制胰蛋白酶浓度的2000 u / g表明隔离细菌素蛋白质的在自然界中。
生物保护的牛奶产品(pedha)
部分纯化的防腐剂效果观察细菌素(表2)。有样品中的细菌总数的减少细菌素处理相比,在控制(没有细菌素)。
| 测试 | 观察 |
|---|---|
| 菌落形态 | 小,圆形,白色,butyrous |
| 革兰氏染色法 | 革兰氏阳性coccobacilli |
| 过氧化氢酶 | 负 |
| 氧化酶 | 积极的 |
| 测试生物 | |
| S.aureus | + |
| 芽孢杆菌 | - - - - - - |
| L.plantarum写明ATCC 8014 | + |
| C.sakazakii | + |
| 大肠杆菌 | + |
| S.typhi | + |
| K.pneumoniae | + |
| 假单胞菌 | + |
表2:P8孤立的微生物和生化特征。
讨论
从乳酸菌细菌素被用作生物防腐剂因其抗菌和热稳定的性质。在目前的研究中,乳酸菌被孤立的总裁和aagal。实验室的隔离aagal是困难的可能是由于其固有的抗菌特性。Sutar等人报道,kokum提取物的抗菌活性是由于存在糠醛(11]。但实验室是孤立于水果、果汁和叶围Kokum [12]。
细菌素从总裁孤立与广泛的活动显示最大的抑制对食物病原体坂。尽管细菌素抑制金黄色葡萄球菌,它未能抑制芽孢杆菌。古普塔和女子13)报道,plantaricin LD1显示广泛的活动,抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性菌包括食源性致病菌(13]。Agaliya和Jeevaratnam孤立8株的实验室idli面糊显示最大抑制区与其他实验室和各种革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌(14]。细菌素是沉淀使用1 n盐酸而Ogunbanwo et al .,进行了细菌素通过硫酸铵沉淀,柠檬酸降水。具体活动增加到85.3和44.4 AU / g蛋白l .杆菌F1和l .短OG1分别(7]。
热量和pH值的影响进行了研究在孤立的细菌素。是稳定的100°C的60分钟,发现pH值依赖(pH值1到4)。产生的细菌素l .短OG1被发现温度稳定在121°C 60分钟& pH值在2 - 8,而对于l .杆菌F1,它被发现热稳定在121°C到90分钟,pH值2到6 (7]。细菌素的分离总裁胰蛋白酶酶处理时失去了活动。产生的细菌素的抗菌活性l .短OG1和l .杆菌F1时失去了处理蛋白水解酶(7]。
细菌素的细菌计数(3.94×104cfu / gm)相比,那些年代。球菌(7.06×104 cfu /通用)和正常菌群pedha (4.84×104cfu /通用),减少数。这表明,细菌素可能是一个潜在的食品防腐剂。Chopra et al .,与sonorensin涂层进行类似的实验包装的电影。是观察到的肉样品的损坏发生在控制电影而没有观察到腐败sonorensin包装样品(15]。微生物数量显著减少部分纯化的细菌素分离KN02处理时,在牛奶和可食用的蘑菇10]。
这种细菌素产生分离革兰氏阳性cocco杆菌、氧化酶积极和过氧化氢酶阴性。Elyas et al。16)确定40株分离出七个苏丹发酵食品。所有的隔离是革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性,nonendospore成型,并从葡萄糖产酸。因此他们自动识别为乳酸菌(16]。
总之,本研究表明,总裁孤立的细菌素具有广泛的抗菌活性对常见食品病原体。耐热性和影响生物防腐剂pedha研究。本研究因此得出结论,细菌素的分离可以用作食品防腐剂和潜在的益生菌。进一步研究优化生长条件等细菌素的最大细菌素的生产、纯化和表征可以帮助我们识别细菌素的新奇。