隔离的槲皮素和山柰酚Azadirachta Indica叶子和其对临床分离协同行动多耐药菌株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

文摘

本研究的目的是孤立的两个主要黄酮类化合物槲皮素和山柰酚P-HPLC从Azadirachta Indica叶子和其对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的活动。黄酮类化合物的分离和鉴定分析柱,而孤立的通过制备列Intersil ODS-3 C-18及其成分的分析方法。抗生素(头孢克肟、头孢曲松、红霉素、环丙沙星、头孢拉啶、甲氧西林、氨苄青霉素,Levoflaxacin和阿莫西林)和类黄酮(槲皮素、山柰酚、槲皮素的组合+山柰酚)进行评估对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。结果表明,头孢克肟,头孢曲松钠、环丙沙星、头孢拉啶、甲氧西林、氨苄西林和阿莫西林对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌单独测试时不活跃,但当结合槲皮素、山柰酚和Q + K显示价值anti-MRSA活动,同时测试了黄酮类化合物显示被发现是不影响红霉素和导致减少Levoflaxacin Ciprofloxacint。

关键字

头孢曲松钠;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Methicillinresistant;金黄色葡萄球菌

介绍

酚类化合物是植物的重要的次生代谢物报道多样化的和重要的生物和药理活性,如抗菌、抗真菌、抗病毒,抗肿瘤,含有抗炎(1- - - - - -4]。这些化合物也似乎在某种癌变过程中有效的和一些心血管疾病(4,5]。酚类化合物也作为天然抗氧化剂或作为食品添加剂保存食品感官和营养量(6,7]。类黄酮是一种重要的和最大的酚类化合物,普遍存在于植物和植物基础产品,与广泛的促进健康的影响(8]。这些化合物的存在和浓度不同,即使在同一植物在不同成熟阶段和器官相同的植物。一些植物酚类化合物的极好来源,并建议用于保存食物以及获得健康益处(9]。槲皮素和山柰酚是基本的类黄酮具有抗氧化,抗菌,抗病毒,抗诱变剂的抗炎特性(10]。

Azadirachta Indica(答:籼稻)以乌尔都语名字印楝,属于桃花心木家人楝科(11,12]。不同部位(根、茎、树皮、树叶、花、水果和种子)答:籼稻传统上用于治疗感染,炎症、发烧、口腔疾病和皮肤病(13- - - - - -15]。超过140个活性化合物已经隔绝籼稻,包括酚类化合物、生物碱、常用药用,类黄酮、类胡萝卜素、酮和类固醇(16- - - - - -19]。

材料和方法

收集细菌培养

金黄色葡萄球菌(n = 100)收集微生物实验室的三级保健医院开教学医院,雷丁女士医院和Hyathabad医疗复杂肃贪会巴基斯坦白沙瓦。收集到的MRSA菌株进行了微生物学微生物实验室(iso - 17025) PCSIR实验室复杂白沙瓦和培养在同一天内2小时的集合。耐药菌株被孤立和进一步分析。

收集的植物

的答:籼稻巴基斯坦从植物园收集科学与工业研究理事会(PCSIR)实验室复杂白沙瓦,肃贪会,巴基斯坦。完全新鲜的绿叶被选在初始阶段,在2012年4月- 7月成熟。样品叶子都是用足够的水,洗净晒干在真空干燥箱40°C 48小时。干燥的叶子和商业磨床和渗坠毁。粉末样本存储在聚乙烯袋浆果,内阁中进行进一步分析。

准备的提取

20克的干树叶和200毫升蒸馏水浸软。50毫升的水提物是分馏石油醚除去脂肪物质。水提物是然后用50毫升乙酸乙酯提取。乙酸乙酯提取在无水干H₂所以₄和蒸发干燥下N₂流在40°C。

描述了采用高效液相色谱法测定槲皮素和山柰酚

两类黄酮被分析柱分离Intersil ODS-3 C-18(5μm, 4.6×250毫米)用流动相乙腈和0.2%甲酸水溶液组成70:30 1毫升/分钟的流量的总运行时间20分钟用紫外可见检测器。

隔离的槲皮素和山柰酚P-HPLC

按比例缩小的制备色谱过程类似于分析过程,可以收集感兴趣的高峰。槲皮素和山柰酚孤立和通过半制备柱Intersil ODS-3 C-18(5μm, 6.0×250毫米),使用移动阶段及其成分的分析方法。可接受的制备分离通过使用0.10毫升注射。10毫升/分钟的流量设定。

结果

槲皮素和山柰酚的集合

槲皮素和山柰酚被外部标准的高效液相色谱法分析程序。分数集合是通过软件和设置窗口从7.0到8.0的峰收集槲皮素和山柰酚11.0到12.0,而其他山峰的窗外没有收集。收集化合物的纯度显示紫外线区域% 86,89%为槲皮素和山柰酚的纯度。

槲皮素和山柰酚对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

槲皮素、山柰酚、槲皮素和山柰酚(Q + K)进行评估对临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。槲皮素和山柰酚发现更积极的组合。槲皮素的抑制区(500μg /毫升)是13.42毫米,山柰酚(500μg /毫升)是18.30毫米,而抑制Q + K区(250 + 250μg /毫升)是10.30毫米的组合对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。这些化合物的麦克风价值稀释法,测定了表1。槲皮素是410年发现的麦克风μg /毫升和山柰酚370μg /毫升。

表1。禁忌的平均区仅在±标准差(毫米)的抗生素和类黄酮对临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株。

抗生素敏感性分析

抗生素和类黄酮对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株进行了评估。大多数的抗生素被发现时不活跃的单独测试,加强活动时结合槲皮素、山柰酚和Q + K。500μg /毫升的槲皮素显示活动最高最低头孢拉啶片18.0毫米和4.5毫米与环丙沙星。山柰酚显示最高活动22毫米对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌结合头孢曲松钠时,同时结合环丙沙星时最低7.0毫米。Q + K相对显示最低的组合活动时结合抗生素。槲皮素和山柰酚被发现比Q + K更活跃的组合。

麦克风的类黄酮和Flavonoids-Antibiotics增量增加的方法

麦克风的槲皮素、山柰酚、Q + K,结合抗生素对抗MRSA一半稀释法测定了表2。

表2。麦克风的抗生素类黄酮。

麦克风的槲皮素、山柰酚和Q + K决定测试的敏感性和耐药性微生物菌株。结果表明槲皮素的麦克风价值被发现对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌460μg /毫升时加上电阻药物例如头孢克肟,头孢曲松钠、甲氧西林、氨苄西林和阿莫西林,而440μg /毫升时结合头孢拉啶。

山柰酚的麦克风价值被发现在360 - 480范围μg /毫升在结合不同药物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。麦克风价值360μg /毫升时结合头孢曲松钠,380μg /毫升与阿莫西林和440μg与甲氧西林/毫升,460μg /毫升与氨苄青霉素与头孢克肟头孢拉啶和480μg /毫升。儿茶素显示活动范围480 - 500μg /毫升对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。儿茶素的MIC值对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌500μg /毫升头孢克肟结合时,先锋霉素,甲氧西林和阿莫西林,而480μg /毫升时结合氨苄青霉素和头孢曲松。下面的没食子酸被发现耐药与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌500μg /毫升时,结合先锋霉素,甲氧西林、氨苄西林和阿莫西林,而不低于480μg /毫升时结合头孢克肟和头孢曲松钠。

讨论

在体外抗菌药物敏感性测试是用来评估发现微生物菌株的耐药性与抗菌剂。这些代理产生自然微生物或综合实验室。抗生素、抗病毒、抗真菌和其他植物酚作为抗菌药物等生物活性化合物。

在当前研究中不同的抗生素(头孢克肟、头孢曲松、红霉素、环丙沙星、头孢拉啶、甲氧西林、氨苄青霉素,Levoflaxacin和阿莫西林),和类黄酮(槲皮素、山柰酚和Q + K)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行了评估。许多研究人员隔离具有抗菌活性的植物来源的黄酮类化合物,如由巴西芹黄素,et al (20.),galangin Cushnie和羊肉(21),由Rauha柚苷配基,et al。22),由佐藤木樨草素等。23由Cushnie和羊肉[],槲皮素21),由亨德拉芦丁,et al (24和山柰酚Cushnie和羊肉21]。Dhayanithi et al。25研究不同植物的叶萃取精华,显示对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的活动,这是对甲氧西林耐药,万古霉素、环丙沙星。刘,et al。26]研究了山柰酚对抗生素耐药细菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的影响他们发现山柰酚大大影响氟喹诺酮类原料药的组合。抗生素头孢克肟、头孢曲松钠、环丙沙星、头孢拉啶甲氧西林、氨苄西林和阿莫西林被发现时不活跃的单独测试,加强活动时结合槲皮素、山柰酚和Q + K。虽然测试黄酮类化合物被发现是不影响红霉素和导致减少Levoflaxacin Ciprofloxacin002E (图1和2)。

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